Effect of pH and temperature on enz

Effect of pH and temperature on enzyme
activity
To find out the optimum pH of the protease
produced by B. cereus the activity of partially
purified enzyme was measured at different pH.
Protease enzyme activity was measured at different
pH values (7.5, 8.5, 9.5, 10.5 and 11.5) using
Phosphate buffer, Tris-HCl buffer and Na2CO3/NaOH
buffer. Reaction mixtures of different pH were
incubated at 501C and the activity of enzyme was
measured.
Effect of temperature on protease activity was
studied by incubating the reaction mixture at
different temperatures ranging from 301C to 601C.
The reactions were carried out at the optimum pH
10.5 and the activity of the enzyme was measured.
Estimation of protease activity in laundry
detergents
For estimation of protease activity in commercial
laundry detergents most popular detergents of
Indian market namely Surf Excel Matic (Hindustan
Lever Limited), Tide (Procter and Gamble), Rin
ARTICLE IN PRESS
136 R.M. Banik, M. Prakash
Shakti (Hindustan Lever Limited), Ariel Power
Compact (Procter and Gamble), Henko Stain Champion
(Henkel Spic India Limited), Mr. White (Henkel
Spic India Limited) and Fena Super Power (Saci
Allied Product Limited) were studied. These detergent
powders consist of different coloured granules.
Three samples of each detergent were made.
First type of sample was prepared by taking only
coloured granules after separating them from
whole detergents. Second type of sample was
prepared by taking whole detergent powder. The
coloured granules present in the detergents were
crushed properly to make uniform distribution of
the enzyme in detergent powder. Third sample was
prepared by taking only detergent powder free
from coloured granules. 2% solution (20 mg/ml) of
each sample was prepared using distilled water and
protease activity was assayed at pH 10.5 and
absorbance was determined spectrophotometrically
at 275 nm.
Protein assay of laundry detergents
Protein content in laundry detergents was estimated
by the method of Lowry et al. Using bovine
serum albumin as the standard (Lowry et al., 1951).
Compatibility of Bacillus cereus protease
with laundry detergents
The compatibility of B. cereus protease with
commercial laundry detergents was studied using
Surf Excel Matic, Tide, Rin Shakti, Ariel Power
Compact, Henko Stain Champion and Mr. White. For
the study of compatibility these detergents were
dissolved in distilled water in concentration of
7 mg/ml (Banerjee et al., 1999; Bhosale et al.,
1995). Endogenous protease present in these
detergents was inactivated by incubating the
detergent solutions at 651C for 1 h prior to the
addition of the exogenous protease obtained from
B. cereus (Samal et al., 1990). After addition of
exogenous protease in detergent solution (1 ml
enzyme in 4ml detergent solution), the mixture
was incubated at 501C for 1 h (Samal et al., 1990;
Bhosale et al., 1995; Banerjee et al., 1999; Singh
et al., 2001) and the residual protease activity was
determined. The enzyme activity of a control
sample (without any detergent) was taken as 100%.
