To the authors’ knowledge, a compar

To the authors’ knowledge, a comparative assessment of DNAbased
quantification methods in the field of food allergen analysis
under pre-defined experimental framework conditions was performed
for the first time. Three quantification methods, the matrix-
adapted quantification, the quantification using an internal
standard material and the quantification by modified standard
addition were assessed using uniform performance criteria.
The matrix-adapted method shows a systematic divergence,
when the model-matrix differs from the sample matrix. The trueness
of the quantification results depends on the similarity of the
matrices. In principle, the corresponding model-matrix for each
examined sample or at least for each type of food (for example
boiled sausages) would be needed. This is reflected in the extreme
underestimation of the sesame content in boiled sausages and
muffin dough using breadcrumbs as model-matrix.
In contrast, the quantification method using an internal standard
material does not depend on a model-matrix. However, the
coefficient value needs to be determined for each batch of internal
standard material. In addition, high standard deviations of the
determined sesame contents were observed. The quantitative results
are calculated from initial target sequence copy numbers
determined using two independent real-time PCR systems. Therefore,
the variability of the copy numbers of both real-time PCR systems
contributes to the variation of the quantitative results.
Only the analyte of interest is needed for the quantification
using the modified standard addition, therefore, the quantitative
results do not depend on a model-matrix. Recoveries in the recommended
range of 70–120% were observed during the validation of
the method. The addition of the analyte to individual aliquots of
the sample material requires, however, at least four PCR analyses
per sample. Since only a DNA sequence specific for the analyte
needs to be detected, existing real-time PCR methods can be used
for the quantification of the allergen content without
modifications.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความรู้ของผู้เขียน มีการประเมินเปรียบเทียบของ DNAbasedวิธีนับในด้านการวิเคราะห์ allergen อาหารภายใต้เงื่อนไขที่กำหนดกรอบการทดลองทำเป็นครั้งแรก สามนับวิธี เมทริกซ์-ดัดแปลงนับ การนับที่ใช้ภายในวัสดุมาตรฐานและนับ โดยมาตรฐานที่ปรับเปลี่ยนนอกจากนี้ได้ประเมินโดยใช้เกณฑ์ประสิทธิภาพสม่ำเสมอวิธีดัดแปลงเมตริกซ์แสดง divergence ระบบเมื่อเมทริกซ์รูปแบบแตกต่างจากเมตริกซ์ตัวอย่าง Trueness ที่ของการนับ ผลลัพธ์ขึ้นอยู่กับความคล้ายคลึงกันของการเมทริกซ์ หลัก รูปแบบเมตริกซ์ที่สอดคล้องกันสำหรับแต่ละตรวจสอบตัวอย่าง หรือน้อย สำหรับแต่ละชนิดของอาหาร (เช่นจะต้องต้มไส้กรอก) นี้สะท้อนออกมาในสุดunderestimation งาเนื้อหาในต้มไส้กรอก และแป้ง muffin ที่ใช้ breadcrumbs เป็นรูปเมตริกซ์ในความแตกต่าง วิธีการนับที่ใช้เป็นมาตรฐานภายในวัสดุขึ้นอยู่กับรูปแบบเมทริกซ์ อย่างไรก็ตาม การค่าสัมประสิทธิ์ต้องถูกกำหนดสำหรับแต่ละชุดภายในวัสดุมาตรฐาน นอกจากนี้ ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสูงของการนายสุภัคงากำหนดเนื้อหา ผลลัพธ์เชิงปริมาณคำนวณจากเป้าหมายเริ่มต้นลำดับเลขสำเนากำหนดใช้สองอิสระแบบ real-time PCR ระบบ ดังนั้นความแปรผันของจำนวนสำเนาระบบ PCR ทั้งแบบเรียลไทม์สนับสนุนการเปลี่ยนแปลงของผลลัพธ์เชิงปริมาณจำเป็นสำหรับการนับเฉพาะ analyte น่าสนใจใช้การปรับมาตรฐานเพิ่ม ดังนั้น การเชิงปริมาณผลลัพธ์ขึ้นอยู่กับรูปแบบเมทริกซ์ Recoveries ในการแนะนำช่วง 70 – 120% ได้สังเกตในระหว่างการตรวจสอบของวิธีการ การเพิ่มของ analyte จะละ aliquots ของวัสดุตัวอย่างต้องการ อย่างไรก็ตาม วิเคราะห์ PCR น้อยสี่ต่อตัวอย่าง ตั้งแต่เท่า DNA ลำดับเฉพาะสำหรับการ analyteต้องสามารถตรวจพบ สามารถใช้วิธี PCR แบบเรียลไทม์ที่มีอยู่การนับของ allergen เนื้อหาโดยไม่ปรับเปลี่ยน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อความรู้ของผู้เขียน ', การประเมินผลการเปรียบเทียบ DNAbased
วิธีการเชิงปริมาณในด้านการวิเคราะห์สารก่อภูมิแพ้อาหาร
ภายใต้การกำหนดไว้ล่วงหน้ากรอบเงื่อนไขการทดลองที่ได้ดำเนินการ
เป็นครั้งแรก สามวิธีปริมาณ, Matrix-
ดัดแปลงปริมาณ, ปริมาณการใช้ภายใน
วัสดุมาตรฐานและปริมาณโดยมาตรฐานการแก้ไข
นอกจากนี้ได้รับการประเมินโดยใช้เกณฑ์ประสิทธิภาพเครื่องแบบ.
วิธีเมทริกซ์ปรับตัวแสดงให้เห็นถึงความแตกต่างอย่างเป็นระบบ
เมื่อรูปแบบเมทริกซ์ที่แตกต่างจากตัวอย่าง มดลูก สวยติดทนยาวนาน
ของผลปริมาณขึ้นอยู่กับความคล้ายคลึงกันของ
การฝึกอบรม ในหลักการรูปแบบเมทริกซ์ที่สอดคล้องสำหรับแต่ละ
การตรวจสอบตัวอย่างหรืออย่างน้อยก็สำหรับประเภทของอาหารแต่ละ (เช่น
ไส้กรอกต้ม) จะต้อง นี่คือภาพสะท้อนในมาก
เบาของเนื้อหางาในไส้กรอกต้มและ
แป้งมัฟฟินโดยใช้เศษขนมปังเป็นรูปแบบเมทริกซ์.
ในทางตรงกันข้ามวิธีวิเคราะห์ที่ใช้มาตรฐานภายใน
วัสดุที่ไม่ขึ้นอยู่กับรูปแบบเมทริกซ์ อย่างไรก็ตาม
ค่าสัมประสิทธิ์ความต้องการที่จะได้รับการพิจารณาสำหรับชุดของภายในแต่ละ
วัสดุที่ได้มาตรฐาน นอกจากนี้ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสูงของ
เนื้อหางากำหนดถูกตั้งข้อสังเกต ผลลัพธ์เชิงปริมาณที่
คำนวณจากตัวเลขสำเนาเป้าหมายลำดับเริ่มต้น
กำหนดใช้สองอิสระแบบ real-time PCR ระบบ ดังนั้น
ความแปรปรวนของตัวเลขสำเนาของทั้งสองระบบ real-time PCR
ก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของผลเชิงปริมาณ.
เพียงวิเคราะห์ที่น่าสนใจเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับปริมาณ
การใช้นอกจากนี้มาตรฐานการแก้ไขดังนั้นปริมาณ
ผลไม่ขึ้นอยู่กับ รูปแบบเมทริกซ์ กลับคืนในแนะนำ
ช่วงของ 70-120% พบในระหว่างการตรวจสอบของ
วิธีการ นอกเหนือจากการวิเคราะห์เพื่อ aliquots บุคคลของ
วัสดุตัวอย่างต้อง แต่อย่างน้อยสี่ PCR วิเคราะห์
ต่อตัวอย่าง ตั้งแต่เพียงลำดับดีเอ็นเอที่เฉพาะเจาะจงสำหรับวิเคราะห์
จะต้องมีการตรวจพบที่มีอยู่ในเวลาจริงวิธี PCR สามารถนำมาใช้
สำหรับปริมาณของเนื้อหาสารก่อภูมิแพ้ได้โดยไม่ต้อง
ปรับเปลี่ยน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อความรู้ของผู้เขียน , การประเมินเปรียบเทียบ dnabased
ปริมาณวิธีการในฟิลด์ของสารก่อภูมิแพ้ในอาหาร ภายใต้กรอบที่กำหนดไว้ล่วงหน้าเงื่อนไขการทดลองการวิเคราะห์

