Males were selected firstly according to their tractability and response of sperm collection. Following a training period, assessment of semen quality was done to selecting the best sperm donors. For a two-month interval, semen was collected twice a week by dorso-abdominal massage [19]. During the sperm freezing period, in vitro assessment of semen quality was done before freezing and after thawing (fresh and frozen/thawed semen). Following sperm volume measurement, motility was determined by subjective scoring (0–5) by a well-trained person, while sperm concentration was estimated with a spectrophotometer (Accucell IMV Technologies, L’Aigle, France). Sperm morphology normal, abnormal and live/dead cell ratio was examined with aniline blue-eosin staining. This procedure is based on eosin (Certistain, 115935 Eosin Y, Merck Ltd., Budapest, Hungary) that is excluded by live, intact cell membranes but dead sperm membranes permit the eosin to stain the sperm. The aniline blue (415049 Sigma-Aldrich Ltd., Budapest, Hungary) provides a clear blue background in the smear to enhance the contrast of the white, unstained “live” sperm or the pinkish, stained “dead” sperm. Slides were evaluated microscopically (Zeiss, Axioscope; Carl Zeiss Microscopy GmbH., Göttingen, Germany) using an oil immersion objective and 1200× magnification. A total of 200 spermatozoa were assessed per slide.
เพศผู้ได้รับการคัดเลือกประการแรกตามที่สามารถจัดการได้ง่ายและการตอบสนองของการเก็บสเปิร์มของพวกเขา ตามระยะเวลาการฝึกอบรมการประเมินคุณภาพน้ำอสุจิที่ได้กระทำการเลือกที่ดีที่สุดสำหรับผู้บริจาคสเปิร์ม สำหรับช่วงเวลาสองเดือนน้ำอสุจิที่ถูกเก็บรวบรวมสัปดาห์ละสองครั้งโดยนวด dorso ช่องท้อง [19] ในช่วงระยะเวลาการแช่แข็งอสุจิ, การประเมินในหลอดทดลองที่มีคุณภาพน้ำอสุจิที่ได้กระทำก่อนที่จะแช่แข็งและหลังการละลาย (สดและแช่แข็ง / น้ำอสุจิละลาย) ต่อไปนี้การวัดปริมาณอสุจิ, การเคลื่อนที่ถูกกำหนดโดยการให้คะแนนอัตนัย (0-5) โดยบุคคลที่ผ่านการฝึกอบรมในขณะที่ความเข้มข้นของสเปิร์มเป็นที่คาดกันกับสเปก (Accucell IMV Technologies, L'Aigle, ฝรั่งเศส) สเปิร์มสัณฐานปกติผิดปกติและอัตราส่วนเซลล์สด / ตายแล้วถูกตรวจสอบด้วยสวรรค์สีฟ้า Eosin การย้อมสี ขั้นตอนนี้จะขึ้นอยู่กับ Eosin (Certistain, 115,935 Eosin Y, เมอร์ค จำกัด , บูดาเปสต์, ฮังการี) ที่ได้รับการยกเว้นโดยสด, เยื่อหุ้มเซลล์เยื่อเหมือนเดิม แต่ตัวอสุจิที่ตายอนุญาต Eosin เพื่อคราบอสุจิ ฟ้าสวรรค์ (415,049 Sigma-Aldrich จำกัด , บูดาเปสต์, ฮังการี) ให้พื้นหลังสีฟ้าใสใน smear เพื่อเพิ่มความคมชัดของสีขาวไม่มีรอยเปื้อนสเปิร์ม "สด" หรือสีชมพูที่ย้อมสีสเปิร์ม "ตาย" ได้รับการประเมินสไลด์กล้องจุลทรรศน์ (Zeiss, Axioscope; Carl Zeiss กล้องจุลทรรศน์ GmbH, Göttingenเยอรมนี.) โดยใช้วัตถุประสงค์แช่น้ำมันและ 1200 ×ขยาย รวมเป็น 200 ตัวอสุจิที่ถูกประเมินต่อสไลด์
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
ผู้ถูกเลือกคือตามทแรคทะบีลและการตอบสนองของอสุจิ คอลเลกชัน ต่อไปนี้ระยะเวลาการฝึกอบรม การประเมินคุณภาพน้ำเชื้อได้เลือกผู้บริจาคสเปิร์มที่ดีที่สุด สำหรับช่วงเวลาสองเดือน น้ำอสุจิ เก็บอาทิตย์ละ 2 ครั้ง โดย dorso การนวดหน้าท้อง [ 19 ] อสุจิแช่แข็งในช่วงระยะเวลาในการประเมินต่อคุณภาพน้ำเชื้อถูกทำมาก่อนการแช่แข็งและหลังการละลาย ( สดและแช่แข็ง / ละลายน้ำเชื้อ ) ตามการวัดปริมาณอสุจิ , การเคลื่อนที่ถูกกำหนดโดยการให้คะแนนอัตนัย ( 0 – 5 ) โดยบุคคลต่างๆ ในขณะที่ความเข้มข้นของอสุจิ คือ ประมาณกับ Spectrophotometer ( accucell IMV เทคโนโลยี l"aigle , ฝรั่งเศส ) รูปร่างตัวอสุจิปกติ ผิดปกติ และเซลล์ที่ตายอยู่ / อัตราส่วนได้ตรวจสอบกับทางสีฟ้า eosin คราบ . ขั้นตอนนี้จะขึ้นอยู่กับโอซิน ( certistain 115935 eosin y , เมอร์ค , จำกัด , บูดาเปสต์ , ฮังการี ) ที่ถูกแยกออกโดยอาศัยเยื่อหุ้มเซลล์อสุจิตายเหมือนเดิม แต่สามารถอนุญาตให้ eosin คราบอสุจิ ที่เมอร์เซเดสเบนซ์ ( 415049 ซิกม่า Aldrich จำกัด , บูดาเปสต์ , ฮังการี ) มีสีฟ้าใสพื้นหลังในละเลงเพื่อเพิ่มความคมชัดของขาวไม่มีรอยเปื้อน " สด " สเปิร์ม หรือสีชมพู เปื้อน " ตาย " สเปิร์ม ภาพนิ่งจำนวนกล้องจุลทรรศน์ ( Zeiss axioscope ; , Carl Zeiss กล้องจุลทรรศน์ GmbH , G ö ttingen , เยอรมนี ) โดยใช้วัตถุประสงค์น้ำมันแช่และ 1200 ×ขยาย . รวม 200 ครั้ง ต่อท่อสไลด์
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)