Amplification of the V. harveyi hem

Amplification of the V. harveyi hemolysin gene (vhh)
PCR primers reported by Zhang and co-workers
(2001) were used to amplify the 1.3 kb open reading
frame of the hemolysin gene in the reference strain V.
harveyi IFO 15634 (Fig. 1). The identity of the PCRamplified
1.3 kb product was verified by direct sequencing
and BLAST homology search. The partial
nucleotide sequence displays 95% homology with the
reported Vibrio harveyi vhhA and vhhB genes deposited
in the GenBank database (data not shown).
Subsequently, other nested primers were designed in
this study in order to amplify internal hemolysin vhh
gene fragments in the V. harveyi reference strain.
Primer sequences used (Table 3) include a primer set
F2 and R2 designed in this study, generating a 216-bp
hemolysin gene fragment. PCR reactions using combinations
of the old and new primers and template DNA
from the reference V. harveyi strain, was observed to
yield amplified fragments with the following approximate
sizes: 308 bp and 1.2 kb (with primer sets, F1R2

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ขยายของ V. harveyi hemolysin ยีน (vhh)ไพรเมอร์ PCR รายงาน โดยเตียวและเพื่อนร่วมงาน(2001) ใช้ขยายฐาน 1.3 เปิดอ่านกรอบของยีน hemolysin ในสายพันธุ์อ้างอิง Vharveyi IFO 15634 (Fig. 1) ลักษณะเฉพาะของ PCRamplifiedผลิตภัณฑ์ 1.3 kb ถูกตรวจสอบ โดยลำดับโดยตรงและค้นหาระเบิด homology บางส่วน95% homology กับแสดงลำดับของนิวคลีโอไทด์รายงานผล harveyi vhhA และ vhhB ยีนฝากใน GenBank ฐานข้อมูล (ข้อมูลไม่แสดง)ไพรเมอร์อื่นซ้อนกันถูกออกแบบในภายหลังการศึกษานี้เพื่อขยาย vhh hemolysin ภายในบางส่วนของยีนใน V. harveyi พันธุ์อ้างอิงลำดับรองพื้นใช้พรม (ตาราง 3) รวมชุดรองพื้นF2 และ R2 ในการศึกษานี้ สร้าง 216-bpส่วนของยีน hemolysin ปฏิกิริยา PCR โดยใช้ชุดไพรเมอร์ที่เก่า และใหม่และแม่แบบดีเอ็นเออ้างอิง V. harveyi ต้องใช้ ถูกสังเกตไปผลผลิตบางส่วนของเอาต์กับต่อไปนี้โดยประมาณขนาด: bp และ 1.2 kb (กับชุดรองพื้น F1R2 308

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การขยายของ V. harveyi ยีน hemolysin (vhh)
ไพรเมอร์ PCR รายงานโดยวอชิงตันโพสต์และเพื่อนร่วมงาน
(2001) ถูกนำมาใช้เพื่อขยาย 1.3
กิโลเปิดอ่านกรอบของยีนhemolysin ในสายพันธุ์อ้างอิง V.
harveyi IFO 15634 (รูปที่ 1. ) เอกลักษณ์ของ PCRamplified
สินค้า 1.3
กิโลได้รับการตรวจสอบโดยลำดับโดยตรงและค้นหาระเบิดที่คล้ายคลึงกัน บางส่วนลำดับเบสแสดงที่คล้ายคลึงกัน 95% กับรายงานVibrio harveyi vhhA และยีน vhhB ฝากในฐานข้อมูลGenBank (ไม่ได้แสดงข้อมูล). ต่อจากนั้นไพรเมอร์ที่ซ้อนกันอื่น ๆ ที่ได้รับการออกแบบในการศึกษาครั้งนี้เพื่อที่จะขยายhemolysin vhh ภายในชิ้นส่วนของยีนในV . สายพันธุ์อ้างอิง harveyi. ลำดับไพรเมอร์ที่ใช้ (ตารางที่ 3) ไพรเมอร์รวมถึงการตั้งF2 และ R2 การออกแบบในการศึกษาครั้งนี้สร้าง 216-bp hemolysin ส่วนของยีน ปฏิกิริยา PCR โดยใช้ชุดของไพรเมอร์เก่าและใหม่และDNA แม่แบบจากการอ้างอิงV. harveyi สายพันธุ์ที่ได้รับการตั้งข้อสังเกตในการให้ผลผลิตชิ้นส่วนที่มีการขยายต่อไปนี้ประมาณขนาด: 308 bp และ 1.2 กิโล (มีชุดไพรเมอร์, F1R2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเพิ่มปริมาณของยีน ( V . harveyi ตรง vhh
PCR ไพรเมอร์ ) รายงานโดย Zhang และเพื่อนร่วมงาน
( 2001 ) ถูกใช้เพื่อขยาย 1.3 กิโล เปิดอ่าน
กรอบของยีนในสายพันธุ์อ้างอิงตรง V .
5 15634 IFO ( รูปที่ 1 ) เอกลักษณ์ของ pcramplified
1.3 กิโลสินค้าถูกตรวจสอบความถูกต้องโดยการโดยตรงและระเบิด
ตัวค้นหา ส่วน
หาลำดับเบส 95% ซึ่งแสดงด้วย
vhha Vibrio harveyi และรายงาน vhhb ยีนฝากไว้
ในขนาดฐานข้อมูล ( ข้อมูลไม่แสดง ) .
ต่อมาอื่นซ้อนกันโดยออกแบบ
การศึกษาเพื่อทำหน้าที่ขยายยีน vhh
ตรงภายในชิ้นส่วนใน V . harveyi สายพันธุ์อ้างอิง .
ลำดับ ( ตารางที่ 3 การใช้ไพรเมอร์ ) รวมถึงรองพื้นเซ็ต
F2 และ R2 ที่ออกแบบในการศึกษานี้สร้าง 216 bp
ตรงยีนจำเพาะ . ปฏิกิริยา PCR โดยใช้ชุดของทั้งเก่าและใหม่

ดีเอ็นเอแม่แบบจากไพรเมอร์และอ้างอิง V . harveyi สายพันธุ์ พบชิ้นส่วนของ
ผลผลิตที่มีดังต่อไปนี้โดยประมาณ
ขนาด : 308 BP และ 1.2 KB ( พร้อมชุด f1r2 เมอร์