4. DiscussionIt has been previously

4. Discussion
It has been previously found that plant pathogen inhibition by compost teas are at least partially attributed to the presence of live microorganisms (Scheuerell and Mahaffee, 2004, Scheuerell and Mahaffee, 2006, Diánez et al., 2006, Gea et al., 2009, Koné et al., 2010 and Dionne et al., 2012). In this study, the antifungal effects of bacteria from sheep manure compost tea were examined against mycelial growth of A. solani and B. cinerea as well as disease lesions on tomato fruit. This study showed that the bacteria had the ability to greatly reduce the mycelial growth of B. cinerea and/or A. solani. Among the bacteria tested, B. linens (IC10) and B. subtilis gave the highest inhibition of both tested pathogens, reducing the mycelial growth from 57% to 70% ( Table 1). Two A. incenata isolates, A. aminovorans, and another B. linens isolate (IB16) were also inhibitory to at least one of these molds, albeit to a lesser extent. Previous reports have shown that these antagonists have the ability to inhibit the mycelial growth of various plant pathogens. Indeed, A. incenata had been shown to inhibit the mycelial growth of Phytophthora parasitica Dastur var. nicotianae (Breda de Haan) Tucker ( Jin et al., 2011). B.subtilis has been shown to affect the growth of numerous plant pathogens including Peronophythora litchi Chen ex Ko et al. ( Jiang et al., 2001), Gaeumannomyces graminis var. tritici Walker, Coniella diplodiella (Speg.) Petr. & Syd., Phomopsis sp., and Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary ( Liu et al., 2009), A. solani, B. cinerea, Fusarium sambucinum Fuckel, and Pythium sulcatum R.G. Pratt & J.E. Mitch. ( Wise et al. 2012).B.linens had previously shown mycelial inhibition of Phytophthora vignae Purss ( Fernando and Linderman, 1994). To the best of our knowledge, this is the first report of A. aminovorans demonstrating antagonistic effects on mycelial growth of plant pathogens.

The two most effective isolates in vitro, B. linens (IC 10) and B. subtilis, were further tested for their inhibitory effects in vivo on disease of tomato fruit artificially-inoculated with B. cinerea or A. solani. Co-application of the bacteria failed to control A. solani. Conversely, co-application of bacteria frequently demonstrated inhibition of the development of B. cinerea lesions by up to 61% ( Fig. 2). B.subtilis has been frequently shown to alleviate plant disease in vivo ( Ongena and Jacques, 2008 and Falardeau et al., 2013). Although there have been few reports, ability of B.linens to control disease in plant pathogens has been previously shown ( Fernando and Linderman, 1993).

The preventive application of the bacteria improved the inhibitory effect of the bacteria on A. solani lesions. Indeed, the higher bacterial cell/fungal spore ratio showed that treatments with B. subtilis as well as the combined B. linens/B. subtilis treatment became inhibitory to A. solani when the bacteria were allowed to establish prior to pathogen inoculation. This may indicate that suppressive effects of bacteria are partly because of inhibition of fungal spore germination and/or penetration inside the plant cells as have been shown previously ( Diánez et al., 2007 and Siddiqui et al., 2009). At the lower bacterial cell/fungal spore ratio, a preventive application also generally improved the ability of the bacteria to control B. cinerea lesions. At the higher bacterial cell/fungal spore ratio, there was little difference in control between a co-application ( Fig. 2) and a preventive treatment ( Fig. 4) for B. cinerea. These results indicate that fungal disease pressure and bacterial concentration, as well as timing of the bacterial applications are important factors in the disease control outcome.

Of particular note, the combined B. linens/B. subtilis treatment was frequently more inhibitory than the same concentration of either bacterium alone. This would indicate the possible synergistic effects of both bacteria on improving control of a fungal pathogen as has been shown previously ( Avis et al., 2008).

Extracts from dual confrontation cultures showed inhibitory effects against both mycelial growth and spore germination of A. solani and B. cinerea ( Fig. 5 and Fig. 6). These results indicated that the bacteria produced extracellular antifungal compounds and that antibiosis may therefore be part of their mechanisms of action against fungi ( Fravel, 1988). B.subtilis strains have been shown to produce numerous peptide ( Ongena and Jacques, 2008 and Falardeau et al., 2013) and non-peptide ( Hamdache et al., 2011 and Wise et al., 2012) antimicrobial compounds. Among the most studied of these antimicrobials are the three cyclic lipopeptide families surfactin, iturin, and fengycin ( Ongena and Jacques, 2008 and Falardeau et al., 2013). Conversely, less is known about B. linens antimicrobials. B.linens has been found to produce an antibacterial peptide ( Motta and Brandelli, 2002) as well as the antifungal compound methanethiol ( Kerr, 1999). When B. subtilis was further investigated for its potential antifungal compounds, it was revealed that it produced two variants of the antimicrobial cyclic lipopeptide surfactin ( Pecci et al., 2010 and Falardeau et al., 2013). Surfactin is produced by many antagonistic Bacillus spp., including B. subtilis, and is reported to provide antimicrobial effects by pore formation in cell membranes. While surfactins are generally thought to be more inhibitory against bacterial cells and to possess less antifungal activity ( Pérez-García et al. 2011), other work has shown their antifungal effects on various fungal cells ( Chan et al., 2009, Cao et al., 2012 and Rebib et al., 2012).

