5.3 Evaluation of fluorescence via

5.3 Evaluation of fluorescence via flow cytometry
Already in the early 1990s flow cytometry in combination with FISH (flow-FISH) was employed to count bacteria and measure their fluorescence intensity (Amann et al., 1990b). Using flow cytometry is highly convenient since it does not rely on slides and manual counting. Larger sample volumes can be analysed rapidly without human assistance (Brehm-Stecher, 2008 and Gunasekera et al., 2003b). Flow cytometry in combination with FISH-staining has not yet gained huge importance in FISH-testing of food products although the composition of microbial communities can be elegantly represented (Veal et al., 2000). In addition, flow-FISH has already been applied for the quantification of different bacterial species in liquid samples like milk (Gunasekera et al., 2003a, Gunasekera et al., 2003b and Laflamme et al., 2009) or in pure or mixed cultures (Connil et al., 1998). In contrast, solid food samples are more challenging for the analysis in the flow cytometer, and, depending on the food matrix, one has to cope with strong autofluorescence or interfering cell debris as a result of mechanical sample disintegration (Bisha and Brehm-Stecher, 2009b and Veal et al., 2000). As for other FISH analyses, an appropriate pretreatment of the sample is thus indispensable. Recent FISH studies to detect human pathogens like Salmonella in food samples were not only analysing enrichment cultures from the food matrix, but also utilized directly spiked complex food matrices for the pathogen detection via flow cytometry (Bisha and Brehm-Stecher, 2009a, Bisha and Brehm-Stecher, 2009b and Bisha and Brehm-Stecher, 2010). Other approaches of Salmonella detection in food using fluorescently labelled antibodies instead of nucleotides also demonstrate the general applicability of flow cytometry for FISH (McClelland and Pinder, 1994). The detection limit of flow-FISH is around 103 CFU/ml and hence similar to that obtained with conventional fluorescence microscopy (Bisha and Brehm-Stecher, 2010) although lower concentrations may be detectable as well (Gunasekera et al., 2003b). The potential of flow-FISH, especially for automated systems and high-throughput analysis, in routine testing of food products has not yet yielded many applications and should be exploited more intensively. However, this promising tool obviously requires much higher investment costs than conventional fluorescence microscopy.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5.3 การประเมิน fluorescence ผ่านเซลล์กระแสแล้วในปี 1990 ขั้นตอนช่วง เซลล์ร่วมกับปลา (ปลาไหล) ถูกจ้างนับจำนวนแบคทีเรีย และวัดความเข้มของ fluorescence (Amann et al., 1990b) ใช้เซลล์กระแสจะสะดวกมากเนื่องจากมันไม่ต้องอาศัยภาพนิ่งและการตรวจนับด้วยตนเอง สามารถ analysed ไดรฟ์ข้อมูลขนาดใหญ่อย่างรวดเร็วโดยไม่ต้องขอความช่วยเหลือมนุษย์ (Brehm Stecher, 2008 และ Gunasekera et al., 2003b) กระแสเซลล์ร่วมกับการย้อมสีปลาได้ยังไม่ ได้รับความสำคัญมากในการทดสอบปลาผลิตภัณฑ์อาหารแม้ว่าองค์ประกอบของชุมชนจุลินทรีย์ได้อย่างหรูหราแสดง (ลูกวัว et al., 2000) นอกจากนี้ ปลาไหลมีการใช้แล้วสำหรับนับพันธุ์ต่าง ๆ แบคทีเรีย ในตัวอย่างของเหลวเช่นนม (Gunasekera et al., 2003a, Gunasekera et al., 2003b และ Laflamme et al., 2009) หรือ ในวัฒนธรรมบริสุทธิ์ หรือผสม (Connil et al., 1998) ในทางตรงข้าม ตัวอย่างอาหารแข็งจะท้าทายเพิ่มเติมสำหรับการวิเคราะห์ใน cytometer กระแส และ ตามเมตริกซ์อาหาร มีเพื่อรับมือกับแรง autofluorescence หรือเศษเซลล์รบกวนจากเครื่องจักรกลอย่างบูรณภาพ (Bisha และ Brehm Stecher, 2009b และลูกวัว et al., 2000) สำหรับวิเคราะห์อื่น ๆ ปลา pretreatment เป็นที่เหมาะสมของตัวอย่างได้จึงขาดไม่ได้ การศึกษาปลาล่าสุดเพื่อตรวจหาโรคมนุษย์เช่นซัลในตัวอย่างอาหารได้ไม่เพียงวิเคราะห์วัฒนธรรมโดดเด่นจากเมทริกซ์อาหาร แต่ยัง ใช้ประโยชน์ได้โดยตรง spiked เมทริกซ์อาหารซับซ้อนสำหรับการตรวจหาการศึกษาทางเซลล์ไหล (Bisha และ Brehm Stecher, 2009a, Bisha และ Brehm Stecher, 2009b และ Bisha และ Brehm Stecher, 2010) วิธีอื่น ๆ ของสายตรวจในอาหารที่ใช้แอนตี้มัน fluorescently แทนนิวคลีโอไทด์ยังแสดงให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องของทั่วไปของเซลล์ไหลปลา (McClelland และ Pinder, 1994) ตรวจสอบขีดจำกัดของปลาไหลคือ ประมาณ 103 CFU/ml และดังนั้นคล้ายกับที่ได้ ด้วยปกติ fluorescence microscopy (Bisha และ Brehm Stecher, 2010) แม้ว่าความเข้มข้นต่ำอาจตรวจด้วย (Gunasekera et al., 2003b) ศักยภาพของไหลปลา โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับระบบอัตโนมัติและการวิเคราะห์อัตราความเร็วสูง ในการทดสอบผลิตภัณฑ์อาหารประจำไม่ได้บูรณะโปรแกรมประยุกต์จำนวนมาก และควรนำไปมาก อย่างไรก็ตาม เครื่องมือนี้ว่าแน่นอนต้องทุนมากลงทุนสูงกว่าปกติ fluorescence microscopy

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

5.3
การประเมินผลการเรืองแสงผ่านโฟแล้วในช่วงต้นทศวรรษ1990 cytometry ไหลรวมกับปลา (ปลาไหล) ถูกจ้างมาเพื่อนับเชื้อแบคทีเรียและวัดความเข้มแสงของพวกเขา (Amann et al., 1990b) ใช้ cytometry ไหลสะดวกมากเพราะมันไม่ได้ขึ้นอยู่กับภาพนิ่งและนับคู่มือ ขนาดใหญ่ปริมาณตัวอย่างที่สามารถวิเคราะห์ได้อย่างรวดเร็วโดยปราศจากความช่วยเหลือของมนุษย์ (Brehm-Stecher, 2008 และ Gunasekera et al., 2003b) cytometry ไหลรวมกับปลาย้อมสียังไม่ได้รับความสำคัญมากในปลาทดสอบผลิตภัณฑ์อาหารแม้ว่าองค์ประกอบของชุมชนจุลินทรีย์สามารถแสดงอย่างหรูหรา (เนื้อลูกวัว et al., 2000) นอกจากนี้การไหลปลาได้ถูกนำมาใช้สำหรับปริมาณของแบคทีเรียสายพันธุ์ที่แตกต่างกันในตัวอย่างของเหลวเช่นนม (Gunasekera et al., 2003a, Gunasekera et al., 2003b และ Laflamme et al., 2009) หรือในวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์หรือผสม (Connil et al., 1998) ในทางตรงกันข้ามตัวอย่างอาหารแข็งที่มีความท้าทายมากขึ้นสำหรับการวิเคราะห์ในการไหล cytometer และขึ้นอยู่กับเมทริกซ์อาหารที่หนึ่งจะต้องรับมือกับ Autofluorescence แข็งแกร่งหรือเศษเซลล์รบกวนเป็นผลมาจากการสลายตัวอย่างกล (บิช่าและ Brehm-Stecher, 2009b และเนื้อลูกวัว et al., 2000) สำหรับการวิเคราะห์ปลาอื่น ๆ มีการปรับสภาพที่เหมาะสมของกลุ่มตัวอย่างที่ขาดไม่ได้ดังนั้น การศึกษาปลาล่าสุดในการตรวจสอบเชื้อโรคของมนุษย์เช่นเชื้อ Salmonella ในตัวอย่างอาหารที่ได้รับไม่เพียง แต่การวิเคราะห์วัฒนธรรมที่เพิ่มคุณค่าจากเมทริกซ์อาหาร แต่ยังใช้ถูกแทงโดยตรงการฝึกอบรมอาหารที่ซับซ้อนในการตรวจหาการติดเชื้อผ่านทางโฟ (บิช่าและ Brehm-Stecher, 