The stability of B. cereus protease in presence of
the best three laundry detergents namely Surf
Excel Matic, Ariel Power Compact and Henko Stain
Champion was also measured after incubation of
the B. cereus protease with the laundry detergents
at 401C and 501C for different periods upto 2 h. The
activity of exogenous protease was compared with
the residual endogenous proteases present in the
laundry detergents after incubation at 401C and
501C upto 2 h.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลของอุณหภูมิและค่า pH ในเอนไซม์กิจกรรมการหา pH ที่เหมาะสมโปรติเอสผลิต โดย B. cereus การบางส่วนมีวัดเอนไซม์บริสุทธิ์ที่ pH ต่าง ๆรติเอสเอนไซม์ที่มีวัดที่แตกต่างกันค่า pH (7.5, 8.5, 9.5, 10.5 และ 11.5) ใช้ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ บัฟเฟอร์ทริ HCl และ Na2CO3/NaOHบัฟเฟอร์ ส่วนผสมปฏิกิริยาค่า pH แตกต่างกันได้ได้รับการกกที่ 501 C และกิจกรรมของเอนไซม์ได้วัดผลของอุณหภูมิในกิจกรรมรติเอสศึกษา โดย incubating ผสมปฏิกิริยาที่อุณหภูมิแตกต่างกันตั้งแต่ 301C ถึงค. 601ปฏิกิริยาที่ดำเนินการที่ค่า pH ที่เหมาะสมมีวัดกิจกรรมของเอนไซม์และ 10.5การประเมินกิจกรรมรติเอสในซักผงซักฟอกสำหรับการประเมินกิจกรรมรติเอสพาณิชย์ซักผงซักฟอกนิยมผงซักฟอกของตลาดอินเดียคือ Surf Excel Matic (เดลิทางก้านที่จำกัด), น้ำ (Procter และเสี่ยงโชค) ริ้นบทความในข่าวBanik 136 R.M., M. พราแรมชัคตี้ (เดลิ จำกัดก้าน), เพาเวอร์แอเรียลคอมแพค (Procter และเสี่ยงโชค), สีย้อม Henko แชมป์(เฮงเค็ลขาวสะอาด จำกัดอินเดีย), นายขาว (เฮงเค็ลอินเดียขาวสะอาดจำกัด) และซูเปอร์ Fena (Saciผลิตภัณฑ์พันธมิตรจำกัด) ได้ศึกษาการ ผงซักฟอกเหล่านี้ผงประกอบด้วยเม็ดสีที่แตกต่างกันทำสามตัวอย่างผงซักฟอกแต่ละชนิดแรกของตัวอย่างถูกเตรียมการเม็ดสีหลังจากแยกออกจากผงซักฟอกทั้งนี้ ชนิดที่สองของตัวอย่างจัดทำ โดยใช้ผงฟอกทั้งหมด การเม็ดสีที่อยู่ในผงซักฟอกได้บดอย่างถูกต้องเพื่อให้กระจายสม่ำเสมอของเอนไซม์ในผงซักฟอก ตัวอย่างที่สามคือเตรียมเฉพาะผงฟอกฟรีจากเม็ดสี แก้ปัญหา 2% (20 mg/ml) ของแต่ละอย่างถูกเตรียมการใช้น้ำกลั่น และกิจกรรมรติเอสถูก assayed ที่ค่า pH 10.5 และกำหนด absorbance spectrophotometricallyที่ 275 nmทดสอบโปรตีนของผงซักฟอกซักรีดประเมินปริมาณโปรตีนในผงซักฟอกซักรีดโดยวิธีการของประเทศร้อยเอ็ดใช้วัวserum albumin เป็นมาตรฐาน (ของประเทศ et al. 1951)กันโปรติเอส cereus บาซิลลัสกับผงซักฟอกซักรีดของ B. cereus รติเอสด้วยผงซักฟอกซักรีดค้าเป็นศึกษาการใช้ท่อง Excel Matic แรมชัค ตี้หาดริ้น น้ำ ไฟเอเรียลขนาดกะทัดรัด แชมป์สีย้อม Henko และนายขาว สำหรับการศึกษาความเข้ากันได้ผงซักฟอกเหล่านี้ได้ละลายในน้ำกลั่นในความเข้มข้นของ7 mg/ml (Banerjee และ al. 1999 Bhosale et al.,1995) . รติเอสภายนอกอยู่ในเหล่านี้ผงซักฟอกถูกยก โดย incubating การโซลูชั่นผงซักฟอกที่ 651C สำหรับ 1 ชั่วโมงก่อนนอกจากนี้โปรติเอสภายนอกที่ได้รับจากB. cereus (มอล et al. 1990) จากรติเอสภายนอกในผงซักฟอก (1 มิลลิลิตรเอนไซม์ในผงซักฟอก 4 ml), ส่วนผสมได้รับการกกที่ C 501 สำหรับ h 1 (มอลและ al. 1990Bhosale et al. 1995 Banerjee et al. 1999 สิงห์et al., 2001) and the residual protease activity wasdetermined. The enzyme activity of a controlsample (without any detergent) was taken as 100%.The stability of B. cereus protease in presence ofthe best three laundry detergents namely SurfExcel Matic, Ariel Power Compact and Henko StainChampion was also measured after incubation ofthe B. cereus protease with the laundry detergentsat 401C and 501C for different periods upto 2 h. Theactivity of exogenous protease was compared withthe residual endogenous proteases present in thelaundry detergents after incubation at 401C and501C upto 2 h.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผลของพีเอชและอุณหภูมิในการทำงานของเอนไซม์
กิจกรรม
เพื่อหาค่า pH ที่เหมาะสมของน้ำย่อย
ที่ผลิตโดย B. cereus กิจกรรมบางส่วน
เอนไซม์วัดค่า pH ที่แตกต่างกัน.
กิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอสวัดที่แตกต่างกัน
ค่าพีเอช (7.5, 8.5, 9.5, 10.5 และ 11.5) โดยใช้
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์บัฟเฟอร์ Tris-HCl และ Na2CO3 / NaOH
บัฟเฟอร์ ผสมปฏิกิริยาของค่า pH ที่แตกต่างกัน
บ่มที่ 501C และกิจกรรมของเอนไซม์ที่ถูก
วัด.
ผลของอุณหภูมิกับกิจกรรมโปรติเอสได้รับการ
ศึกษาโดยการบ่มผสมปฏิกิริยาที่
อุณหภูมิแตกต่างกันตั้งแต่ 301C เพื่อ 601C.
ปฏิกิริยาได้ดำเนินการที่ค่า pH ที่เหมาะสม
10.5 และ กิจกรรมของเอนไซม์ที่ถูกวัด.
การประมาณการของกิจกรรมโปรติเอสในซักรีด
ผงซักฟอก
สำหรับการประมาณของกิจกรรมโปรติเอสในเชิงพาณิชย์
ผงซักฟอกซักอบรีดผงซักฟอกนิยมมากที่สุดของ
ตลาดอินเดียคือ Surf Excel Matic (Hindustan
Lever จำกัด ), Tide (Procter and Gamble) ริ้น
บทความใน PRESS
136 RM Banik เอ็มแกช
Shakti (Hindustan Lever จำกัด ), แอเรียลพาวเวอร์
ขนาดกะทัดรัด (Procter and Gamble) Henko Stain แชมป์
(เฮงเค็ล Spic อินเดีย จำกัด ) นายขาว (เฮงเค็ล
Spic อินเดีย จำกัด ) และ บริษัท ฟีน่าซูเปอร์เพาเวอร์ (Saci
พันธมิตร สินค้ามีจำนวน จำกัด ) ได้รับการศึกษา เหล่านี้ผงซักฟอก
ผงประกอบด้วยเม็ดสีที่แตกต่างกัน.
สามตัวอย่างของแต่ละผงซักฟอกได้ทำ.
ชนิดแรกของกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการจัดทำขึ้นโดยใช้เวลาเพียงแค่
เม็ดสีหลังจากที่แยกพวกเขาออกจาก
ผงซักฟอกทั้งหมด ประเภทที่สองของกลุ่มตัวอย่างได้รับการ
จัดทำขึ้นโดยการใช้ผงผงซักฟอกทั้งหมด
เม็ดสีอยู่ในผงซักฟอกที่ถูก
บดอย่างถูกต้องที่จะทำให้การกระจายชุดของ
เอนไซม์ในผงซักฟอกผง ตัวอย่างที่สามคือ
จัดทำขึ้นโดยใช้เวลาเพียงแค่ผงผงซักฟอกฟรี
จากเม็ดสี วิธีการแก้ปัญหา 2% (20 mg / ml) ของ
แต่ละตัวอย่างถูกจัดทำขึ้นโดยใช้น้ำและการกลั่น
น้ำย่อยกิจกรรมได้รับการวิเคราะห์ที่ pH 10.5 และ
การดูดกลืนแสงที่ถูกกำหนด spectrophotometrically
ที่ 275 นาโนเมตร.
โปรตีนทดสอบของผงซักฟอกซักอบรีด
ปริมาณโปรตีนในผงซักฟอกซักอบรีดถูกประเมิน
โดยวิธีการ โลว์รีย์, et al โดยใช้วัว
ซีรั่มอัลบูมินเป็นมาตรฐาน (Lowry et al., 1951).
