2.8. Immobilization of microorganis

2.8. Immobilization of microorganisms in gel based on PVA modified by N-vinylpyrrolidone

To prepare PVA modified by N-vinylpyrrolidone, an aqueous solution of cerium ammonium nitrate (NH4)2Ce(NO3)6 and N-vinylpyrrolidone were added to an aqueous solution of PVA (molecular mass, 1.0·105–1.1·105 amu) at constant mixing at 40 °С for 3 h [10].

To produce the immobilized biocatalyst, 36 mg of microbial cells mixed at a ratio of 1:1 (1:1:1 for the association consisting of 3 microorganisms) was added to 200 μl of PVA gel modified by N-vinylpyrrolidone. A uniform distribution of cells in gel was achieved by shaking on a CM70 M centrifuge (ELMI, Latvia) for 5 min. The suspension produced was transferred onto a slide and dried for 24 h at room temperature. The thickness of the film produced was 15 μm; the specific density of immobilized cells, 5.8 mg/cm2. The immobilized biocatalyst was stored at 4 °C. To form the biosensor, a fragment of produced gel 4 mm in diameter was fixed by a nylon mesh on the surface of an oxygen electrode.

2.9. Determination of BOD5 by the standard dilution method

BOD5 was determined by the dilution method as indicated in [2]. Dissolved oxygen concentrations in a sample were measured before and after the incubation period and adjusted by the sample corresponding dilution factor. To ensure that all other conditions were equal, a very small amount of microorganism seed was added to each sample tested. This seed was generated by diluting organisms with buffered dilution water. The BOD test was carried out by diluting the sample with oxygen saturated dilution water, inoculating it with a fixed aliquot of seed, measuring the dissolved oxygen (DO) and then sealing the sample to prevent further oxygen dissolving in. The sample was kept at 20 °C in the dark to prevent photosynthesis (and thereby the addition of oxygen) for five days, and the dissolved oxygen was measured again. The difference between the final DO and initial DO was the required BOD value.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.8 การตรึงโปจุลินทรีย์ในเจลใช้ PVA โดย N-vinylpyrrolidoneเตรียมแก้ไข โดย N-vinylpyrrolidone การละลายของซีเรียมไนเตรตแอมโมเนีย (NH4) 2Ce PVA (NO3) 6 และ N vinylpyrrolidone ได้เพิ่มการละลายของ PVA (1.0·105 มวลโมเลกุล – แม่น้ำอามู 1.1·105) ที่ผสมคงที่ที่ 40 °Сสำหรับ 3 h [10]การผลิต biocatalyst เอนไซม์ 36 มิลลิกรัมของเซลล์จุลินทรีย์ที่ผสมในอัตราส่วน 1:1 (1:1:1 สำหรับความสัมพันธ์ที่ประกอบด้วยจุลินทรีย์ 3) ถูกเพิ่มเข้าไป μl 200 ของ PVA เจลโดย N-vinylpyrrolidone กระจายสม่ำเสมอของเซลล์ในเจสำเร็จ โดยเขย่าในเครื่องหมุนเหวี่ยง CM70 M (เอลมี ลัตเวีย) ใน 5 นาที ระงับการผลิตถูกโอนย้ายไปยังภาพนิ่ง และแห้งใน 24 ชมที่อุณหภูมิห้อง ความหนาของฟิล์มที่ผลิตได้ 15 μm ความหนาแน่นเฉพาะเซลล์เอนไซม์ 5.8 mg/cm2 Biocatalyst เอนไซม์ถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส เพื่อ biosensor ส่วนของเส้นผ่าศูนย์กลาง 4 มม.ผลิตเจถูกถาวร ด้วยตาข่ายไนล่อนบนผิวหน้าของอิเล็กโทรดเป็นออกซิเจน2.9 การกำหนด BOD5 โดยวิธีเจือจางมาตรฐานBOD5 ถูกกำหนด โดยวิธีเจือจางตามที่ระบุใน [2] ความเข้มข้นของออกซิเจนที่ละลายในตัวอย่างที่วัดก่อน และ หลังระยะฟักตัว และปรับตัวอย่างเจือจางที่สอดคล้องกัน เพื่อให้แน่ใจว่า เงื่อนไขอื่น ๆ ได้เท่ากัน มีเพิ่มจำนวนจุลินทรีย์เมล็ดขนาดเล็กมากแต่ละอย่างที่ทดสอบ เมล็ดนี้ถูกสร้างขึ้น โดยสิ่งมีชีวิตน้ำเจือจางถูกบัฟเฟอร์ diluting ทำการทดสอบ BOD ออก โดย diluting อย่างกับออกซิเจนอิ่มตัวน้ำเจือจาง inoculating ด้วยส่วนลงตัวแบบถาวรของเมล็ด การวัดปริมาณออกซิเจนละลาย (DO) แล้ว บรรจุตัวอย่างเพื่อป้องกันการยุบในออกซิเจน ตัวอย่างถูกเก็บไว้ที่ 20 ° C ในมืดเพื่อป้องกันการสังเคราะห์ด้วยแสง (และดังนั้นจึงเพิ่มออกซิเจน) สำหรับห้าวัน และปริมาณออกซิเจนละลายที่วัดอีกด้วย ความแตกต่างระหว่างการทำขั้นสุดท้ายและเริ่มต้นทำถูกต้องค่า BOD