2009a, บิช่าและ Brehm -Stecher, 2009b และบิช่าและ Brehm-Stecher 2010) วิธีการอื่น ๆ ของการตรวจสอบเชื้อ Salmonella ในอาหารโดยใช้แอนติบอดีที่มีข้อความ fluorescently แทนนิวคลีโอยังแสดงให้เห็นถึงการบังคับใช้ทั่วไปของโฟสำหรับปลา (แมคคลีแลนด์และ Pinder, 1994) ขีด จำกัด ของการตรวจสอบการไหลปลาอยู่ที่ประมาณ 103 CFU / ml และด้วยเหตุนี้คล้ายกับที่ได้รับกับกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงธรรมดา (บิช่าและ Brehm Stecher-2010) ถึงแม้จะมีความเข้มข้นต่ำอาจจะตรวจพบได้เช่นกัน (Gunasekera et al., 2003b) ที่มีศักยภาพของการไหลปลาโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับระบบอัตโนมัติและการวิเคราะห์การส่งผ่านสูงในการทดสอบตามปกติของผลิตภัณฑ์อาหารที่ยังไม่ได้มีผลงานจำนวนมากและควรจะใช้ประโยชน์มากขึ้นอย่างหนาแน่น แต่เครื่องมือนี้มีแนวโน้มที่เห็นได้ชัดมากขึ้นต้องใช้เงินลงทุนกว่ากล้องจุลทรรศน์เรืองแสงธรรมดา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

5.3 การประเมินผลการไหลผ่าน (
แล้วในช่วงต้นทศวรรษ 1990 การไหล ( ในการรวมกันกับปลา ( ปลาไหล ) มีจำนวนแบคทีเรีย และวัดความเข้มของการเรืองแสงนับ ( แอเมิน et al . , 1990b ) การใช้เครื่องนับเซลล์จะสะดวกมากเพราะไม่ต้องอาศัยสไลด์ และคู่มือค่ะปริมาณตัวอย่างขนาดใหญ่สามารถวิเคราะห์อย่างรวดเร็วโดยไม่มีความช่วยเหลือของมนุษย์ ( เบรมสเต็กเคอร์ , 2008 และ gunasekera et al . , 2003b ) การไหล ( ร่วมกับปลาคราบยังไม่ได้รับความสำคัญมากในการทดสอบปลาผลิตภัณฑ์อาหารแม้ว่าองค์ประกอบของชุมชนจุลินทรีย์สามารถแสดงอย่างหรูหรา ( เนื้อลูกวัว et al . , 2000 ) นอกจากนี้จับปลาไหลได้ถูกใช้สำหรับปริมาณของแบคทีเรียชนิดต่าง ๆในตัวอย่างของเหลว เช่น นม ( gunasekera et al . , 2003a gunasekera , et al . , 2003b และ laflamme et al . , 2009 ) หรือในบริสุทธิ์หรือผสมวัฒนธรรม ( connil et al . , 1998 ) ในทางตรงกันข้าม , ตัวอย่างอาหารแข็งมีความท้าทายมากขึ้นสำหรับการวิเคราะห์ในการใช้โมโน และ ขึ้นอยู่กับแหล่งกำเนิดอาหารหนึ่งจะต้องรับมือกับแรง autofluorescence หรือรบกวนเศษเซลล์ ผลจากการใช้เครื่องจักรกล ( bisha เบรมสเต็กเคอร์และ 2009b และเนื้อลูกวัว , et al . , 2000 ) สำหรับการวิเคราะห์ที่เหมาะสมของปลาอื่น ๆ การใช้จึงขาดไม่ได้การศึกษาล่าสุด เพื่อตรวจหาเชื้อโรคของปลาเช่น Salmonella ในตัวอย่างอาหารไม่เพียงวิเคราะห์จากเมตริกซ์การวัฒนธรรมอาหาร แต่ยังถูกขัดขวางโดยตรงใช้เมทริกซ์สำหรับการตรวจหาเชื้อโรคที่อาหารผ่านเครื่องนับเซลล์ ( bisha เบรมสเต็กเคอร์และ 2009a bisha เบรมสเต็กเคอร์ , , และ , และและ 2009b bisha เบรมสเต็กเคอร์ , 2010 )วิธีอื่นของการตรวจหาเชื้อ Salmonella ในอาหารโดยใช้ fluorescently labelled แอนติบอดีแทนเบสยังแสดงความสามารถในการใช้งานทั่วไปของเครื่องนับเซลล์สำหรับปลา ( คลี และไพน์เดอร์ , 1994 ) การตรวจสอบวงเงินของปลาไหลประมาณ 103 CFU / ml และด้วยเหตุนี้คล้ายกับที่ได้รับกับกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงแบบปกติ ( bisha เบรมสเต็กเคอร์และ ,2553 ) แม้ว่าความเข้มข้นต่ำอาจจะได้เป็นอย่างดี ( gunasekera et al . , 2003b ) ศักยภาพของปลาไหล , โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับระบบอัตโนมัติและการวิเคราะห์ช่วยในการทดสอบตามปกติของผลิตภัณฑ์อาหารยังไม่ได้ให้ผลการใช้งานมาก และควรใช้ประโยชน์อีกอย่าง ชัดเจน อย่างไรก็ตามเครื่องมือนี้มีแนวโน้มว่าต้องสูงมากค่าใช้จ่ายในการลงทุนมากกว่ากล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ธรรมดา