Although B. linens IC10 and B. subtilis had similar in vitro efficacy against both fungal mycelia, their activity was much different in suppressing tomato fruit diseases. Indeed, the bacteria were much more effective in controlling B. cinerea on tomato whereas they were much less effective against A. solani. This was also apparent when assessing antifungal compounds in the crude bacterial extracts. Again, bacterial extracts showed similar antifungal effects against mycelial growth and spore germination of both fungi, whereas they were much less effective against A. solani in vivo. This may indicate that mechanisms in addition to antibiosis might be involved in the increased suppressive effects of the bacteria toward B. cinerea, such as induction of plant defense mechanisms in the tomato ( Zhang et al., 1998, Haggag and Saber, 2007 and Siddiqui et al., 2009).

Overall, results from this study showed that bacteria isolated from suppressive compost tea inhibited fungal growth in vitro and disease in vivo. The two most effective bacteria were often found to function in synergy. Antifungal compounds, including surfactins, were found in the bacterial extracts suggesting that antibiosis is a main mechanism of action. However, mode of action involving induction of tomato defense responses may also be involved. Future work will attempt (i) to profile and identify microbial antagonist populations by PCR-DGGE and pyrosequencing in highly suppressive compost teas and (ii) to identify compost tea preparation parameters that enhance populations of these antagonist bacteria as well as (iii) to identify additional antifungal compounds and elucidate their modes of action.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

