To detect A. citrulli, each section

To detect A. citrulli, each section was
placed in a separate microcentrifuge tube containing 1 ml of PBS,
macerated using a sterile glass rod and vigorously agitated for
30 s (Vortex Genie2; Fisher Scientific International, Pittsburgh,
PA). An UltraClean Microbial DNA Kit (MO BIO Laboratories,
Inc., Carlsbad, CA) was used to extract microbial genomic DNA
from seed tissues according to the manufacturer’s instructions.
DNA (10 to 15 ng/μl) was subjected to real-time PCR assay using
A. citrulli-specific primers as previously described (10). Samples
with cycle threshold (Ct) values less than 35 were considered to
be positive for A. citrulli. To ensure that there was no PCR inhibition
in samples that yielded negative results, 5 ng/μl of A.
citrulli genomic DNA was added to DNA preparations from 10
control seed samples and subjected to real-time PCR as described

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการตรวจสอบ citrulli A.
แต่ละส่วนถูกวางไว้ในหลอดไมโครแยกที่มี1
มิลลิลิตรพีบีเอสหมักโดยใช้แท่งแก้วผ่านการฆ่าเชื้อและไม่สบายใจอย่างจริงจังสำหรับ
30 วินาที (Vortex Genie2; ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์นานาชาติพิตส์เบิร์ก,
PA) ultraclean จุลินทรีย์ดีเอ็นเอ Kit (MO BIO ห้องปฏิบัติการ,
อิงค์ Carlsbad, CA)
ถูกนำมาใช้ในการสกัดดีเอ็นเอของจุลินทรีย์จากเนื้อเยื่อเมล็ดตามคำแนะนำของผู้ผลิต.
ดีเอ็นเอ (10-15 ng / ไมโครลิตร) ถูกยัดเยียดให้เวลาจริงการทดสอบ PCR
โดยใช้เอ ไพรเมอร์ citrulli เฉพาะตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (10) ตัวอย่างกับเกณฑ์วงจร (CT) ค่าน้อยกว่า 35
ได้รับการพิจารณาให้เป็นบวกสำหรับเอ citrulli
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการยับยั้ง PCR
ในตัวอย่างที่ส่งผลเชิงลบ 5 ng /
ไมโครลิตรของเอดีเอ็นเอcitrulli ถูกบันทึกอยู่ในการเตรียมดีเอ็นเอจาก 10
การควบคุมตัวอย่างเมล็ดพันธุ์และยัดเยียดให้ PCR เวลาจริงตามที่อธิบายไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อตรวจสอบ . citrulli แต่ละส่วนถูก
วางไว้ในหลอดไมโครเซนตริฟิวจ์ แยก ประกอบด้วย 1 มิลลิลิตรของพีบีเอส
macerated โดยใช้แท่งแก้วที่เป็นหมันและชะมัดตื่นเต้นสำหรับ
30 S ( วอร์ genie2 ; ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์นานาชาติ , พิตส์เบิร์ก ,
PA ) ที่สะอาดปราศจากเชื้อโรคจุลินทรีย์ชุดดีเอ็นเอ ( โมไบห้องปฏิบัติการ
อิงค์ , Carlsbad , CA ) คือใช้สารสกัดจากจุลินทรีย์ดีเอ็นเอ
จากเนื้อเยื่อเมล็ดตามคำแนะนำของผู้ผลิต
DNA ( 10 ถึง 15 กรัม / μ L ) ภายใต้การทดสอบ PCR แบบเรียลไทม์โดยใช้ไพร์เมอร์จำเพาะ
. citrulli ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( 10 ) ตัวอย่าง
กับวัฏจักรธรณี ( CT ) มีค่าน้อยกว่า 35 ถือว่า
เป็นบวก . citrulli . เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มียีนยับยั้ง
ในตัวอย่างที่ให้ผลผลลัพธ์ลบ 5 ng / μ l .
citrulli genomic DNA ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในการเตรียมดีเอ็นเอจากตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ควบคุม 10
และ PCR แบบเรียลไทม์ จำนวนตามที่ระบุไว้