There are several existing experime

There are several existing experimental approaches and techniques
providing deeper insights into the processes occurring during the interaction
of cells with the biomaterials. In the past, mainly simple
cell counting, detachment and colorimetric assays were used to analyse
the interaction of cells with different materials [24]. These
methods do not provide the morphological information and do not
allow for a dynamic observation of the cell–surface interaction. In
the recent years, electrochemical methods and high-resolution microscopic
techniques were applied for the assessment of the biocompatibility
of materials [24]. However, the microscopic techniques
such as scanning force microscopy (SFM) [25], scanning electron
microscopy(SEM) [24], total internal reflection fluorescence microscopy
(TIRF) or confocal laser scanning microscopy (CLSM) [4]are
either not quantitative, require the labelling of the cells, or have
high illumination power, which could influence the sample. In this
work, we present the coherence-controlled holographic microscopy
(CCHM) as a promising technique which is able to evaluate the biocompatibility
of surfaces while overcoming the limitations of the
mentioned approaches.
CCHM belongs to the techniques that allow for label-free quantitative
phase imaging [26–28]. The imaging in CCHM is based on the
interference of the object and the reference light beams, which enables
to detect the phase delay of light transmitted through the specimen
[29]. When observing the live cells that are considered to be
weakly scattering and absorbing specimens, the phase carries considerably
more information about the specimen than the amplitude
of a transmitted light and is, therefore, of a great significance. Since
the images gained by the CCHM carry a quantitative information
about the imaged cells, valuable morphological parameters (features)
describing the cell behaviour can be obtained from the images. The parameters
are directly related to the cell mass [30–33]and, therefore,
they are crucial for the assessment of biocompatibility of the surfaces.
Moreover, the low illumination power of CCHM (0.2 μW/cm2
) is not
likely to influence the cell behaviour, hence does not affect the results
of the analysis.
In this work, the interaction of normal human dermal fibroblasts
with the CPA plasma polymers is investigated by CCHM. The morphological
cell parameters are obtained from the quantitative phase images
and further analysed in order to evaluate the cell–surface interaction.
For the first time, the time-dependent evaluation of the cell-amine plasma
layer interaction is monitored by the label-free quantitative microscopic
technique.
2. Experimental details
2.1. Preparation of samples
The CPA plasma polymers were prepared in a stainless steel parallel
plate reactor depicted schematically in Fig. 1. The bottom electrode,
420 mm in diameter, was capacitively coupled to a RF generator