4. สนทนามันมีก่อนหน้านี้พบว่า ยับยั้งการศึกษาพืช โดยปุ๋ยชาน้อยบางส่วนมาจากของจุลินทรีย์สด (Scheuerell และ Mahaffee, 2004, Scheuerell และ Mahaffee, 2006, Diánez และ al., 2006, Gea et al., 2009, Koné et al., 2010 และดิออน et al., 2012) ในการศึกษานี้ ผลต้านเชื้อราแบคทีเรียจากชาปุ๋ยมูลแกะถูกตรวจสอบเทียบกับการเจริญเติบโต mycelial A. solani และเกิด cinerea และได้โรคในมะเขือเทศผลไม้ การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า แบคทีเรียที่มีความสามารถในการลดการเจริญเติบโต mycelial cinerea เกิดและ/หรืออ. solani มาก ระหว่างแบคทีเรียทดสอบ ผ้าเกิด (IC10) และ subtilis เกิดให้ยับยั้งสูงสุดของทั้งสองโรคผ่านการทดสอบ การลดการเจริญเติบโต mycelial จาก 57% เป็น 70% (ตาราง 1) แยกสอง A. incenata, A. aminovorans และอื่นเกิดผ้าแยก (IB16) ได้นอกจากนี้ลิปกลอสไขน้อยหนึ่งแม่พิมพ์เหล่านี้ แม้ว่าอาจน้อยกว่า รายงานก่อนหน้านี้ได้แสดงว่า ตัวนี้มีความสามารถในการยับยั้งการเจริญเติบโต mycelial ของโรคพืชต่าง ๆ แน่นอน A. incenata ได้ถูกแสดงเพื่อยับยั้งการเจริญเติบโต mycelial ของไฟ parasitica Dastur เพียง nicotianae (ได้แก่ de Haan) ทักเกอร์ (จิ้นร้อยเอ็ด al., 2011) ได้รับการแสดง B.subtilis มีผลต่อการเจริญเติบโตของโรคพืชต่าง ๆ รวมทั้ง Peronophythora litchi เฉินอดีตเกาะ et al. (Jiang et al., 2001), Gaeumannomyces graminis เพียง tritici วอล์คเกอร์ Coniella diplodiella (Speg) Petr. & Syd. Phomopsis sp. และ Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary (หลิว et al., 2009), A. solani, cinerea เกิด Fusarium sambucinum Fuckel และ sulcatum ปริมาณเชื้อ R.G. คิด และ J.E. Mitch (ฉลาด et al. 2012) B.linens ได้เคยแสดงยับยั้ง mycelial vignae ไฟ Purss (Fernando และ Linderman, 1994) กับความรู้ของเรา นี้เป็นรายงานแรกของอ. aminovorans เห็นผลต่อต้านโรคพืชเจริญเติบโต mycelialต่อไปทดสอบ 2 มีประสิทธิภาพสูงสุดที่แยกได้ในหลอด ผ้าเกิด (IC 10) และ subtilis เกิด สำหรับลิปกลอสไขผลในสัตว์ทดลองโรคของมะเขือเทศผลไม้เหือด inoculated cinerea เกิดหรือ A. solani สมัครร่วมของแบคทีเรียไม่สามารถควบคุม solani อ. ในทางกลับกัน แอพลิเคชันร่วมของแบคทีเรียมักแสดงยับยั้งการพัฒนาของ cinerea เกิดได้ถึง 61% (Fig. 2) แสดง B.subtilis บรรเทาพืชโรคในสัตว์ทดลอง (Ongena และ Jacques, 2008 และ Falardeau et al., 2013) บ่อย ถึงแม้ว่ามีรายงานน้อย ความสามารถของ B.linens เพื่อควบคุมโรคในโรคพืชได้รับก่อนหน้านี้แสดง (Fernando และ Linderman, 1993)ใช้ป้องกันแบคทีเรียปรับปรุงผลลิปกลอสไขของแบคทีเรียได้อ. solani จริง อัตราส่วนสปอร์แบคทีเรียเซลล์/เชื้อราสูงแสดงว่า มี subtilis เกิดเป็นการรวมเกิด ผ้า/B. subtilis รักษากลายเป็นลิปกลอสไขให้อ. solani เมื่อแบคทีเรียได้รับอนุญาตให้สร้างก่อนศึกษา inoculation นี้อาจบ่งชี้ว่า ผล suppressive ของแบคทีเรียเป็นบางส่วนเนื่องจากยับยั้งการงอกของสปอร์เชื้อราหรือเจาะภายในเซลล์พืชได้ถูกแสดงไว้ก่อนหน้านี้ (Diánez et al., 2007 และมีดศิดดีกีย์ et al., 2009) ที่ต่ำกว่าแบคทีเรียเซลล์/เชื้อราสปอร์อัตราส่วน โปรแกรมประยุกต์ป้องกันปรับปรุงความสามารถของแบคทีเรียที่สามารถควบคุมได้เกิด cinerea ยังโดยทั่วไป ที่สูงกว่าเชื้อแบคทีเรียเซลล์/เชื้อราสปอร์อัตราส่วน มีความแตกต่างน้อยในการควบคุมป้องกันรักษา (Fig. 4) cinerea เกิดระหว่างโปรแกรมประยุกต์ร่วม (Fig. 2) ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า ความเข้มข้นความดันและแบคทีเรียโรคเชื้อรา เป็นช่วงเวลาของแบคทีเรียเป็นปัจจัยสำคัญในผลการควบคุมโรคเฉพาะตั๋ว การรวมเกิด ผ้า/B. subtilis รักษาถูกบ่อยมากลิปกลอสไขกว่าความเข้มข้นเดียวกันของแบคทีเรียอย่างใดอย่างหนึ่งเพียงอย่างเดียว นี้จะบ่งชี้ได้พลังผลของแบคทีเรียทั้งในการปรับปรุงการควบคุมการศึกษาเชื้อราได้ถูกแสดงไว้ก่อนหน้านี้ (Avis et al., 2008)Extracts from dual confrontation cultures showed inhibitory effects against both mycelial growth and spore germination of A. solani and B. cinerea ( Fig. 5 and Fig. 6). These results indicated that the bacteria produced extracellular antifungal compounds and that antibiosis may therefore be part of their mechanisms of action against fungi ( Fravel, 1988). B.subtilis strains have been shown to produce numerous peptide ( Ongena and Jacques, 2008 and Falardeau et al., 2013) and non-peptide ( Hamdache et al., 2011 and Wise et al., 2012) antimicrobial compounds. Among the most studied of these antimicrobials are the three cyclic lipopeptide families surfactin, iturin, and fengycin ( Ongena and Jacques, 2008 and Falardeau et al., 2013). Conversely, less is known about B. linens antimicrobials. B.linens has been found to produce an antibacterial peptide ( Motta and Brandelli, 2002) as well as the antifungal compound methanethiol ( Kerr, 1999). When B. subtilis was further investigated for its potential antifungal compounds, it was revealed that it produced two variants of the antimicrobial cyclic lipopeptide surfactin ( Pecci et al., 2010 and Falardeau et al., 2013). Surfactin is produced by many antagonistic Bacillus spp., including B. subtilis, and is reported to provide antimicrobial effects by pore formation in cell membranes. While surfactins are generally thought to be more inhibitory against bacterial cells and to possess less antifungal activity ( Pérez-García et al. 2011), other work has shown their antifungal effects on various fungal cells ( Chan et al., 2009, Cao et al., 2012 and Rebib et al., 2012).แม้ว่าผ้าเกิด IC10 และ subtilis เกิดมีประสิทธิภาพในการเพาะเลี้ยงคล้ายกับ mycelia ทั้งเชื้อรา กิจกรรมของพวกเขาแตกต่างกันมากเมื่อมะเขือเทศผลไม้โรค แน่นอน แบคทีเรียมีประสิทธิภาพมากในการควบคุม cinerea เกิดบนมะเขือเทศในขณะที่พวกเขามีประสิทธิภาพมากน้อยกับอ. solani นี้นั้นยังชัดเจนเมื่อประเมินสารต้านเชื้อราสารสกัดจากแบคทีเรียที่หยาบ อีก สารสกัดจากแบคทีเรียพบลักษณะอาการคล้ายกับ mycelial การเจริญเติบโตและการงอกของสปอร์ของเชื้อราทั้งสอง ในขณะที่พวกเขามีประสิทธิภาพมากน้อยกับอ. solani ในสัตว์ทดลอง นี่อาจแสดงว่า อาจจะเกี่ยวข้องกลไกนอก antibiosis ในผล suppressive เพิ่มของแบคทีเรียต่อ cinerea เกิด เช่นการเหนี่ยวนำของกลไกป้องกันพืชในมะเขือเทศ (Zhang et al., 1998, Haggag และ กระบี่ 2007 และมีดศิดดีกีย์ et al., 2009)โดยรวม ผลจากการศึกษาพบว่า แบคทีเรียที่แยกต่างหากจากปุ๋ย suppressive ชาห้ามการเพาะเลี้ยงเชื้อราเติบโตและโรคในสัตว์ทดลอง มักจะพบเชื้อแบคทีเรียที่มีประสิทธิภาพสูงสุดสองฟังก์ชันใน synergy สารต้านเชื้อรา surfactins รวมทั้งพบในสารสกัดจากแบคทีเรียที่แนะนำที่ antibiosis เป็นกลไกหลักของการดำเนินการ อย่างไรก็ตาม วิธีการดำเนินการที่เกี่ยวข้องกับการเหนี่ยวนำของมะเขือเทศป้องกันการตอบสนองอาจยังจะเกี่ยวข้อง ทำงานในอนาคตจะพยายาม (i) โพรไฟล์ และระบุประชากรจุลินทรีย์ปฏิปักษ์ PCR DGGE และ pyrosequencing ในปุ๋ยสูง suppressive ชา (ii) เพื่อระบุพารามิเตอร์การเตรียมปุ๋ยชาที่เพิ่มประชากรของแบคทีเรียเหล่านี้เป็นศัตรูเป็น (iii) เพื่อระบุเพิ่มเติมสารต้านเชื้อรา และ elucidate ของพวกเขาวิธีการดำเนินการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