ได้เป็นครั้งแรก 3 ปริมาณวิธีการเมทริกซ์ -
ดัดแปลงปริมาณ , ปริมาณการใช้วัสดุและปริมาณมาตรฐานภายใน

โดยแก้ไขมาตรฐานนอกจากนี้มีการประเมินโดยใช้เกณฑ์ประสิทธิภาพที่สม่ำเสมอ
เมทริกซ์ดัดแปลงวิธีแสดงความแตกต่างระบบ
เมื่อเมตริกซ์แตกต่างจากตัวอย่างเมตริกซ์ trueness
ของปริมาณผลขึ้นอยู่กับความคล้ายคลึงกันของ
เมทริกซ์ ในหลักการ , แมทริกซ์ที่สอดคล้องกันสำหรับแต่ละ
ตรวจสอบตัวอย่างหรืออย่างน้อยสำหรับแต่ละประเภทของอาหาร ( ตัวอย่างเช่น
ไส้กรอกลวก ) จะเป็นที่ต้องการ นี้สะท้อนให้เห็นในการการประเมินค่าต่ำไปสุดโต่ง
ของงาเนื้อหาต้มไส้กรอก
แป้งมัฟฟินใช้ breadcrumb เป็นเมตริกซ์ .
ส่วนวิธีการปริมาณการใช้วัสดุมาตรฐาน
ภายในไม่ขึ้นอยู่กับเมทริกซ์แบบ อย่างไรก็ตาม
ค่าสัมประสิทธิ์ต้องกำหนดสำหรับแต่ละชุดของวัสดุมาตรฐานภายใน

นอกจากนี้สูงส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของงา
กำหนดเนื้อหาพบว่า ปริมาณ
คำนวณจากเริ่มต้นลำดับเป้าหมายคัดลอกตัวเลข
กำหนดใช้สองระบบอิสระ PCR แบบเรียลไทม์ ดังนั้น
การแปรผันของคัดลอกตัวเลขทั้งสองแบบเรียลไทม์ซึ่งก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของระบบ

ผลเชิงปริมาณแต่ที่น่าสนใจคือ ครูจำเป็นสำหรับปริมาณการแก้ไขมาตรฐาน
นอกจากนี้ ดังนั้น ปริมาณ
ไม่ขึ้นอยู่กับเมทริกซ์แบบ แนะนำตลาดในช่วง 70 - 120
% ที่พบในระหว่างการตรวจสอบ
วิธี เพิ่มของครูแต่ละคนเฉยๆของ
วัสดุตัวอย่าง ต้องการ แต่อย่างน้อยสี่วิธีวิเคราะห์
/ ตัวอย่างเนื่องจากเฉพาะดีเอ็นเอลำดับเฉพาะสําหรับครู
ต้องตรวจแบบ PCR วิธีที่มีอยู่สามารถใช้สำหรับปริมาณของสารก่อภูมิแพ้

เนื้อหา โดยไม่มีการปรับเปลี่ยน