Vero cells were harvested during ex

Vero cells were harvested during exponential growth, cultured in 96-well plates (density= 12×104
cells/mL)
and incubated at 37ºC in 5 % CO2 incubator for 24 hr. Then, 6×105
parasites/mL of T.gondii parasite were
added to each well (parasite: cell ratio = 5:1, final volume 200 μL) [3]. Six hours after inoculation, the
cultures were washed twice with Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) without Fetal bovine serum
(FBS) to remove any non-adherent parasites. After 18 hr incubation, DMEM medium was added to each well
along with serial concentrations of essential oil. After 24 hr of treatment, anti-T.gondii activity of nutmeg
essential oil was examined using the MTT assay [12] with some modifications. Clindamycin served as the
positive control. The assay was conducted in 96-well plates and assayed using a microplate reader using a
wavelength of 540 nm. All of the test compounds were assayed in triplicate at each concentration. All data
points represent the mean of three independent experiments. The percentage of growth inhibition (GI) was
calculated manually using the formula:

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์ Vero ถูกเก็บเกี่ยวในระหว่างเรขา อ่างในแผ่น 96-ดี (ความหนาแน่น = 12 × 104 เซลล์/มล.)และ incubated ที่ 37ºC ใน 5% CO2 incubator สำหรับ 24 ชั่วโมง แล้ว 6 × 105 ปรสิต/mL ของ T.gondii ปรสิตได้เพิ่มไปด้วยละ (ปรสิต: อัตราส่วนเซลล์ = 5:1 สุดท้ายปริมาณ 200 μL) [3] ประมาณ 6 ชั่วโมงหลังจาก inoculation การวัฒนธรรมถูกล้างสองกับของดุลเบกโกแก้ไขอินทรีกลาง (DMEM) ไม่ มีเซรั่มวัวและทารกในครรภ์(FBS) เอาปรสิตไม่ adherent ใด ๆ หลังจากบ่ม 18 ชั่วโมง DMEM กลางเพิ่มให้ด้วยละพร้อมชุดให้ความเข้มข้นของน้ำมันหอมระเหย หลังจาก 24 ชั่วโมงของการรักษา T.gondii ต่อต้านกิจกรรมของจันทน์เทศน้ำมันหอมระเหยถูกตรวจสอบด้วย MTT assay [12] ปรับเปลี่ยนบางอย่าง Clindamycin ทำหน้าที่เป็นควบคุมค่าบวก วิเคราะห์ได้ดำเนินการใน 96 ดีแผ่น และ assayed ใช้อ่าน microplate ที่ใช้เป็นความยาวคลื่นของ 540 nm สารทดสอบทั้งหมดมี assayed ใน triplicate ที่แต่ละความเข้มข้น ข้อมูลทั้งหมดจุดแสดงถึงค่าเฉลี่ยของการทดลองอิสระ 3 มีเปอร์เซ็นต์การยับยั้งการเจริญเติบโต (GI)ด้วยตนเองโดยใช้สูตรคำนวณ:

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์เวโรเก็บเกี่ยวในช่วงการเจริญเติบโต, เพาะเลี้ยงในแผ่น 96 หลุม (ความหนาแน่น = 12 × 104
เซลล์ / มิลลิลิตร)
และบ่มที่37ºCในศูนย์บ่มเพาะ CO2 5% เป็นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้น 6 × 105
ปรสิต / มิลลิลิตรปรสิต T.gondii
ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดี(ปรสิตอัตราส่วนมือถือ = 5: 1, เล่มสุดท้าย 200 ไมโครลิตร) [3] หกชั่วโมงหลังจากการฉีดวัคซีนที่วัฒนธรรมถูกล้างครั้งที่สองที่มีการปรับเปลี่ยน Dulbecco ของอีเกิลกลาง (DMEM) โดยในซีรั่มของทารกในครรภ์วัว (FBS) เพื่อเอาปรสิตใด ๆ ที่ไม่ใช่สาวก หลังจาก 18 ชั่วโมงบ่มกลาง DMEM ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละดีพร้อมกับความเข้มข้นของอนุกรมของน้ำมันหอมระเหย หลังจาก 24 ชั่วโมงของการรักษาและการจัดกิจกรรมต่อต้าน T.gondii ของลูกจันทน์เทศน้ำมันหอมระเหยที่ได้รับการตรวจสอบโดยใช้การทดสอบMTT [12] มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง clindamycin ทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุมบวก การทดสอบที่ได้รับการดำเนินการในแผ่น 96 หลุมและ assayed ใช้อ่าน microplate ใช้ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตรของ ทั้งหมดของสารทดสอบที่ถูก assayed เพิ่มขึ้นสามเท่าในแต่ละที่มีความเข้มข้น ข้อมูลทั้งหมดจุดที่เป็นตัวแทนของค่าเฉลี่ยของสามทดลองที่เป็นอิสระ ร้อยละของการยับยั้งการเจริญ (GI) ได้รับการคำนวณด้วยตนเองโดยใช้สูตร:

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เวโรเซลล์ถูกเก็บเกี่ยวในช่วงการเจริญเติบโตที่เพาะเลี้ยงในจาน , 96 ก็ ( ความหนาแน่น = 12 × 104

เซลล์ / มิลลิลิตร ) บ่มที่ 37 องศาเซลเซียส ในº 5% CO2 Incubator ตลอด 24 ชั่วโมง จากนั้น 6 × 105
ปรสิต / ml มีพยาธิ t.gondii
เพิ่มกัน ( ปรสิตเซลล์ Ratio = 5 : 1 สุดท้าย ปริมาณ 200 μ L ) [ 3 ] หกชั่วโมงหลังจากที่ได้รับ
cultures สำหรับ washed twice with dulbecco 's ฮอตเฉลย medium ( dmem ) without fetal เสร็จ
( เฉิง fbs ) to remove parasites any adherent non . หลังจาก 18 4 ชม. dmem ขนาดกลางเพิ่มกัน
พร้อมกับต่อเนื่อง ความเข้มข้นของน้ำมันหอมระเหย หลังจาก 24 ชั่วโมงของการรักษา anti-t.gondii กิจกรรมของลูกจันทน์เทศ
น้ำมันหอมระเหยเพื่อใช้ MTT assay [ 12 ] มีการปรับเปลี่ยนที่มีหน้าที่เป็น
ควบคุมบวก ( ดำเนินการใน 96 ดีแผ่นและปริมาณการใช้เครื่องอ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยการใช้
ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตร สารทั้งหมดทดสอบเอนไซม์ทั้งสามใบในแต่ละความเข้มข้น จุดข้อมูล
ทั้งหมดแสดงเฉลี่ยสามการทดลองที่เป็นอิสระ ร้อยละของการยับยั้งการเจริญเติบโต ( GI )
คำนวณด้วยตนเองโดยใช้สูตร :