4.
การอภิปรายจะได้รับก่อนหน้านี้พบว่าการยับยั้งเชื้อโรคพืชโดยชาหมักอย่างน้อยบางส่วนมาประกอบกับการปรากฏตัวของเชื้อจุลินทรีย์ที่มีชีวิต(Scheuerell และ Mahaffee 2004 Scheuerell และ Mahaffee 2006 Diánez et al., 2006 Gea et al, 2009 Koné et al., 2010 และดิออน et al., 2012) ในการศึกษานี้ผลกระทบของเชื้อแบคทีเรียต้านเชื้อราจากชาปุ๋ยคอกปุ๋ยหมักแกะมีการตรวจสอบกับการเจริญเติบโตของเส้นใย solani เอและซีเนเรียบีเช่นเดียวกับโรคแผลในผลมะเขือเทศ การศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าแบคทีเรียที่มีความสามารถในการช่วยลดการเจริญเติบโตของเส้นใยของบีซีเนเรียและ / หรือ solani เอ ท่ามกลางแบคทีเรียทดสอบผ้าบี (IC10) และ subtilis บีให้การยับยั้งสูงสุดของเชื้อโรคผ่านการทดสอบทั้งลดการเจริญเติบโตของเส้นใยจาก 57% ถึง 70% (ตารางที่ 1) สองแยก incenata เอเอ aminovorans และอีกผ้าปูที่นอนผ้าแยกบี (IB16) ก็ยังยับยั้งอย่างน้อยหนึ่งแม่พิมพ์เหล่านี้แม้ว่าในระดับน้อย รายงานก่อนหน้านี้ได้แสดงให้เห็นว่าคู่อริเหล่านี้มีความสามารถในการยับยั้งการเจริญของเส้นใยของเชื้อสาเหตุโรคพืชต่างๆ อันที่จริงเอ incenata ได้รับการแสดงเพื่อยับยั้งการเจริญของเส้นใยเชื้อรา Phytophthora parasitica ของ Dastur var nicotianae (Breda de Haan) ทักเกอร์ (จิน et al., 2011) B.subtilis ได้รับการแสดงที่จะส่งผลกระทบต่อการเจริญเติบโตของเชื้อสาเหตุโรคพืชมากมายรวมทั้ง Peronophythora ลิ้นจี่เฉินอดีตเกาะ et al, (เจียง et al., 2001) Gaeumannomyces graminis var tritici วอล์คเกอร์ Coniella diplodiella (SPEG.) Petr และซิด. Phomopsis sp. และ Sclerotinia sclerotiorum (สด.) เดอ Bary (Liu et al., 2009) solani เอ, ซีเนเรียบี Fusarium sambucinum Fuckel และ Pythium sulcatum RG แพรตต์แอนด์เจอีมิทช์ (ฉลาด et al. 2012) .B.linens ได้แสดงให้เห็นก่อนหน้านี้การยับยั้งเส้นใยของเชื้อรา Phytophthora vignae Purss (เฟอร์นันโดและ Linderman, 1994) ที่ดีที่สุดของความรู้ของเรานี้เป็นรายงานครั้งแรกของเอ aminovorans แสดงให้เห็นถึงผลกระทบที่เป็นปฏิปักษ์ต่อการเจริญเติบโตของเส้นใยของเชื้อโรคพืช. ทั้งสองสายพันธุ์ที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ, ผ้าบี (IC 10) และ subtilis บีได้มีการทดสอบต่อไปสำหรับ ผลกระทบการยับยั้งของพวกเขาในร่างกายเกี่ยวกับโรคของผลไม้มะเขือเทศเทียม-เชื้อด้วยบีซีเนเรียหรือเอ solani ร่วมการประยุกต์ใช้แบคทีเรียที่ล้มเหลวในการควบคุม solani เอ ตรงกันข้ามร่วมการประยุกต์ใช้แบคทีเรียที่แสดงให้เห็นบ่อยยับยั้งการพัฒนาของแผลบีซีเนเรียได้ถึง 61% (รูปที่. 2) B.subtilis ได้รับการแสดงบ่อยครั้งเพื่อบรรเทาโรคพืชในร่างกาย (Ongena และฌาคส์ปี 2008 และ Falardeau et al., 2013) แม้ว่าจะมีการรายงานไม่กี่สามารถของ B.linens การควบคุมโรคในเชื้อสาเหตุโรคพืชได้รับการแสดงก่อนหน้านี้ (เฟอร์นันโดและ Linderman, 1993). การประยุกต์ใช้การป้องกันของเชื้อแบคทีเรียที่ดีขึ้นผลยับยั้งแบคทีเรียบนแผล A. solani อันที่จริงเซลล์ของแบคทีเรียที่สูงขึ้น / สปอร์ของเชื้อราอัตราส่วนแสดงให้เห็นว่าการรักษาด้วย subtilis บีเช่นเดียวกับผ้าปูที่นอนผ้ารวมบี / B การรักษา subtilis กลายเป็นยับยั้งการ solani A. เมื่อเชื้อแบคทีเรียที่ได้รับอนุญาตให้สร้างก่อนที่จะมีการฉีดวัคซีนเชื้อ นี้อาจบ่งชี้ว่าผลกระทบของการปราบปรามแบคทีเรียส่วนหนึ่งเป็นเพราะการยับยั้งการงอกของสปอร์ของเชื้อราและ / หรือการเจาะภายในโรงงานเป็นเซลล์ได้รับการแสดงก่อนหน้านี้ (Diánez et al., 2007 และ Siddiqui et al., 2009). ที่ต่ำกว่าเซลล์ของแบคทีเรีย / สปอร์ของเชื้อราอัตราส่วน, โปรแกรมป้องกันยังมีการปรับปรุงโดยทั่วไปความสามารถของแบคทีเรียในการควบคุมแผลบีซีเนเรีย ในเซลล์ของแบคทีเรียสูง / อัตราส่วนสปอร์เชื้อรามีความแตกต่างเล็ก ๆ น้อย ๆ ในการควบคุมระหว่างร่วมการประยุกต์ใช้ (รูปที่. 2) และการรักษาเชิงป้องกัน (รูปที่. 