2.6. Quantitative real time PCR ana

2.6. Quantitative real time PCR analyses
Briefly, 1 lg total RNA was digested by DNaseI (Invitrogen,
Carlsbad, CA, USA) and then used for first-stand cDNA synthesis
using a SuperScript III Reverse Transcriptase kit (Invitrogen),
according to the manufacturer’s instructions. Quantitative real
time (qRT)-PCR was performed using a LightCycler 480 detection
system (Roche, Basel, Switzerland) using an SYBR Green kit
(Roche). Primers for qRT-PCR analysis of CMS or MPR25 transcripts
are listed in Supplementary Table S1. The rice Actin1 gene
(LOC_Os03g50890) was used as an internal reference to normalize
the transcript levels of tested genes. Three biological repeats were
analyzed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 การเชิงปริมาณจริงเวลาวิเคราะห์ PCRBriefly อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกต้อง โดย DNaseI (Invitrogen, lg 1คาร์ลส CA, USA) แล้ว นำไปใช้ในการสังเคราะห์ cDNA ยืน firstใช้ชุด Transcriptase กลับ III ตัวยก (Invitrogen),ตามคำแนะนำของผู้ผลิต จริงเชิงปริมาณเวลา (qRT) -ทำ PCR ใช้ตรวจ LightCycler 480ระบบ (Roche บาเซิล สวิตเซอร์แลนด์) โดยใช้ชุดการ SYBR Green(โร) ไพรเมอร์สำหรับการวิเคราะห์ qRT PCR ซ.ม.หรือ MPR25 ใบแสดงผลตั้งอยู่ใน S1 ตารางเสริม ยีนข้าว Actin1(LOC_Os03g50890) ถูกใช้เป็นการอ้างอิงภายในปกติระดับเสียงบรรยายของทดสอบ ทำซ้ำทางชีวภาพที่สามได้วิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 ปริมาณ time PCR จริงวิเคราะห์
Brie ชั้นและ 1 LG RNA ทั้งหมดถูกย่อยโดย DNaseI (Invitrogen,
Carlsbad, CA, USA) และนำไปใช้สำหรับสายการสังเคราะห์ cDNA แรกยืน
โดยใช้ยกที่สามกลับ Transcriptase ชุด (Invitrogen)
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ปริมาณจริง
เวลา (qRT) -PCR ได้รับการดำเนินการโดยใช้ LightCycler 480 การตรวจสอบ
ระบบ (Roche, บาเซิล, สวิตเซอร์) โดยใช้ SYBR ชุดสีเขียว
(Roche) ไพรเมอร์สำหรับการวิเคราะห์ qRT-PCR ของ CMS หรือจิตบำบัด MPR25
มีการระบุไว้ใน S1 ตารางเสริม ข้าว Actin1 ยีน
(LOC_Os03g50890) ถูกนำมาใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงภายในที่จะปรับ
ระดับสำเนาของยีนที่ผ่านการทดสอบ สามซ้ำทางชีวภาพได้รับการ
วิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 เชิงปริมาณโดยการวิเคราะห์เวลาจริง
บรีfl Y 1 LG รวม RNA ถูกย่อยโดย dnasei ( Invitrogen
Carlsbad , CA , USA ) และจากนั้นใช้จึงตัดสินใจเดินทางไปยืนยีนสังเคราะห์
ใช้ตัวยก III reverse transcriptase Kit ( Invitrogen )
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ปริมาณจริง
( ข้าพเจ้า ) - PCR คือการใช้ lightcycler 480 ระบบตรวจจับ
( โรเช่ , Basel ,สวิตเซอร์แลนด์ ) โดยใช้ SYBR กรีนคิท
( โรช ) ไพรเมอร์สำหรับการวิเคราะห์ PCR ข้าพเจ้า CMS หรือ mpr25 transcripts
อยู่ในโต๊ะเสริม S1 . ข้าว actin1 ยีน
( loc_os03g50890 ) ถูกใช้เป็นอ้างอิงภายในปกติ
ระดับใบทดสอบยีน 3 ทำซ้ำทางชีวภาพถูก
วิเคราะห์