AbstractBACKGROUND AND OBJECTIVES:M

Abstract
BACKGROUND AND OBJECTIVES:
Methylglyoxal is a toxic product derived from glucose metabolism that plays a role in inflammation, diabetes and aging. In addition, the periodontal pathogen Tannerella forsythensis may also generate this compound. However, the effects of methylglyoxal on gingival cells are still poorly understood. In the present study, we have explored whether methylglyoxal or methylglyoxal-treated collagen may modulate cell viability, death and proliferation in gingival connective tissue cells. In addition, we have searched for inflammatory mediators secreted by cells upon exposure to these conditions.
MATERIAL AND METHODS:
Primary cultures of human gingival fibroblasts were stimulated with soluble methylglyoxal or cultured over a collagen matrix glycated by this agent. Cell viability was evaluated through the MTS assay. Cell death was assessed through DAPI nuclear staining, annexin V and propidium iodide assays. Cell proliferation was evaluated through double immunofluorescence for DAPI and Ki67. Protein levels of matrix metalloproteinases and cytokines were assessed through antibody arrays, enzyme-linked immunosorbent assay, real-time reverse transcription polymerase chain reaction and immunofluorescence. Statistical analysis was performed using the Kruskall-Wallis and Mann-Whitney tests.
RESULTS:
Soluble methylglyoxal, but not culture of gingival fibroblasts over a methylglyoxal-modified collagen matrix, induced a reduction on cell viability. Moreover, soluble methylglyoxal induced apoptotic cell death as indicated by DAPI nuclear staining, annexin V and propidium iodide assays. Neither soluble methylglyoxal, nor methylglyoxal-modified collagen modified cell proliferation. Using an antibody array, enzyme-linked immunosorbent assay and immunofluorescence assays, we determined that both, soluble methylglyoxal and methylglyoxal-modified collagen stimulated an increase in tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP)-1 protein levels.
CONCLUSIONS:
Soluble methylglyoxal is a highly cytotoxic compound that induces cell death through apoptosis in gingival fibroblasts. TIMP-1 is induced in these cells upon direct exposure to methylglyoxal or after culture of gingival fibroblasts over methylglyoxal-treated collagen. As TIMP-1 has been implicated in cell survival and matrix remodeling, we propose that increased TIMP-1 protein levels may be part of a protective response of gingival connective tissue cells upon exposure to methylglyoxal or after the interaction with the collagen matrix that has been modified by this agent.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อพื้นหลังและวัตถุประสงค์:Methylglyoxal เป็นผลิตภัณฑ์เป็นพิษจากการเผาผลาญน้ำตาลกลูโคสที่มีบทบาทในการอักเสบ โรคเบาหวาน และอายุ นอกจากนี้ เชื้อโรคปริทันต์ Tannerella forsythensis อาจจะสร้างสารนี้ อย่างไรก็ตาม ผลกระทบของ methylglyoxal บนเซลล์เหงือกจะยังไม่เข้าใจ ในการศึกษาปัจจุบัน เรามีสำรวจว่า methylglyoxal หรือ methylglyoxal ถือว่าคอลลาเจนอาจปรับเซลล์ชีวิต ความตาย และการแพร่กระจายในเซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่เหงือก นอกจากนี้ เราได้ค้นหาสารตัวกลางอักเสบที่หลั่งมาจากเซลล์เมื่อสภาวะเหล่านี้วัสดุและวิธีการ:วัฒนธรรมหลักของมนุษย์เหงือก fibroblasts ถูกกระตุ้น ด้วย methylglyoxal ละลายน้ำ หรืออ่างผ่าน glycated เมทริกซ์เป็นคอลลาเจนตัวนี้แทน ชีวิตเซลล์ถูกประเมินผ่านทดสอบ MTS ตายของเซลล์รับการประเมินผ่าน DAPI นิวเคลียร์ย้อมสี annexin V และ propidium assays ไอโอไดด์ การแพร่กระจายเซลล์ถูกประเมินผ่านคู่ immunofluorescence DAPI และ Ki67 ระดับโปรตีนเมทริกซ์ metalloproteinases และ cytokines ที่ประเมินผ่านอาร์เรย์แอนติบอดี เอนไซม์ลิงค์ immunosorbent assay ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสถอดย้อนหลังเรียลไทม์ และ immunofluorescence ดำเนินการวิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้ Kruskall-วาล และทดสอบผู้ชายวิทนีย์ผลลัพธ์:Methylglyoxal ละลายน้ำได้ แต่วัฒนธรรมของ fibroblasts เหงือกผ่านเมทริกซ์แก้ไข methylglyoxal คอลลาเจน ไม่เกิดการลดเซลล์ชีวิต นอกจากนี้ methylglyoxal ละลายเกิด apoptotic เซลล์ตายตามที่ระบุ โดย DAPI นิวเคลียร์ย้อมสี annexin V และ propidium assays ไอโอไดด์ ไม่ละลายน้ำ methylglyoxal หรือคอลลาเจนแก้ไข methylglyoxal แก้ไขการแพร่กระจายเซลล์ ใช้อาร์เรย์แอนติบอดี วิเคราะห์เชื่อมโยงเอนไซม์ immunosorbent immunofluorescence assays กำหนด methylglyoxal ละลายและปรับ methylglyoxal คอลลาเจนกระตุ้นการเพิ่มขึ้นของเนื้อเยื่อยับยั้ง metalloproteinase (TIMP) โปรตีน-1 ระดับบทสรุป:Methylglyoxal ละลายน้ำเป็นสารประกอบ cytotoxic สูงที่ก่อให้เกิดการตายของเซลล์ผ่านกันใน fibroblasts เหงือก TIMP-1 จะเกิดในเซลล์เหล่านี้เมื่อสัมผัสโดยตรง methylglyoxal หรือ หลังวัฒนธรรมของ fibroblasts เหงือกมากกว่าคอลลาเจนรักษา methylglyoxal เป็น TIMP-1 มีการเกี่ยวข้องในการอยู่รอดของเซลล์และการเปลี่ยนแปลงเมตริกซ์ เรานำเสนอว่า ระดับโปรตีนที่ TIMP-1 เพิ่มขึ้นอาจจะเป็นส่วนหนึ่งของการตอบสนองของเซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่เหงือกเมื่อแสง methylglyoxal หรือหลัง จากการโต้ตอบกับเมทริกซ์คอลลาเจนที่ถูกแก้ไข โดยตัวแทนนี้ป้องกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ
มาและวัตถุประสงค์:
methylglyoxal เป็นสินค้าที่มีสารพิษที่ได้มาจากการเผาผลาญกลูโคสที่มีบทบาทในการอักเสบ, โรคเบาหวานและริ้วรอย นอกจากนี้การติดเชื้อปริทันต์ Tannerella forsythensis ยังอาจสร้างสารนี้ อย่างไรก็ตามผลกระทบของ methylglyoxal เซลล์เหงือกยังคงเข้าใจได้ไม่ดี ในการศึกษาปัจจุบันเรามีการสำรวจว่า methylglyoxal หรือคอลลาเจน methylglyoxal รับการรักษาอาจปรับเซลล์ที่มีชีวิตความตายและการแพร่กระจายในเซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพันเหงือก นอกจากนี้เราได้ทำการค้นหาผู้ไกล่เกลี่ยการอักเสบที่หลั่งมาจากเซลล์เมื่อสัมผัสกับเงื่อนไขเหล่านี้.
วัสดุและวิธีการ:
วัฒนธรรมหลักของเซลล์มนุษย์เหงือกถูกกระตุ้นด้วย methylglyoxal ละลายน้ำหรือเพาะเลี้ยงมากกว่าเมทริกซ์คอลลาเจน glycated โดยตัวแทนนี้ ชีวิตของเซลล์ได้รับการประเมินผ่านการทดสอบเอ็มทีเอ การตายของเซลล์ได้รับการประเมินผ่านการย้อมสี DAPI นิวเคลียร์ annexin V และตรวจ propidium ไอโอไดด์ การเพิ่มจำนวนเซลล์ได้รับการประเมินผ่านอิมมูโนคู่สำหรับ DAPI และ Ki67 ระดับโปรตีนของเมทริกซ์ metalloproteinases และ cytokines ที่ได้รับการประเมินผ่านอาร์เรย์แอนติบอดีเอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโนแบบ real-time ปฏิกิริยาลูกโซ่ถอดรหัสแบบย้อนกลับโพลิเมอร์และอิมมูโน การวิเคราะห์ทางสถิติได้ดำเนินการโดยใช้การทดสอบ Kruskall-วาลลิสและ Mann-Whitney.
ผลการศึกษา:
methylglyoxal ที่ละลายน้ำได้ แต่ไม่วัฒนธรรมของเซลล์เหงือกกว่า methylglyoxal แก้ไขคอลลาเจนแมทริกซ์, เหนี่ยวนำให้เกิดการลดลงของการมีชีวิตอยู่บนมือถือ นอกจากนี้ methylglyoxal ที่ละลายเหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์ apoptotic ตามที่ระบุโดย DAPI ย้อมสีนิวเคลียร์ annexin V และตรวจ propidium ไอโอไดด์ ทั้ง methylglyoxal ที่ละลายน้ำได้หรือ methylglyoxal แก้ไขคอลลาเจนมีการปรับเปลี่ยนการเพิ่มจำนวนเซลล์ โดยใช้อาร์เรย์แอนติบอดีเอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโนและอิมมูโนตรวจเราได้พิจารณาแล้วว่าทั้งสองคอลลาเจน methylglyoxal ละลายน้ำและ methylglyoxal แก้ไขกระตุ้นเพิ่มขึ้นในการยับยั้งของเนื้อเยื่อ metalloproteinase (TIMP) -1 ระดับโปรตีน.
สรุป
methylglyoxal ละลายน้ำเป็นพิษสูง สารที่ก่อให้เกิดการตายของเซลล์ผ่านการตายของเซลล์ในเซลล์เหงือก TIMP-1 เหนี่ยวนำเซลล์เหล่านี้เมื่อการสัมผัสโดยตรงกับ methylglyoxal หรือหลังวัฒนธรรมของเซลล์เหงือกกว่าคอลลาเจน methylglyoxal รับการรักษา ในฐานะที่เป็น TIMP-1 มีส่วนเกี่ยวข้องในการอยู่รอดของเซลล์และการเปลี่ยนแปลงเมทริกซ์เราเสนอว่าเพิ่มขึ้น TIMP-1 ระดับโปรตีนอาจจะเป็นส่วนหนึ่งของการตอบสนองต่อการป้องกันของเซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพันเหงือกเมื่อสัมผัสกับ methylglyoxal หรือหลังการมีปฏิสัมพันธ์กับเมทริกซ์คอลลาเจนที่ได้รับ แก้ไขโดยตัวแทนนี้