4) สำหรับซีเนเรียบี ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าความดันโรคเชื้อราและความเข้มข้นของแบคทีเรียเช่นเดียวกับระยะเวลาของการใช้แบคทีเรียเป็นปัจจัยสำคัญในผลการควบคุมโรค. ของโปรดโดยเฉพาะอย่างยิ่งรวมผ้าปูที่นอนผ้าบี / B การรักษา subtilis บ่อยยับยั้งมากกว่าความเข้มข้นเดียวกันของแบคทีเรียเพียงอย่างเดียว นี้จะบ่งบอกถึงการเสริมฤทธิ์ของแบคทีเรียที่เป็นไปได้ทั้งในการปรับปรุงการควบคุมของเชื้อโรคเชื้อราตามที่ได้รับการแสดงก่อนหน้านี้ (Avis et al., 2008). สารสกัดจากวัฒนธรรมการเผชิญหน้าคู่แสดงให้เห็นผลกระทบทั้งยับยั้งการเจริญของเส้นใยและสปอร์ของการงอก solani เอ และบีซีเนเรีย (รูปที่. 5 และรูปที่. 6) ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าเชื้อแบคทีเรียที่ผลิตสารต้านเชื้อราและสาร antibiosis ดังนั้นจึงอาจเป็นส่วนหนึ่งของกลไกของพวกเขาดำเนินการกับเชื้อรา (Fravel, 1988) สายพันธุ์ B.subtilis ได้รับการแสดงในการผลิตจำนวนมากเปปไทด์ (Ongena และฌาคส์ปี 2008 และ Falardeau et al., 2013) และไม่เปปไทด์ (Hamdache et al., 2011 และฉลาด et al., 2012) สารต้านจุลชีพ ในระหว่างที่ศึกษาส่วนใหญ่ของยาต้านจุลชีพเหล่านี้เป็นสามครอบครัว Lipopeptide วงจร surfactin, iturin และ fengycin (Ongena และฌาคส์ปี 2008 และ Falardeau et al., 2013) ตรงกันข้ามน้อยเป็นที่รู้จักกันเกี่ยวกับบียาต้านจุลชีพผ้าปูที่นอนผ้า B.linens มีการค้นพบในการผลิตเปปไทด์ต้านเชื้อแบคทีเรีย (ม็อตตาและ Brandelli, 2002) เช่นเดียวกับสารต้านเชื้อรา methanethiol (เคอร์, 1999) เมื่อ B. subtilis ได้รับการตรวจสอบต่อไปสำหรับสารต้านเชื้อราที่อาจเกิดขึ้นมันก็ถูกเปิดเผยว่ามันผลิตสองสายพันธุ์ของ Lipopeptide วงจรยาต้านจุลชีพ surfactin (Pecci et al., 2010 และ Falardeau et al., 2013) Surfactin ผลิตโดยปฏิปักษ์ Bacillus หลาย spp. รวมทั้งบี subtilis และเป็นรายงานที่ให้ผลต้านจุลชีพโดยการก่อตัวของรูพรุนในเยื่อหุ้มเซลล์ ในขณะที่ surfactins มีความคิดโดยทั่วไปจะยับยั้งมากขึ้นกับเซลล์แบคทีเรียและจะมีกิจกรรมต้านเชื้อราน้อย (Pérez-García et al. 2011) งานอื่น ๆ ที่ได้แสดงให้เห็นผลกระทบเชื้อราของพวกเขาในเซลล์ของเชื้อราต่างๆ (จัน et al., 2009 เฉา et al, . 2012 และ Rebib et al., 2012). แม้ว่าผ้าปูที่นอนผ้า B. subtilis IC10 และ B มีประสิทธิภาพในหลอดทดลองที่คล้ายกันกับทั้งเส้นใยเชื้อรากิจกรรมของพวกเขาเป็นเรื่องที่แตกต่างกันในการยับยั้งโรคมะเขือเทศผลไม้ อันที่จริงแบคทีเรียที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นในการควบคุมซีเนเรียบีในมะเขือเทศขณะที่พวกเขามีประสิทธิภาพมากน้อยกับ solani เอ นี่ก็เป็นที่เห็นได้ชัดเมื่อมีการประเมินสารต้านเชื้อราในสารสกัดจากแบคทีเรียน้ำมันดิบ อีกครั้งที่แสดงให้เห็นว่าสารสกัดจากแบคทีเรียต้านเชื้อราที่คล้ายกันผลกระทบต่อการเจริญเติบโตของเส้นใยและสปอร์งอกของเชื้อราทั้งในขณะที่พวกเขามีประสิทธิภาพมากน้อยกับเอ solani ในร่างกาย ซึ่งอาจแสดงให้เห็นว่ากลไกนอกเหนือไปจาก antibiosis อาจจะมีส่วนร่วมในการปราบปรามผลกระทบที่เพิ่มขึ้นของเชื้อแบคทีเรียที่มีต่อซีเนเรียบีเช่นการเหนี่ยวนำของกลไกการป้องกันพืชในมะเขือเทศ (Zhang et al., 1998 Haggag และเซเบอร์ 2007 และ Siddiqui et al., 2009). โดยรวมแล้วผลที่ได้จากการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าเชื้อแบคทีเรียที่แยกได้จากปุ๋ยหมักชาปราบปรามยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อราในหลอดทดลองและโรคในร่างกาย ทั้งสองเชื้อแบคทีเรียที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดที่พบมักจะทำงานในการทำงานร่วมกัน สารต้านเชื้อรารวมทั้ง surfactins ถูกพบในสารสกัดจากแบคทีเรียบอกว่า antibiosis เป็นกลไกหลักของการดำเนินการ แต่โหมดของการดำเนินการที่เกี่ยวข้องกับการเหนี่ยวนำของการตอบสนองการป้องกันมะเขือเทศนอกจากนี้ยังอาจจะเกี่ยวข้องกับ การทำงานในอนาคตจะพยายาม (i) รายละเอียดและระบุประชากรศัตรูจุลินทรีย์โดยวิธี PCR-DGGE และ pyrosequencing ในชาหมักปราบสูงและ (ii) การระบุพารามิเตอร์การจัดทำปุ๋ยหมักชาที่ช่วยเพิ่มประชากรของแบคทีเรียศัตรูเหล่านี้เช่นเดียวกับ (iii) เพื่อระบุ สารต้านเชื้อราเพิ่มเติมและอธิบายรูปแบบของการกระทำของพวกเขา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

