Size exclusion chromatography (SEC)

Size exclusion chromatography (SEC) is a non-invasive technique that provides
information on the molecular size of proteins and polymers. SEC requires a column
with a uniform porous material with a defined pore size and a mobile phase
appropriate to the solute. Mobile phase components, such as salts, can affect SEC
separations. The purpose of adding salt to the eluent is to minimize secondary
interactions of the sample components with the resin. The presence or absence of
sodium chloride (NaCl) in aqueous eluents influences the elution volume of proteins
by altering their hydrodynamic radius as a function of salt strength.
It is important to note that relatively minor changes in protein structure may affect
protein solubility and encourage secondary hydrophobic interactions causing
similarly sized proteins to elute at different times. In such cases, it is important to
modify the mobile phase composition to regain a separation based on molecular
size alone.
The retention behavior of three globular proteins (γ-globulins, bovine serum albumin
and ovalbumin) was investigated using a Agilent ProSEC 300S column in low ionic
strength mobile phases of varying NaCl concentration. The dependence of ‘nonideal’
protein-protein and protein-matrix interactions on NaCl was determined by
comparison of UV responses at each salt concentration.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขนาดโคยกเว้น (ก.ล.ต. )
เป็นเทคนิคที่ไม่รุกรานที่ให้ข้อมูลเกี่ยวกับขนาดโมเลกุลของโปรตีนและโพลีเมอ สำนักงานคณะกรรมการ ก.ล.ต. ต้องคอลัมน์ด้วยวัสดุที่มีรูพรุนเครื่องแบบที่มีขนาดรูขุมขนกำหนดและขั้นตอนการมือถือที่เหมาะสมกับตัวถูกละลาย ส่วนประกอบเฟสเคลื่อนที่เช่นเกลือจะมีผลต่อคณะกรรมการ ก.ล.ต. แยก วัตถุประสงค์ของการเพิ่มเกลือเพื่อชะคือการลดรองปฏิสัมพันธ์ขององค์ประกอบตัวอย่างด้วยเรซิน การปรากฏตัวหรือไม่มีโซเดียมคลอไรด์ (NaCl) ในตัวชะน้ำที่มีอิทธิพลต่อปริมาณการชะของโปรตีนโดยการเปลี่ยนรัศมีอุทกพลศาสตร์ของพวกเขาเป็นฟังก์ชั่นของความแข็งแรงเกลือ. มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องทราบว่าการเปลี่ยนแปลงเล็ก ๆ น้อย ๆ ในโครงสร้างโปรตีนที่อาจมีผลต่อการละลายของโปรตีนและส่งเสริมให้รองก่อให้เกิดการปฏิสัมพันธ์น้ำโปรตีนขนาดใกล้เคียงกันเพื่อชะเวลาที่ต่างกัน ในกรณีเช่นนี้มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะปรับเปลี่ยนองค์ประกอบเฟสเคลื่อนที่ที่จะฟื้นการแยกบนพื้นฐานของโมเลกุลขนาดเพียงอย่างเดียว. พฤติกรรมการเก็บรักษาของสามโปรตีนกลม (γ-globulins, อัลบูมิซีรั่มวัวและovalbumin) ถูกตรวจสอบโดยใช้คอลัมน์ Agilent Prosec 300S ใน ต่ำไอออนิกความแข็งแรงของขั้นตอนที่แตกต่างกันของโทรศัพท์มือถือความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ การพึ่งพาอาศัยกันของ nonideal "The โปรตีนและการมีปฏิสัมพันธ์โปรตีนเมทริกซ์ในโซเดียมคลอไรด์ถูกกำหนดโดยการเปรียบเทียบการตอบสนองของรังสียูวีในแต่ละความเข้มข้นของเกลือ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ขนาดยกเว้นโครม ( วินาที ) เป็นเทคนิคที่ให้คะแนน
ข้อมูลในขนาดโมเลกุลของโปรตีนและพอลิเมอร์ เดี๋ยวต้องมีคอลัมน์
กับวัสดุพรุนเครื่องแบบด้วยกำหนดขนาดรูพรุนและเป็นเฟสเคลื่อนที่ที่เหมาะสมต่อ (
. ส่วนประกอบของเฟสเคลื่อนที่ เช่น เกลือ จะมีผลต่อการแยกวินาที

วัตถุประสงค์ของการเพิ่มเกลือในสารละลายเพื่อลดระดับ
ปฏิสัมพันธ์ของตัวอย่างส่วนประกอบด้วยเรซิน การแสดงตนหรือขาด
โซเดียมคลอไรด์ ( NaCl ) ในสารละลายตัวชะมีผลต่อปริมาณของโปรตีนที่ใช้ โดยการเปลี่ยนแปลงของรัศมี
ดัชนีเป็นฟังก์ชันของเกลือ .
มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะทราบว่าการเปลี่ยนแปลงค่อนข้างน้อยในโครงสร้างโปรตีนอาจมีผลต่อการละลายโปรตีนและส่งเสริมมัธยม

) ที่ก่อให้เกิดปฏิสัมพันธ์ในทํานองเดียวกันขนาดโปรตีนที่จะ elute คนละเวลา ในบางกรณี มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะ
ปรับเปลี่ยนองค์ประกอบเฟสเคลื่อนที่สามารถแยกตามขนาดโมเลกุล

ในพฤติกรรมของ คนเดียว สาม ( γ - โกลบูลินโปรตีนรูปทรงกลม , โอวัลบูมินและอัลบูมิน
) ศึกษาการใช้เลนต์ prosec 280 คอลัมน์ไอออน
แรงเคลื่อนที่ระยะต่ำค่าความเข้มข้นของเกลือ .การพึ่งพาอาศัยกันของ ' '
nonideal โปรตีนโปรตีนและปฏิสัมพันธ์โปรตีน แมทริกซ์ในเกลือถูกกำหนดโดยการเปรียบเทียบผลตอบสนอง UV
ในแต่ละความเข้มข้นของเกลือ