ความเข้ากันได้ของ Bacillus cereus น้ำย่อย
ด้วยผงซักฟอกซักอบรีด
เข้ากันได้ของ B. cereus น้ำย่อยด้วย
ผงซักฟอกซักรีดเชิงพาณิชย์ได้ศึกษาโดยใช้
คลื่น Excel Matic น้ำริน Shakti, เอเรียลพาวเวอร์
ขนาดกะทัดรัด , Henko Stain แชมป์และนายขาว สำหรับ
การศึกษาของการทำงานร่วมกันเหล่านี้ถูกผงซักฟอก
ละลายในน้ำกลั่นในความเข้มข้นของ
7 mg / ml (Banerjee et al, 1999;.. Bhosale, et al,
1995) ภายนอกปัจจุบันน้ำย่อยในทั้ง
ผงซักฟอกถูกยกเลิกโดยบ่ม
โซลูชั่นผงซักฟอกที่ 651C เป็นเวลา 1 ชั่วโมงก่อนที่จะมี
การเพิ่มขึ้นของน้ำย่อยจากภายนอกที่ได้รับจาก
บี cereus (ซามอล et al., 1990) หลังจากที่เพิ่มขึ้นของ
น้ำย่อยจากภายนอกในการแก้ปัญหาผงซักฟอก (1 ml
เอนไซม์ในการแก้ปัญหาผงซักฟอก 4ml) ผสม
ได้รับการบ่มที่ 501C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง (ซามอล, et al, 1990;.
Bhosale, et al, 1995;. Banerjee et al, 1999;. ซิงห์
et al., 2001) และกิจกรรมโปรติเอสที่เหลือได้รับ
การพิจารณา เอนไซม์ของการควบคุม
ตัวอย่าง (ไม่มีผงซักฟอกใด ๆ ) ถูกนำมาเป็น 100%.
ความมั่นคงของ B. cereus น้ำย่อยในที่ที่
ดีที่สุดสามผงซักฟอกซักอบรีดคือ Surf
Excel Matic, เอเรียลพาวเวอร์ขนาดกะทัดรัดและ Henko Stain
แชมป์ก็ยังวัดหลังจากการบ่ม ของ
โปรติเอส B. cereus กับผงซักฟอกซักผ้า
ที่ 401C และ 501C สำหรับระยะเวลาที่แตกต่างกันไม่เกิน 2 ชั่วโมง
กิจกรรมของโปรติเอสจากภายนอกถูกเมื่อเทียบกับ
โปรตีเอสที่เหลือภายนอกอยู่ใน
ผงซักฟอกซักอบรีดหลังจากการบ่มที่ 401C และ
501C ไม่เกิน 2 ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลของ pH และอุณหภูมิที่เอนไซม์กิจกรรมหา pH ที่เหมาะสมของโปรติเอสผลิตโดย B . cereus กิจกรรมบางส่วนเอนไซม์คือวัดที่แตกต่างกัน .กิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอสถูกวัดที่แตกต่างกันค่า pH 7.5 , 8.5 , 9.5 และ 10.5 11.5 ) โดยใช้ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ บัฟเฟอร์โดย Na2CO3 / NaOH และ HClบัฟเฟอร์ ปฏิกิริยาผสมที่แตกต่างกันอ คืออุณหภูมิ 501c และกิจกรรมของเอนไซม์คือวัดผลของอุณหภูมิต่อโปรตีน คือ กิจกรรมศึกษา โดยการแช่ในปฏิกิริยาผสมอุณหภูมิที่แตกต่างกันตั้งแต่ 301c เพื่อ 601c .