2. Materials andmethods2.1. Yeast s

2. Materials andmethods
2.1. Yeast strains and inocula preparation
Three yeast strains belonging to Debaryomyces genus (Debaryomyces
hansenii 78, Debaryomyces maramus 51) and Hyphopichia spp.
(Hyphopichia burtonii 120), included in the collection of Stazione
Sperimentale per l'Industria delle Conserve Alimentari (SSICA, Italy),
were previously selected for their ability to grow in a dry-cured hamlike
substrate (Pinna et al., 2009), and screened for antagonistic activity
against a toxigenic strain of P. nordicum both on a culture medium
(Virgili et al., 2012) and in a dry-cured meat model system (Simoncini
et al., 2014).
Yeast strains underwent genetic identification by sequencing the
D1/D2 domain of 26S rRNA encoding gene (Branda et al., 2010). Yeast
strains were purified by repeated cultivation on Malt Extract Agar
(MEA,Oxoid Ltd.,UK) andmaintained at 4 °C on Yeast Peptone Dextrose
agar (YPD, BD Difco, USA) before use.
Yeast cultures were revitalized in slants of Malt Extract Broth (MEB,
Oxoid Ltd., UK). Suspensions were prepared by collecting cells from
48 h-old colonies (grown on MEA at 25 °C) in Physiological Solution
(PS) in order to obtain a population of about 8 Log CFU/ml. The density
of yeast suspensions was determined by a spectrophotometric measurement
of the optical density (OD) at 600 nm and verified by yeast
counts on MEA after incubation at 25 °C for 4–5 days.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุ andmethods2.1. ยีสต์สายพันธุ์และ inocula การเตรียมยีสต์ 3 ที่เป็นสมาชิกของสกุล Debaryomyces (Debaryomyceshansenii 78, Debaryomyces maramus 51) และโอ Hyphopichia(Hyphopichia burtonii 120), รวมอยู่ในชุดของ StazioneSperimentale ต่อเดลเล l'Industria Alimentari ประหยัด (SSICA อิตาลี),ได้เลือกไว้ก่อนหน้านี้สำหรับความสามารถในการเติบโตในแห้งรักษา hamlikeพื้นผิว (Pinna et al., 2009), และฉายในกิจกรรมต่อต้านกับต้องใช้ toxigenic ของ P. nordicum ทั้งสื่อวัฒนธรรม(Virgili et al., 2012) และ ในระบบจำลองเนื้อหายแห้ง (Simonciniร้อยเอ็ด al., 2014)ยีสต์ประกอบไปด้วยรหัสพันธุกรรม โดยการจัดลำดับโดง 1/D2 ของ 26S rRNA เข้ารหัสยีน (Branda et al., 2010) เชื้อยีสต์สายพันธุ์ที่บริสุทธิ์ โดยเพาะปลูกซ้ำในมอลต์สกัด Agar(MEA, Oxoid Ltd., UK) andmaintained ที่ 4 ° C ในยีสต์ Peptone ขึ้นagar (YPD, BD Difco สหรัฐอเมริกา) ก่อนที่จะใช้มีฟื้นฟูวัฒนธรรมยีสต์ใน slants ของมอลต์สกัดซุป (MEBOxoid จำกัด สหราชอาณาจักร) บริการจัดทำ โดยเก็บเซลล์จาก48 h อายุอาณานิคม (ปลูกในสถานที่ 25 ° C) ในโซลูชันสรีรวิทยา(PS) เพื่อให้ได้ประชากรประมาณ 8 ล็อก CFU/ml ความหนาแน่นของยีสต์พักถูกกำหนด โดยการประเมิน spectrophotometricของความหนาแน่นออปติคอล (OD) ที่ 600 nm และตรวจสอบ โดยยีสต์นับสถานหลังจากบ่มที่ 25 ° C สำหรับ 4-5 วัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุ andmethods
2.1 ยีสต์สายพันธุ์และการเตรียม inocula
สามสายพันธุ์ยีสต์ที่เป็นสกุล Debaryomyces (Debaryomyces
hansenii 78, Debaryomyces maramus 51) และ Hyphopichia spp.