4 . การอภิปราย
ได้รับก่อนหน้านี้พบว่ายับยั้งเชื้อโรคพืชโดยชาปุ๋ยหมักอย่างน้อยบางส่วนเกิดจากการแสดงตนของจุลินทรีย์ ( scheuerell สดและ scheuerell mahaffee mahaffee 2004 และ 2006 di . kgm เนซ et al . , 2006 , เกีย et al . , 2009 , คนé et al . , 2010 และดิออนและ al . , 2012 ) ในการศึกษานี้ผลของแบคทีเรียและเชื้อราจากปุ๋ยคอกปุ๋ยหมักชาแกะทดสอบกับการเจริญของเส้นใย . solani และ ขาว รวมทั้งโรคแผลในผลมะเขือเทศ การศึกษาครั้งนี้พบว่าแบคทีเรียมีความสามารถในการช่วยลดการเจริญของ B . ขาวและ / หรือ A เลท ระหว่างแบคทีเรียทดสอบ B ผ้าลินิน ( ic10 ) และ Bการยับยั้งเชื้อให้สูงสุดของทั้งสองการทดสอบเชื้อโรค , การเจริญจากปกติ 70% ( ตารางที่ 1 ) 2 . incenata สายพันธุ์ A และ B aminovorans อื่น , ผ้าแยก ( ib16 ) ยังพบว่าอย่างน้อยหนึ่งของแม่พิมพ์เหล่านี้ แต่ในขอบเขตที่น้อยกว่ารายงานก่อนหน้านี้ได้แสดงให้เห็นว่ายาต้านเหล่านี้มีความสามารถในการ ยับยั้งการเจริญของเชื้อโรคพืชต่าง ๆ แน่นอน . incenata ได้รับการแสดงเพื่อยับยั้งการเจริญของ Phytophthora parasitica Dastur ) nicotianae ( Breda de ฮาน ) ทัคเกอร์ ( จิน et al . , 2011 ) B .เชื้อได้รับการแสดงที่จะมีผลต่อการเจริญเติบโตของเชื้อโรคพืชมากมายรวมทั้ง peronophythora ลิ้นจี่เฉินอดีตเกาะ et al . ( เจียง et al . , 2001 ) , gaeumannomyces graminis var tritici วอล์คเกอร์ coniella diplodiella ( speg ) ปีเตอร์ . &ซิด , phomopsis sp . และ sclerotinia sclerotiorum ( LIB ) เดอ แบรี่ ( Liu et al . , 2009 ) , A . B . cinerea , Fusarium solani , sambucinum fuckel r.g. วัยอ่อน และเชื้อราแพรตต์& j.e. มิทช์ ( ปัญญา et al . 2012 ) b.linens ก่อนหน้านี้แสดงการยับยั้งการเจริญของลำต้น vignae purss ( Fernando และลินเดอร์แมน , 1994 ) เพื่อที่ดีที่สุดของความรู้ของเรานี้เป็นรายงานแรกของ A aminovorans แสดงผลปฏิปักษ์ในเจริญของเชื้อโรคพืช

