Live/dead assayCalcein-AM (C1430; I

Live/dead assay
Calcein-AM (C1430; Invitrogen) and propidium
iodide (P4864; Sigma Aldrich) were used to determine the
percentages of viable and dead cells. After the treatments
with melatonin, 106 P19 cells were harvested, washed,
resuspended in HBSS/Ca and loaded with 0.1 μM calcein-
AM and 8 μM propidium iodide for 20 minutes at room
temperature. Fluorescence was measured by FACS
(Becton Dickinson FACScalibur) with 488 nm excitation
wavelength. The simultaneous measurement of Calcein/
propidium iodide fluorescence was performed using
530/30 nm bandpass filter for Calcein and a 610/20 nm
bandpass filter for propidium iodide red fluorescence.
Statistical analyses
Data are mean values ± SEM and multiple comparisons
were carried out using ANOVA followed by the Bonferroni
post hoc test. Significance was accepted with p < 0.05.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์สด/ตายCalcein-AM (C1430 Invitrogen) และ propidiumไอโอไดด์ (P4864 ซิก Aldrich) ถูกใช้เพื่อกำหนดเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่ตายแล้ว และทำงานได้ หลังจากการรักษามีเมลาโทนิน 106 เซลล์ P19 ถูกเก็บเกี่ยว เครื่องซักผ้าโหลดและ 0.1 μM calcein และ resuspended ใน HBSS/Caน. และ 8 μM propidium ไอโอไดด์ 20 นาทีห้องอุณหภูมิ Fluorescence ถูกวัด ด้วย FACS(Becton สัน FACScalibur) กับ 488 nm ในการกระตุ้นความยาวคลื่น วัด Calcein พร้อมกัน /fluorescence propidium ไอโอไดด์ถูกดำเนินการโดยใช้530/30 nm bandpass กรอง Calcein และ 610/20 nmbandpass กรองสำหรับ fluorescence propidium ไอโอไดด์สีแดงวิเคราะห์ทางสถิติข้อมูลคือ ค่าเฉลี่ย± SEM และเปรียบเทียบหลายได้ดำเนินการโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนตาม Bonferroniการทดสอบ post hoc ความสำคัญกับ p < 0.05 ยอมรับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สด / ทดสอบตาย
Calcein-AM (C1430; Invitrogen) และ propidium
ไอโอไดด์ (P4864; ซิกดิช) ถูกนำมาใช้ในการกำหนด
อัตราร้อยละของเซลล์ทำงานได้และตาย หลังจากการรักษา
ด้วยเมลาโทนิ 106 P19 เซลล์เก็บเกี่ยวล้าง
resuspended ใน HBSS / Ca และเต็มไปด้วย 0.1 ไมครอน calcein-
AM และ 8 ไมครอนไอโอไดด์ propidium 20 นาทีที่ห้อง
อุณหภูมิ เรืองแสงโดยวัดจากมาซึ่ง
(Becton Dickinson FACSCalibur) ที่มีการกระตุ้น 488 นาโนเมตร
ความยาวคลื่น วัดพร้อมกันของ Calcein /
propidium เรืองแสงไอโอไดด์ได้รับการดำเนินการโดยใช้
ตัวกรอง 530/30 bandpass นาโนเมตรสำหรับ Calcein และ 610/20 นาโนเมตร
กรอง bandpass สำหรับ propidium ไอโอไดด์เรืองแสงสีแดง.
การวิเคราะห์ทางสถิติ
ข้อมูลจะถูกค่าเฉลี่ย± SEM และการเปรียบเทียบหลาย
ได้รับการดำเนินการโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน ตามด้วย Bonferroni
โพสต์เฉพาะกิจการทดสอบ อย่างมีนัยสำคัญได้รับการยอมรับกับ p <0.05

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สด / ตาย (
แคลซิอิน ( เป็น c1430 ; Invitrogen ) และ propidium
ไอโอไดด์ ( p4864 ; ซิกม่า Aldrich ) ถูกใช้เพื่อตรวจสอบ
เปอร์เซ็นต์ของการวางอนาคต และเซลล์ที่ตายแล้ว หลังจากการรักษา
ด้วยเมลาโทนิน , 106 p19 เซลล์เก็บล้าง ,
resuspended ใน hbss / CA และโหลดด้วย 0.1 M μแคลซิอิน -
และ 8 μ M propidium ไอโอไดด์สำหรับ 20 นาทีที่ห้อง
อุณหภูมิ โดยวัดจาก facs
( เบคตอนดิกคินสัน facscalibur ) 488 นาโนเมตรและความยาวคลื่น
. การวัดพร้อมกันของแคลซิอิน /
propidium ไอโอไดด์เรืองแสงได้ดําเนินการโดยใช้
530 / 30 nm ตัวกรองสำหรับแคลซิอินและ 610 / 20 nm
ตัวกรองสำหรับ propidium ไอโอไดด์เรืองแสงสีแดง

ข้อมูลการวิเคราะห์ทางสถิติและการเปรียบเทียบค่าเฉลี่ยด้วย±
หลาย โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) ตามด้วยบอนเฟอร์โรนี
Post Hoc Test ความหมายคือยอมรับกับ P < 0.05