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มีหลายวิธีการที่มีอยู่ในการทดลองและเทคนิคที่ให้ข้อมูลเชิงลึกลึกเข้าไปในกระบวนการที่เกิดขึ้นในระหว่างการทำงานร่วมกันของเซลล์ที่มีวัสดุ ในอดีตที่ผ่านมาส่วนใหญ่ง่ายนับเซลล์ออกและตรวจสีถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์การทำงานร่วมกันของเซลล์ที่มีวัสดุที่แตกต่าง[24] เหล่านี้วิธีการไม่ได้ให้ข้อมูลทางสัณฐานวิทยาและไม่อนุญาตให้มีการสังเกตแบบไดนามิกของการปฏิสัมพันธ์ของเซลล์ผิว ในปีที่ผ่านมาวิธีการทางเคมีไฟฟ้าและความละเอียดสูงด้วยกล้องจุลทรรศน์เทคนิคที่ถูกนำมาใช้สำหรับการประเมินกันได้ทางชีวภาพที่ของวัสดุ[24] อย่างไรก็ตามเทคนิคกล้องจุลทรรศน์เช่นกล้องจุลทรรศน์แรง (SFM) [25] สแกนอิเล็กตรอนกล้องจุลทรรศน์(SEM) [24] สะท้อนภายในรวมกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง(TIRF) หรือกล้องจุลทรรศน์เลเซอร์สแกน confocal (CLSM) [4] มีทั้งไม่เชิงปริมาณจำเป็นต้องมีการติดฉลากของเซลล์หรือมีอำนาจในการส่องสว่างสูงซึ่งอาจมีผลต่อตัวอย่าง ในการนี้การทำงานของเรานำเสนอการใช้กล้องจุลทรรศน์โฮโลแกรมการเชื่อมโยงกันควบคุม(CCHM) เป็นเทคนิคที่มีแนวโน้มที่จะสามารถประเมิน biocompatibility ของพื้นผิวในขณะที่การเอาชนะข้อ จำกัด ของวิธีการที่กล่าวถึง. CCHM เป็นเทคนิคที่ช่วยให้การฉลากฟรีปริมาณเฟสการถ่ายภาพ [26-28] การถ่ายภาพใน CCHM จะขึ้นอยู่กับการรบกวนของวัตถุและแสงอ้างอิงซึ่งจะช่วยให้การตรวจสอบขั้นตอนการล่าช้าของแสงที่ส่งผ่านชิ้นงาน[29] เมื่อสังเกตเซลล์สดที่มีการพิจารณาที่จะอ่อนกระจายและดูดซับตัวอย่างขั้นตอนการดำเนินการมากข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับชิ้นงานกว่าความกว้างของแสงที่ส่งและจึงเป็นความสำคัญอย่างยิ่ง เนื่องจากภาพที่ได้รับจากการดำเนินการ CCHM ข้อมูลเชิงปริมาณเกี่ยวกับการถ่ายภาพเซลล์พารามิเตอร์ทางสัณฐานวิทยาที่มีคุณค่า(คุณสมบัติ) อธิบายพฤติกรรมของเซลล์สามารถรับได้จากภาพ พารามิเตอร์ที่เกี่ยวข้องโดยตรงกับมวลเซลล์ [30-33] และดังนั้นพวกเขามีความสำคัญสำหรับการประเมินกันได้ทางชีวภาพของพื้นผิวที่. นอกจากนี้ยังมีการใช้พลังงานต่ำของไฟส่องสว่าง CCHM (0.2 μW / cm2) ไม่ได้มีแนวโน้มที่จะมีอิทธิพลต่อการพฤติกรรมของเซลล์จึงไม่ส่งผลกระทบต่อผลของการวิเคราะห์. ในงานนี้ทำงานร่วมกันของเซลล์ผิวหนังของมนุษย์ปกติกับโพลีเมอพลาสม่า CPA ถูกตรวจสอบโดย CCHM ก้านพารามิเตอร์มือถือที่ได้รับจากภาพขั้นตอนการเชิงปริมาณและการวิเคราะห์เพื่อประเมินการทำงานร่วมกันของเซลล์ผิว. เป็นครั้งแรกที่ขึ้นกับเวลาการประเมินผลของพลาสมาเซลล์เอมีปฏิสัมพันธ์ชั้นถูกตรวจสอบโดยปริมาณป้ายฟรีกล้องจุลทรรศน์เทคนิค. 2 รายละเอียดการทดลอง2.1 การเตรียมการของกลุ่มตัวอย่างโพลีเมอพลาสม่า CPA ได้จัดทำในสแตนเลสแบบขนานแผ่นเครื่องปฏิกรณ์ที่ปรากฎในรูปแผนผัง 1. ขั้วด้านล่าง420 มมเป็นคู่ capacitively การกำเนิดคลื่นความถี่วิทยุ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มีหลายวิธีและเทคนิคที่มีอยู่ทดลอง
ให้ข้อมูลเชิงลึกลึกเข้าไปในกระบวนการที่เกิดขึ้นในระหว่างการปฏิสัมพันธ์
เซลล์กับวัสดุชีวภาพ . ในอดีตส่วนใหญ่ง่าย
เซลล์นับ และพยายามปลด Colorimetric วิเคราะห์
ปฏิสัมพันธ์ของเซลล์ที่มีวัสดุที่แตกต่างกัน [ 24 ] เหล่านี้
วิธีการที่ไม่ได้ให้ข้อมูลลักษณะทางสัณฐานวิทยาและไม่ได้
ให้สังเกตแบบไดนามิกของเซลล์ผิว และปฏิสัมพันธ์ ใน
ปีล่าสุด และวิธีการทางเคมีไฟฟ้าเทคนิคกล้องจุลทรรศน์ความละเอียดสูงที่ใช้สำหรับการประเมิน

กันได้ทางชีวภาพของวัสดุ [ 24 ] อย่างไรก็ตาม เทคนิคจุลทรรศน์
เช่นสแกนกล้องจุลทรรศน์แรง ( sfm ) [ 25 ] , กล้องจุลทรรศน์อิเลคตรอน