สองที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดในการเพาะเชื้อ พ. linens IC ( 10 ) และ B . subtilis ,ได้ผ่านการทดสอบของพวกเขาผลการยับยั้งฤทธิ์ในโรคของมะเขือเทศผลเทียมที่ใส่บีขาวหรือ . เลท โปรแกรม Co ของแบคทีเรียไม่สามารถควบคุม . เลท ในทางกลับกัน การร่วมแสดงการยับยั้งแบคทีเรียที่พบบ่อยในการพัฒนาของรอยโรค พ. ขาวถึง 61% ( รูปที่ 2 ) B .เชื้อได้ถูกแสดงบ่อยครั้งเพื่อบรรเทาโรคพืชในหลอดทดลอง ( ongena และเจ้าชากส์ 2008 และ falardeau et al . , 2013 ) แม้จะมีรายงานน้อย ความสามารถในการควบคุมโรคใน b.linens เชื้อโรคพืชได้แสดงก่อนหน้านี้ ( Fernando และลินเดอร์แมน , 1993 ) .

โปรแกรมป้องกันแบคทีเรียปรับปรุงผลยับยั้งของแบคทีเรีย . solani รอยโรคแน่นอน สูงกว่าอัตราส่วนสปอร์เชื้อราแบคทีเรีย / มือถือ พบว่า การรักษาด้วย B . subtilis ตลอดจนรวม B / B subtilis กลายเป็นผ้ารักษาว่า A . solani เมื่อแบคทีเรียได้รับอนุญาตให้จัดตั้งก่อนเรื่องการฉีดวัคซีนนี้อาจบ่งชี้ว่า ผลการปราบปรามของแบคทีเรียเป็นส่วนหนึ่งเป็นเพราะการยับยั้งเชื้อราสร้างสปอร์งอกและ / หรือเจาะเข้าไปในเซลล์พืชที่ได้ถูกแสดงไว้ก่อนหน้านี้ ( DI . kgm เนซ et al . , 2007 และ siddiqui et al . , 2009 ) ที่ลดแบคทีเรียเซลล์ / สปอร์เชื้อรา อัตราส่วน การป้องกันโดยทั่วไปแล้วยังปรับปรุงความสามารถของแบคทีเรียที่จะควบคุม B . cinerea รอยโรคในเซลล์แบคทีเรีย เชื้อราสร้างสปอร์ / อัตราส่วนที่สูง มีความแตกต่างกันเพียงเล็กน้อยในการควบคุมระหว่างร่วมโปรแกรม ( รูปที่ 2 ) และการรักษาป้องกัน ( รูปที่ 4 ) สำหรับ B . cinerea . ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า โรคความดันและความเข้มข้นของแบคทีเรียเชื้อรา ตลอดจนระยะเวลาของการใช้แบคทีเรียเป็นปัจจัยที่สำคัญในผล การควบคุมโรค

หมายเหตุที่เฉพาะเจาะจง , รวมพ.ผ้า / B . subtilis คือยับยั้งการรักษาบ่อยกว่าที่ความเข้มข้นเดียวกันของแบคทีเรียเพียงอย่างเดียว นี้จะระบุเป็นไปได้ที่ผลของแบคทีเรียทั้งในการปรับปรุงการควบคุมของเชื้อโรค เชื้อรา ตามที่ได้แสดงไว้ก่อนหน้านี้ ( Avis et al . , 2008 ) .