ปฏิกิริยาทดลองที่พีเอชที่เหมาะสม10.5 และกิจกรรมของเอนไซม์ที่ถูกวัดการประเมินกิจกรรมซักรีดโปรติเอสผงซักฟอกการสร้างกิจกรรมเชิงพาณิชย์ซักผงซักฟอกผงซักฟอกที่ได้รับความนิยมมากที่สุดตลาดอินเดียคือ Surf Excel matic ( ประเทศอินเดียคันโยก จำกัด ) , น้ำ ( Procter และ ) , รินบทความโดยกด136 r.m. ประกาศ banik Mศักติ ( Hindustan คันโยก จำกัด ) , แอเรียลพลังงานขนาดกะทัดรัด ( Procter และแชมป์ henko คราบ )( Henkel / อินเดีย จำกัด ) , คุณไวท์ ( Henkel/ อินเดียจำกัด ) และฟีเน่ ซูเปอร์เพาเวอร์ ( ซาซีพันธมิตรผลิตภัณฑ์ จำกัด ) ได้ เหล่านี้ ผงซักฟอกผงประกอบด้วยเม็ดสีต่าง ๆสามตัวอย่างของแต่ละแบบได้ชนิดแรกของตัวอย่างที่เตรียมไว้ โดยการใช้เพียงเม็ดสีหลังจากการแยกพวกเขาจากทั้งผงซักฟอก ประเภทที่สองของตัวอย่างเตรียมโดยนำผงซักฟอกทั้งหมด ที่เม็ดสีที่มีอยู่ในผงซักฟอกคือบดอย่างถูกต้องเพื่อให้เครื่องแบบกระจายเอนไซม์ในผงซักฟอก . ตัวอย่างที่สามเตรียมโดยการใช้ผงซักฟอกเพียงฟรีจากเม็ดสี 2% สารละลาย ( 20 mg / ml ) ของแต่ละตัวอย่างถูกเตรียมการใช้น้ำกลั่นและกิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอสซีรั่มที่ pH 10.5 และค่ากำหนดนี้ คือที่ 275 นาโนเมตรการทดสอบโปรตีนของผงซักฟอกซักรีดโปรตีนในผงซักฟอกซักรีดประมาณโดยวิธีของโลว์รีย์ et al . ใช้วัวอัลบูมินเป็นมาตรฐาน ( เบส et al . , 1951 )ความเข้ากันได้ของ Bacillus cereus และเอนไซม์กับผงซักฟอกซักผ้าความเข้ากันได้ของ B . cereus กับโปรติเอสผงซักฟอกซักรีดในเชิงพาณิชย์ ศึกษาโดยใช้Surf Excel Matic . รินศักติ แอเรียลพลังงานกระชับ henko คราบ แชมป์ และ คุณไวท์ สำหรับการศึกษาความเข้ากันได้ของผงซักฟอกเหล่านี้ที่ละลายในน้ำความเข้มข้นของ7 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ( Banerjee et al . , 1999 ; bhosale et al . ,1995 ) พบโปรตีนที่มีอยู่ในเหล่านี้ผงซักฟอกเป็น inactivated โดยการแช่ในผงซักฟอก โซลูชั่นที่ 651c เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ก่อนที่จะมีการเพิ่มของโปรติเอสจากภายนอกได้B . cereus ( ซามาล et al . , 1990 ) หลังจากเพิ่มเอนไซม์โปรติเอสจากภายนอกในสารละลายผงซักฟอก ( 1 มิลลิลิตรเอนไซม์ในสารละลายผงซักฟอก 4ml ) ผสมคืออุณหภูมิ 501c 1 H ( ซามาล et al . , 1990 ;bhosale et al . , 1995 ; Banerjee et al . , 1999 ; ซิงห์et al . , 2001 ) และกิจกรรมเอนไซม์โปรตีเอสที่เหลือคือมุ่งมั่น กิจกรรมของเอนไซม์ของการควบคุมตัวอย่าง ( โดยไม่ต้องผงซักฟอก ) คือถ่ายเป็น 100 %เสถียรภาพของ B . cereus ในการแสดงตนของโปรติเอสที่ดีที่สุดสามซักรีดผงซักฟอกคือท่องExcel Matic แอเรียลพลังงานขนาดกะทัดรัดและ henko คราบแชมป์ยังวัดหลังจากการบ่มเพาะของB . cereus โปรกับการซักผ้าผงซักฟอกและสำหรับช่วงเวลาที่ 401c 501c แตกต่างกันไม่เกิน 2 ชั่วโมงกิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอสจากภายนอกได้ เมื่อเทียบกับที่เหลือพบในทางปัจจุบันผงซักฟอกซักรีดหลังจากการบ่มที่ 401c และ501c ไม่เกิน 2 ชั่วโมง