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.8 การตรึงจุลินทรีย์ในเจลขึ้นอยู่กับ PVA แก้ไขโดย N-vinylpyrrolidone เพื่อเตรียมความพร้อม PVA แก้ไขโดย N-vinylpyrrolidone, สารละลายไนเตรตแอมโมเนียมซีเรียม (NH4) 2Ce (NO3) 6 และ N-vinylpyrrolidone ถูกเพิ่มเข้าไปในสารละลายของ PVA ( มวลโมเลกุล 1.0 105-1.1 ·· 105 Amu) ที่ผสมคงที่ 40 °Сเวลา 3 ชั่วโมง [10]. เพื่อผลิต biocatalyst ตรึง 36 mg ของเซลล์จุลินทรีย์ผสมในอัตราส่วน 1: 1 (1: 1: 1 สำหรับสมาคมที่ประกอบด้วยจุลินทรีย์ 3) ถูกบันทึกอยู่ใน 200 ไมโครลิตรเจล PVA แก้ไขโดย N-vinylpyrrolidone เครื่องแบบกระจายของเซลล์ในเจลก็ประสบความสำเร็จด้วยการเขย่าใน centrifuge CM70 M (Elmi ลัตเวีย) เป็นเวลา 5 นาที ระงับการผลิตที่ถูกย้ายไปยังภาพนิ่งและแห้งเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ความหนาของฟิล์มที่ผลิตได้ 15 ไมครอน; ความหนาแน่นที่เฉพาะเจาะจงของเซลล์ตรึง 5.8 mg / cm2 biocatalyst ตรึงถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส ในรูปแบบไบโอเซนเซอร์ที่ส่วนของเจลที่ผลิต 4 มมได้รับการแก้ไขโดยตาข่ายไนลอนบนพื้นผิวของขั้วออกซิเจน. 2.9 การกำหนด BOD5 โดยวิธีเจือจางมาตรฐานBOD5 ถูกกำหนดโดยวิธีการลดสัดส่วนตามที่ระบุใน [2] ความเข้มข้นของออกซิเจนที่ละลายในตัวอย่างถูกวัดก่อนและหลังระยะฟักตัวและปรับตัวอย่างสอดคล้องกับปัจจัยการเจือจาง เพื่อให้แน่ใจว่าเงื่อนไขอื่น ๆ ทุกคนเท่ากันเป็นจำนวนเงินที่น้อยมากของเมล็ดพันธุ์จุลินทรีย์ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในการทดสอบแต่ละตัวอย่าง เมล็ดพันธุ์นี้ถูกสร้างขึ้นโดยสิ่งมีชีวิตเจือจางด้วยน้ำเจือจางบัฟเฟอร์ การทดสอบที่ประชุมคณะกรรมการได้ดำเนินการโดยเจือจางตัวอย่างน้ำที่ทำให้เจือจางอิ่มตัวออกซิเจนฉีดวัคซีนด้วย aliquot คงที่ของเมล็ดวัดปริมาณออกซิเจนละลายน้ำ (DO) และจากนั้นปิดผนึกตัวอย่างเพื่อป้องกันการละลายออกซิเจนต่อไปใน. ตัวอย่างที่ได้รับการเก็บรักษาไว้ที่ 20 ° C ในที่มืดเพื่อป้องกันไม่ให้การสังเคราะห์แสง (และดังนั้นนอกเหนือจากออกซิเจน) เป็นเวลาห้าวันและออกซิเจนที่ละลายในน้ำวัดอีกครั้ง ความแตกต่างระหว่างขั้นสุดท้ายและ DO DO แรกคือค่าบีโอดีที่จำเป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.8 . ผลของจุลินทรีย์ในเจลตาม PVA แก้ไขโดย n-vinylpyrrolidone

