Introduction: RNAi in insect geneti

Introduction: RNAi in insect genetics and crop
protection
A decade has passed since the initial discovery of RNA
interference (RNAi) in the nematode Caenorhabditis elegans
[1], and it is now clear that double-stranded RNA
(dsRNA)-mediated gene silencing is a conserved mechanism
in many eukaryotes [2,3] (Box 1, Figure 1). Since its
initial description the technique has become a valuable tool
for functional genomics in insects, particularly in studying
gene function in the model insect Drosophila melanogaster
[4–6]. The preferred delivery methodology in the majority
of insect studies has been microinjection of nanogram
amounts of long dsRNA, synthesized in vitro, into the
insect haemoceol [7]. This method of delivery contrasts
with the situation in C. elegans, where RNAi effects can be
produced by feeding bacteria expressing dsRNA [8,9], or
even by soaking nematodes in dsRNA solution [10]. Microinjection
of dsRNA in insects was considered to be necessary
to produce RNAi effects because the complete genome
sequence for D. melanogaster (and, subsequently, for other
insects) has shown that they lack genes encoding RNAdependent
RNA polymerase (RdRP). RdRP is the enzyme
necessary for the siRNA amplification step that leads to
persistent and systemic RNAi effects [11]. The RdRP function
is defined by a characteristic domain, designated
PF05183 in the PFAM database (http://pfam.sanger.ac.uk),
that has been identified in gene products of eukaryotic
microorganisms, fungi, plants, nematodes and a
primitive vertebrate (Branchiostoma floridae – a cephalochordate)
but not in insects, molluscs or other vertebrates.
The absence of RdRP in insects predicts that any effects of
RNAi will be limited to cells that have taken up dsRNA

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทนำ: RNAi
ทางพันธุศาสตร์พืชแมลงและป้องกันทศวรรษที่ผ่านมาตั้งแต่การค้นพบครั้งแรกของอาร์เอ็นเอรบกวน(RNAi) ในไส้เดือนฝอย Caenorhabditis elegans [1] และตอนนี้มันเป็นที่ชัดเจนว่าอาร์เอ็นเอเกลียวคู่(dsRNA) สมรยีน -mediated คือ กลไกการอนุรักษ์ในยูคาริโอหลาย[2,3] (กล่องที่ 1 รูปที่ 1) ตั้งแต่คำอธิบายเริ่มต้นเทคนิคได้กลายเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับฟังก์ชั่นการทำงานในแมลงโดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาหน้าที่ของยีนในรูปแบบของแมลงหวี่melanogaster [4-6] วิธีการจัดส่งที่ต้องการในส่วนใหญ่ของการศึกษาแมลงที่ได้รับ microinjection ของนาโนกรัมจำนวนยาวdsRNA, สังเคราะห์ในหลอดทดลองลงในhaemoceol แมลง [7] วิธีการส่งมอบนี้แตกต่างกับสถานการณ์ใน elegans ซีที่ผลกระทบ RNAi สามารถผลิตโดยการให้อาหารแบคทีเรียแสดงdsRNA [8,9] หรือแม้กระทั่งไส้เดือนฝอยโดยการแช่ในสารละลายdsRNA [10] Microinjection ของ dsRNA แมลงถูกพิจารณาว่ามีความจำเป็นที่จะก่อให้เกิดผลRNAi เพราะจีโนมที่สมบูรณ์ลำดับสำหรับD. melanogaster (และต่อมาอื่น ๆแมลง) ได้แสดงให้เห็นว่าพวกเขาขาดยีน RNAdependent โพลิเมอร์อาร์เอ็นเอ (RdRP) RdRP เป็นเอนไซม์ที่จำเป็นสำหรับขั้นตอนการขยายsiRNA ที่นำไปสู่ผลกระทบRNAi ถาวรและระบบ [11] ฟังก์ชั่น RdRP ถูกกำหนดโดยโดเมนลักษณะที่กำหนดPF05183 ในฐานข้อมูล Pfam (http://pfam.sanger.ac.uk) ที่ได้รับการระบุไว้ในผลิตภัณฑ์ยีน eukaryotic จุลินทรีย์เชื้อราพืชไส้เดือนฝอยและเลี้ยงลูกด้วยนมดั้งเดิม(Branchiostoma floridae - ทาง cephalochordate) แต่ไม่ได้อยู่ในแมลงหอยหรือสัตว์มีกระดูกสันหลังอื่น ๆ . กรณีที่ไม่มี RdRP แมลงคาดการณ์ว่าผลกระทบใด ๆ ของRNAi จะถูก จำกัด ให้เซลล์ที่เกิดขึ้น dsRNA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บทนำ : RNAi ในพันธุศาสตร์พืชแมลงและการป้องกัน

ทศวรรษที่ผ่านตั้งแต่การค้นพบครั้งแรกของ RNA
รบกวนหาในหนอนตัวกลม C ³
[ 1 ] และมันคือตอนนี้ชัดเจนว่าคู่ตีเกลียว RNA ( dsRNA )
- โดยยีนไซเลนซิง คือ ศึกษากลไก
ในหลายยูแคริโอต [ 2 ] ( กล่องที่ 1 รูปที่ 1 ) เนื่องจากคำอธิบายของ
เริ่มต้นเทคนิคได้กลายเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่า
สำหรับการทำงานในแมลง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษา
ฟังก์ชั่นยีนในรูปแบบแมลงแมลงวันทอง
[ 4 – 6 ) วิธีการจัดส่งที่ต้องการในส่วนใหญ่
แมลงศึกษาได้รับไมโครอินเจคชันของดาลตัน
จํานวนยาว dsRNA สังเคราะห์ ในสภาพปลอดเชื้อ เป็นแมลง haemoceol
[ 7 ] วิธีการจัดส่งนี้แตกต่างกับสถานการณ์ในถิ่น
C ,ที่หาผลสามารถผลิตโดยแบคทีเรียการแสดงให้อาหาร
[ ]
8,9 dsRNA หรือแม้กระทั่งโดยการแช่ในสารละลายทำลาย dsRNA [ 10 ] ไมโครอินเจคชัน
ของ dsRNA ในแมลงก็ถือว่าจำเป็น
ผลิตผลเพราะหาลำดับจีโนมที่สมบูรณ์แบบสำหรับ D .
( และต่อมาสำหรับแมลงอื่นๆ
) ก็แสดงว่าพวกเขาขาดยีน rnadependent
อาร์เอ็นเอพอลิเมอเรส ( rdrp การเข้ารหัส )rdrp เป็นเอนไซม์ที่จำเป็นสำหรับบริษัท (

แบบถาวร และขั้นตอนที่นำไปสู่ระบบหาผล [ 11 ] ฟังก์ชัน rdrp
ถูกกำหนดโดยโดเมนลักษณะเขต
pf05183 ใน pfam ฐานข้อมูล ( http : / / pfam . แซงเกอร์ . ac.uk )
ที่ได้รับการระบุในยีนของยูคาริโอติก
ผลิตภัณฑ์จุลินทรีย์ เชื้อรา พืช , ไส้เดือนฝอยและ
ดั้งเดิมของสัตว์มีกระดูกสันหลัง ( branchiostoma floridae ซึ่ง cephalochordate )
แต่ในแมลง หอย หรือสัตว์อื่น ๆ .
ขาด rdrp ในแมลง คาดการณ์ว่าผลของ
หาใดจะถูกจำกัดไปยังเซลล์ที่ใช้ dsRNA