3. Amplification and sequencing PC

3. Amplification and sequencing PCR was performed using a thermal cycler (Model 9700; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA), and amplified products were sequenced using the BigDye Terminator Cycle Sequencing Ready Reaction Kit (Applied Biosystems) and an ABI Prism 3100 Genetic Analyzer (Applied Biosystems). Primer sequences used in this study were the same as those given in the Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI) guidelines: (i) sequences of the ITS region covering ITS1, 5.8S, and ITS2 were amplified using ITS-1/ITS-4 and ITS-5/ITS-4 primer sets; (ii) sequences of the D1/D2 region were amplified using NL-1/NL-4 primers; and (iii) β-tubulin gene sequences were amplified using Bt2a/T1 primers.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ขยายและลำดับ PCR ทำใช้ cycler ความร้อน (รุ่น 9700 ใช้ศาสตร์เชิงชีวภาพ เมืองฟอสเตอร์ CA สหรัฐอเมริกา), และขยายผลิตภัณฑ์ที่ถูกเรียงลำดับโดยใช้ BigDye ท้ายรอบจัดลำดับพร้อมปฏิกิริยาชุด (ใช้ศาสตร์เชิงชีวภาพ) และการ ABI ปริซึม 3100 พันธุกรรมวิเคราะห์ (ใช้ศาสตร์เชิงชีวภาพ) ลำดับสีที่ใช้ในการศึกษานี้ได้เหมือนกับที่ระบุในคำแนะนำคลินิกและห้องปฏิบัติการมาตรฐานสถาบัน (CLSI): (i) ลำดับของภูมิภาคครอบคลุม ITS1, 5.8S และ ITS2 ที่ขยายของ-1/ของ-4 และชุดรองพื้นของ-5/ของ-4 (๒) ลำดับของภูมิภาค D1/D2 ได้ขยายการใช้ไพรเมอร์ NL-1/NL-4 และลำดับยีนβ-tubulin (iii) ได้ขยายการใช้ไพรเมอร์ Bt2a/T1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. การขยายและลำดับ PCR ได้ดำเนินการโดยใช้ Cycler ความร้อน (รุ่น 9700; Applied Biosystems, ฟอสเตอร์ซิตี, CA, USA) และผลิตภัณฑ์ขยายมีลำดับขั้นตอนโดยใช้ปฏิกิริยา Kit BigDye Terminator วงจรลำดับพร้อม (Applied Biosystems) และ ABI Prism 3100 วิเคราะห์ทางพันธุกรรม (Applied Biosystems) ลำดับไพรเมอร์ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มีเช่นเดียวกับที่ได้รับในห้องปฏิบัติการทางคลินิกและสถาบันมาตรฐาน (CLSI) แนวทาง: (i) ลำดับของภูมิภาคท​​ี่ครอบคลุม ITS1, 5.8S และ ITS2 ถูกขยายโดยใช้ ITS-1 / ITS-4 และ-5 / ITS-4 ชุดไพรเมอร์; (ii) ลำดับของภูมิภาค D1 / D2 ถูกขยายโดยใช้ NL-1 / NL-4 ไพรเมอร์; และ (iii) β-tubulin ลำดับยีนถูกขยายโดยใช้ไพรเมอร์ Bt2a / T1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . เครื่องขยายเสียงและลำดับการใช้ความร้อนโดยรอบ ( รุ่น 9700 ; ประยุกต์ Biosystems ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) , และขยายผลิตภัณฑ์นี้ใช้ bigdye Terminator รอบลำดับชุดปฏิกิริยาพร้อม ( Applied Biosystems ) และ ABI ปริซึม 3100 พันธุกรรมวิเคราะห์ ( Applied Biosystems ) รองพื้นลำดับที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ เป็นเหมือนผู้ที่ได้รับในทางคลินิกและห้องปฏิบัติการสถาบันมาตรฐาน ( ต่างแนวทาง ) : ( ฉัน ) ลำดับของการ its1 5.8s เขตครอบคลุม , และ its2 กำลังขยายการใช้ its-1 / its-4 its-5 / its-4 และไพรเมอร์ชุด ; ( 2 ) ลําดับของ D1 / D2 ภูมิภาคมีอัตรา การใช้ nl-1 / nl-4 ไพรเมอร์ และ ( 3 ) ลำดับของยีนบีตา - ทิวบูลินเป็น bt2a / T1 ใช้รองพื้น