Gels were photographed and PCRbands

Gels were photographed and PCR
bands quantified by using a standard DNA (100 bp ladder, Promega).
PCR products were then separated by Denaturing Gradient Gel
Electrophoresis (DGGE) [(Dcode TM universal mutation detection
system, Bio-Rad)], using the procedure first described by Muyzer,
De Waal, and Uitterlinden (1993) and improved by Leesing
(2005). Similar amounts of PCR amplicons were loaded into 8%
(w/v) polyacrylamide gels (acrylamide/N,N-methylene bisacrylamide,
37.5/1, Promega) in 1 TAE buffer (40 mM TriseHCl, pH 7.4,
20 mM sodium acetate, 1.0 mM Na2-EDTA). Electrophoreses were
performed at 60 C, using a denaturing gradient in the 30e60%
range (100% corresponding to 7 M urea and 40% v/v formamide,
Promega). The gels were electrophoresed at 20 V for 10 min and
then at 80 V for 12 h. After electrophoresis, the gels were stained for
30 min with ethidium bromide, rinsed in distilled water for 20 min
and then photographed as described above.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เจถูกถ่าย และ PCRวง quantified โดยใช้ดีเอ็นเอมาตรฐาน (100 bp บันได Promega)ผลิตภัณฑ์ PCR ได้แล้วคั่น ด้วย Denaturing เจลไล่ระดับElectrophoresis (DGGE) [(Dcode TM กลายพันธุ์สากลตรวจสอบระบบ Bio Rad)], ใช้ครั้งแรก โดย MuyzerDe Waal และ Uitterlinden (1993) และปรับปรุง โดย Leesing(2005) จำนวน PCR amplicons คล้ายถูกโหลดเป็น 8%(w/v) polyacrylamide gels (อะคริลา ไมด์/N, N-เมทิลีนได bisacrylamide37.5/1, Promega) ในบัฟเฟอร์เต้ 1 (40 มม. TriseHCl, pH 7.420 mM โซเดียม acetate, 1.0 mM Na2 EDTA) Electrophoreses ได้ดำเนินการใน 60 C ใช้ไล่ denaturing % 30e60ช่วง (100% สอดคล้องกับ urea 7 M และ 40% v/v formamidePromega) เจได้ electrophoresed ที่ 20 V ใน 10 นาที และแล้วที่ 80 V สำหรับ 12 h หลังจาก electrophoresis เจจะมีสีสำหรับมีโบรไมด์ ethidium, rinsed ในน้ำกลั่นสำหรับ 20 นาที 30 นาทีและถ่ายภาพตามที่อธิบายไว้ข้างต้นแล้ว

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เจลถูกถ่ายภาพและ PCR
วงดนตรีที่วัดโดยใช้ดีเอ็นเอมาตรฐาน (100 บันได bp, Promega).
ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกแยกออกแล้วโดย denaturing ไล่โทนสีเจล
Electrophoresis (DGGE) [(Dcode TM
การตรวจหาการกลายพันธุ์สากลระบบBio-Rad)] โดยใช้ ขั้นตอนแรกโดย Muyzer,
De Waal และ Uitterlinden (1993) และการปรับปรุงโดย Leesing
(2005) จำนวนที่ใกล้เคียงของ amplicons PCR ถูกโหลดลง 8%
(w / v) เจลอะคริเลต (ริลาไมด์ / N, N-bisacrylamide เมทิลีน,
37.5 / 1, Promega) ใน 1? บัฟเฟอร์ TAE (40 มิลลิ TriseHCl พีเอช 7.4,
20 มิลลิ acetate โซเดียม 1.0 มิลลิ Na2-EDTA) Electrophoreses ถูกดำเนินการใน 60 C โดยใช้การไล่ระดับสี denaturing ใน 30e60% ช่วง (100% สอดคล้องกับ 7 M ยูเรียและ 40% ปริมาตร / ปริมาตร formamide, Promega) เจลถูก electrophoresed ที่ 20 V เป็นเวลา 10 นาทีและจากนั้นที่80 V 12 ชั่วโมง หลังจากที่อิเลคเจลที่ถูกย้อมสีสำหรับ30 นาทีกับโบรไมด์ ethidium ล้างในน้ำกลั่นเป็นเวลา 20 นาทีและถ่ายภาพแล้วที่อธิบายข้างต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เจลได้ถ่ายภาพและ PCR
แถบวัดโดยใช้ดีเอ็นเอมาตรฐาน ( บันได , 100 BP promega ) .
ผลิตภัณฑ์ PCR จึงแยกจากกันโดยี่ลาดเจล
electrophoresis ( การทดลอง ) [ ( dcode TM สากลการตรวจหา
ระบบชีวภาพราด ) ] , การใช้ขั้นตอนแรกที่อธิบายโดย muyzer
, เดอ วาล และ uitterlinden ( 1993 ) และการปรับปรุงโดย กาหลง
( 2005 )จำนวนที่คล้ายกันของ PCR amplicons ถูกโหลดลง 8 %
( w / v ) ( โพลีอะคริลาไมด์เจลอะคริลาไมด์ / n n-methylene bisacrylamide 37.5/1
, , promega ) ใน 1  แทบัฟเฟอร์ ( 40 มม. trisehcl pH 7.4
20 มิลลิเมตรโซเดียมอะซิเตต , 1.0 mM EDTA ๆ ) electrophoreses ถูก
แสดงที่ 60 องศาเซลเซียสโดยใช้ี่ลาดในช่วง 30e60 %
( 100% สอดคล้องกับ 7 M ยูเรียและ 40 % v / v Formamide ,
promega )เจลเป็น electrophoresed 20 V 10 นาที
แล้วที่ 80 V 12 ชั่วโมง หลังจากอิเล็กเจลใช้ย้อมสำหรับ
30 นาทีกับทิเดียมโบรไมด์ , ล้างในน้ำกลั่นนาน 20 นาทีแล้วถ่ายรูป

ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น