สารสกัดจากการเผชิญหน้าคู่วัฒนธรรมผลยับยั้งต่อทั้งสปอร์งอกและเจริญ . solani และ ขาว ( รูปที่ 5 และรูปที่ 6 ) ผลการทดลองนี้ชี้ให้เห็นว่า แบคทีเรียที่ผลิตสารต้านเชื้อราและสารนอกเซลล์ที่แอนตีไบโ ิสจึงอาจเป็นส่วนหนึ่งของกลไกของการกระทำของพวกเขาต่อต้านเชื้อรา ( fravel , 1988 ) B .subtilis สายพันธุ์ได้รับการแสดงเพื่อผลิตเปปไทด์มากมาย ( ongena และเจ้าชากส์ 2008 และ falardeau et al . , 2013 ) และไม่เปปไทด์ ( hamdache et al . , 2011 และปัญญา et al . , 2012 ) สารต้านสาร ที่สุดระหว่างเรียนของยาเหล่านี้เป็นสามแบบลิโพเปปไทด์ครอบครัวเซอแฟกทิน iturin , และ fengycin ( ongena และเจ้าชากส์ 2008 และ falardeau et al . , 2013 ) ในทางกลับกันน้อยเป็นที่รู้จักกันเกี่ยวกับ B ผ้าต่อไป b.linens ได้รับการพบในการผลิตเปปไทด์ต้านเชื้อแบคทีเรีย ( Motta และ brandelli , 2002 ) เป็นสารประกอบมีเทนไท ลรา ( เคอร์ , 1999 ) เมื่อ B . subtilis คือการศึกษาเพิ่มเติมสำหรับศักยภาพของเชื้อรา ซึ่งพบว่ามันผลิตสองสายพันธุ์ของเชื้อที่เซอแฟกทินลิโพเปปไทด์ Cyclic ( pecci et al . ,2010 และ falardeau et al . , 2013 ) ผลิตโดยกลุ่มบาซิลลัสปฏิปักษ์เซอแฟกทินมากมาย ได้แก่ B . subtilis และรายงานผล โดยให้ยาต้านจุลชีพกลายพันธุ์ในเยื่อหุ้มเซลล์ ในขณะที่ surfactins มีความคิดโดยทั่วไปจะออกฤทธิ์ต่อเซลล์แบคทีเรียและเชื้อรา มีฤทธิ์น้อยกว่า ( เปเรซกาโอ การ์ซีอา et al . 2011 )งานอื่น ๆได้แสดงผลในเซลล์ต่าง ๆของเชื้อรา ( ชาน et al . , 2009 , เคา et al . , 2012 และ rebib et al . , 2012 ) .

แม้ว่า B . ผ้า ic10 และ B . subtilis ได้เหมือนกันในการต่อต้านเชื้อราทั้งสองชนิดในแต่ละกิจกรรมของพวกเขาที่แตกต่างกันมากในการปราบปรามโรคมะเขือเทศผลไม้ แน่นอน , แบคทีเรียมีมากมีประสิทธิภาพในการควบคุม .ขาวบนมะเขือเทศในขณะที่พวกเขามากน้อยมีผลกับ ก. เลท นี้ก็เห็นได้ชัดเมื่อการประเมินฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรียสารสกัดสารประกอบในน้ำมัน . อีกครั้ง , สารสกัดจากแบคทีเรียเชื้อราเจริญได้ผลคล้ายคลึงกับสปอร์เชื้อราและการงอกของทั้งสอง ในขณะที่พวกเขามีมากน้อยที่มีประสิทธิภาพต่อ . solani ในสิ่งมีชีวิตนี้อาจบ่งชี้ว่ากลไกนอกจากแอนตีไบโ ิส อาจมีส่วนร่วมในการเพิ่มขึ้นของแบคทีเรียที่มีผลปราบปรามพ. ขาว เช่น การทำงานของกลไกการป้องกันพืชมะเขือเทศ ( Zhang et al . , 1998 , และ haggag เซเบอร์ 2007 และ siddiqui et al . , 2009 ) .

โดยรวมผลจากการศึกษาพบว่าแบคทีเรียที่แยกได้จากปุ๋ยหมักชาปราบปรามยับยั้งของเชื้อราในหลอดทดลองและเชื้อโรคในสิ่งมีชีวิต สองที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดแบคทีเรียมักจะพบฟังก์ชันในผล สารป้องกันเชื้อรา รวมทั้ง surfactins , พบในแบคทีเรียสารสกัดแอนติไบโ ิส กล่าวว่า เป็นกลไกหลักของการกระทำ อย่างไรก็ตามรูปแบบของการกระทำที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองการป้องกันมะเขือเทศอาจจะเกี่ยวข้องการทำงานในอนาคตจะพยายาม ( ฉัน ) และจุลินทรีย์ปฏิปักษ์ระบุโปรไฟล์ประชากรและระดับดีเอ็นเอ 9 แถบบ่งชี้ไพโรซีเควนซิงปราบปุ๋ยหมักชาและ ( 2 ) เพื่อศึกษาการเตรียมปุ๋ยหมักชาพารามิเตอร์ที่เพิ่มประชากรของแบคทีเรียปฏิปักษ์เหล่านี้เป็น ( III ) เพื่อระบุสารประกอบยาเพิ่มเติมและคำชี้แจงของโหมดของการกระทำ