(Hyphopichia burtonii 120) รวมอยู่ในคอลเลกชันของ Stazione
Sperimentale ต่อชาว Industria delle อนุรักษ์ Alimentari (SSICA, อิตาลี) ,
ได้รับการคัดเลือกก่อนหน้านี้สำหรับความสามารถในการเติบโตใน hamlike
แห้งหายตั้งต้น(Pinna et al., 2009)
และการคัดเลือกว่าเป็นกิจกรรมที่เป็นปฏิปักษ์กับความเครียดToxigenic พี nordicum ทั้งในสื่อวัฒนธรรม
(Virgili et al., 2012 ) และในระบบรูปแบบเนื้อแห้งหาย (Simoncini
et al., 2014).
สายพันธุ์ยีสต์เปลี่ยนบัตรประจำตัวทางพันธุกรรมโดยลำดับ
D1 / D2 โดเมนของ 26S rRNA ยีนเข้ารหัส (Branda et al., 2010)
ยีสต์สายพันธุ์ที่ถูกทำให้บริสุทธิ์โดยการเพาะปลูกซ้ำในมอลต์สกัดวุ้น
(กฟน, Oxoid จำกัด , UK) andmaintained ที่ 4 ° C ในยีสต์เปปโตน Dextrose
วุ้น (YPD, BD Difco สหรัฐอเมริกา) ก่อนการใช้งาน.
วัฒนธรรมยีสต์ถูกฟื้นฟูใน slants ของมอลต์สกัด น้ำซุป (MEB,
Oxoid จำกัด , UK) สารแขวนลอยได้จัดทำขึ้นโดยการจัดเก็บเซลล์จาก
48 ชั่วโมงเก่าโคโลนี (ที่ปลูกในกฟน. ที่ 25 ° C) ในการแก้ปัญหาทางสรีรวิทยา
(PS) เพื่อให้ได้ประชากรประมาณ 8 เข้าสู่ระบบโคโลนี / มิลลิลิตร ความหนาแน่นของสารแขวนลอยยีสต์ถูกกำหนดโดยการวัดสเปกของความหนาแน่นของแสง(OD) ที่ 600 นาโนเมตรและตรวจสอบโดยยีสต์นับในกฟน. หลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4-5 วัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วิธีการวัสดุ
2.1 . สายพันธุ์ยีสต์และ inocula การเตรียม
3 สายพันธุ์ยีสต์ที่เป็นของ debaryomyces สกุล ( debaryomyces
hansenii 78 , debaryomyces มารามัส 51 ) และ hyphopichia spp .
( hyphopichia burtonii 120 ) รวมอยู่ในคอลเลกชันของแล้ว
sperimentale ต่อ l'industria delle อนุรักษ์ alimentari ( ssica , อิตาลี ) ,
ถูกเลือกไว้ก่อนหน้านี้สำหรับความสามารถของพวกเขาที่จะเติบโตในที่แห้งหาย hamlike
( ( หู et al . , 2009 ) , และกิจกรรมจากปฏิปักษ์กับสายพันธุ์ของ P .
toxigenic nordicum ทั้งบนสื่อวัฒนธรรม
( virgili et al . , 2012 ) และในแห้งเนื้อแดดเดียวแบบระบบ ( simoncini
et al , , 2014 ) .
สายพันธุ์ยีสต์ที่ได้รับทางพันธุกรรมโดยลำดับ
D1 / D2 โดเมนของ 26 rRNA ยีน ( แบรนดา et al . , 2010 ) สายพันธุ์ยีสต์ที่ได้ทำให้บริสุทธิ์ด้วยการปลูกซ้ำ

( malt extract agar ใน oxoid กฟน , จำกัด , UK ) andmaintained 4 ° C ในยีสต์ extract dextrose agar (
ypd BD difco , USA ) ก่อนใช้
ยีสต์วัฒนธรรมถูกฟื้นฟูใน slants มอลต์ซุปสกัด ( เฟอร์นิเจอร์
oxoid , จำกัด , UK ) ช่วงล่าง เตรียมการเก็บเซลล์จาก
48 h-old อาณานิคม ( ปลูกในอุณหภูมิ 25 ° C MEA ) ในสารละลายทางสรีรวิทยา
( PS ) เพื่อให้ได้ประชากรประมาณ 8 log CFU / มิลลิลิตรความหนาแน่น
ของสารแขวนลอยยีสต์ถูกกำหนดโดยการวัดความหนาแน่นของแสง
i ( OD ) ที่ 600 nm โดยการ นับยีสต์
บนหลัง การไฟฟ้านครหลวง การบ่มที่ 25 ° C เป็นเวลา 4 - 5 วัน