เตรียมดัดแปลงโดย n-vinylpyrrolidone PVA , สารละลายซีเรียมไนเตรตแอมโมเนียม ( NH4 ) 2ce ( 3 ) และ ( 6 n-vinylpyrrolidone เพิ่มสารละลาย PVA ( มวลโมเลกุล , 1.0 และ 1.1 ด้วย Suite 105 105 อามุ ) คงที่ที่ 40 °Сผสม 3 h [ 10 ] .

ผลิตตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพตรึง ,36 มิลลิกรัมเซลล์จุลินทรีย์ผสมในอัตราส่วน 1 : 1 ( 1 : 1 : 1 กับ 3 สมาคม ประกอบด้วยจุลินทรีย์ ) คือเพิ่ม 200 μ l PVA เจลแก้ไขโดย n-vinylpyrrolidone . การแจกแจงของเซลล์ในเจลสําเร็จด้วยการเขย่าบนเครื่อง cm70 M ( elmi ลัตเวีย ) เป็นเวลา 5 นาที ระงับผลิตถูกย้ายไปยังภาพนิ่งและแห้งเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องความหนาของฟิล์มที่ผลิตได้ 15 μ M ; ความหนาแน่นเฉพาะของการตรึงเซลล์ , 5.8 mg / cm2 ต่อด้วยตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศา ในรูปแบบของไบโอเซนเซอร์ , ชิ้นส่วนผลิตเจล 4 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางคงที่ด้วยตาข่ายไนลอน บนพื้นผิวของขั้วออกซิเจน

2.9 . การวิเคราะห์โดยวิธี dilution factor มาตรฐาน

ถูกกำหนดโดยวิธี dilution factor ที่พบใน [ 2 ] ปริมาณออกซิเจนละลายน้ำในตัวอย่างถูกวัดก่อนและหลังระยะฟักตัวและปรับ โดยตัวอย่างที่เจือจางองค์ประกอบ เพื่อให้แน่ใจว่า เงื่อนไขอื่น ๆทั้งหมดเท่ากับ ปริมาณที่น้อยมากของเมล็ดพันธุ์จุลินทรีย์ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตัวอย่างทดสอบเมล็ดพันธุ์นี้ถูกสร้างโดยการเจือจางด้วยน้ำในกรดเจือจาง คณะกรรมการทดสอบโดยการเจือจางตัวอย่างที่มีออกซิเจนอิ่มตัวด้วยน้ำเจือจางณถาวรส่วนลงตัวของเมล็ด , วัดค่าออกซิเจนละลายน้ำ ( DO ) แล้วปิดผนึกตัวอย่างเพื่อป้องกันเพิ่มเติมออกซิเจนละลายใน .ตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ที่ 20 ° C ในที่มืดเพื่อป้องกันการสังเคราะห์แสง ( และจึงเพิ่มออกซิเจน ) เป็นเวลา 5 วัน และปริมาณออกซิเจนที่ละลายในน้ำได้อีก ความแตกต่างระหว่างสุดท้ายทำและเริ่มต้นทำคือบังคับใช้บีค่า