of the technique, a kit could be en

of the technique, a kit could be envisaged with the cells being provided lyophilized together with an appropriate aqueous medium to revive the cells, so that the operator can use this kit in a similar way as in dye penetrant.
4. Materials and methods
To validate the new NDT technique, experiments were performed in the conditions detailed thereafter to confirm the
assumptions previously described.
4.1. Bacterial cells
The bacterial cells used were R. erythropolis DCL14 strain and the interesting properties for this study are summarized in Table 1.
The bacterium was first isolated by the Division of Industrial Microbiology of the Wageningen University, The Netherlands,
from a sample collected on a ditch in Reeuwijk [16]. It is deposited and maintained at the Institute for Biotechnology and Bioengineering, Instituto Superior Técnico, Lisbon, Portugal.
Cells were grown in 100 mL Erlenmeyer flasks containing 20 mL of mineral medium supplemented with 0.25% (v/v) absolute ethanol (99.9%, Panreac) or 0.25% (v/v) n-hexadecane (99.9% Sigma-Aldrich) as carbon source. The cells were grown in orbital shakers (Aralab Lda) at 28 1C and 200 rpm and collected at the end of the exponential growth phase. After centrifugation, the cells were washed and ressuspended in phosphate buffer (pH7, 50 mM) to an optical density (measured at 600 nm) of 1 to standardise the initial concentration of cells in the assays. To the cell suspension, a Live/Deads BacLightTM bacterial viability kit from Molecular Probes (Invitrogen Co.) was added (0.5 μL per 500 μL of cell suspension). The kit contains a mixture of SYTOs9 green fluorescent nucleic acid stain (which stains all bacteria green) and
propidium iodide (which stains only bacteria with damaged membranes; since it reduces the SYTOs9 fluorescence when they are both present, non-viable cells are stained red).

4.2. Samples characterization
Three materials were selected and these were: stainless steel AISI 304L, aluminium alloy AA1100 and electrolytic copper. These are commonly used materials in engineering, including in microfabrication. It was intended to produce small size defects of wellknown morphology, with the same shape, a part of a scale factor concerning the dimensions, good reproducibility, and easy to measure. Therefore, defects were artificially produced using a micro hardness indenter Mitutoyo HM-112 with different loads

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ชุดสามารถ envisaged เซลล์การ lyophilized กับกลางสเอาท์ที่เหมาะสมเพื่อฟื้นฟูเซลล์ เพื่อให้พนักงานสามารถใช้ชุดนี้ในใน penetrant ย้อมเทคนิค4. วัสดุและวิธีการการตรวจสอบเทคนิคผู้ใหม่ ดำเนินการทดลองในเงื่อนไขรายละเอียดหลังการ confirm การสมมติฐานที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้4.1. แบคทีเรียเซลล์เซลล์แบคทีเรียที่ใช้ได้ต้องใช้ DCL14 R. erythropolis และคุณสมบัติน่าสนใจสำหรับการศึกษานี้สามารถสรุปได้ในตารางที่ 1แบคทีเรียถูกแบ่งแยกในส่วนของอุตสาหกรรมจุลชีววิทยาของมหาวิทยาลัยอย่างไร Wageningen ประเทศเนเธอร์แลนด์ firstจากตัวอย่างที่เก็บรวบรวมในคูใน Reeuwijk [16] มันเป็นฝาก และเก็บรักษาที่สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ และ Bioengineering, Instituto ห้อง Técnico ลิสบอน โปรตุเกส เซลล์ที่โตใน 100 mL ประกอบด้วยปริมาณ 20 mL ของแร่กลางเสริม ด้วย 0.25% (v/v) แอบโซลูทเอทานอล (99.9%, Panreac) flasks Erlenmeyer หรือ 0.25% (v/v) n-hexadecane (99.9% ซิก Aldrich) เป็นแหล่งคาร์บอน เซลล์ที่โตในยางมะตอย (Aralab Lda) ของวงโคจรที่ 28 1C และ 200 รอบต่อนาที และรวบรวมเมื่อสิ้นสุดระยะเรขา หลังจาก centrifugation เซลล์ถูกล้าง และ ressuspended ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH7, 50 mM) จะมีความหนาแน่นออปติคอล (วัดที่ 600 nm) 1 standardise ความเข้มข้นเริ่มต้นของเซลล์ใน assays เพื่อระงับเซลล์ ชุดชีวิตแบคทีเรีย สด/Deads BacLightTM จากโมเลกุล Probes (บริษัท Invitrogen) ถูกเพิ่ม (0.5 μL ต่อ μL 500 ของระงับเซลล์) ชุดประกอบด้วยส่วนผสมของ SYTOs9 fluorescent เขียวกรดนิวคลีอิกคราบ (ซึ่งคราบสกปรกแบคทีเรียทั้งหมดสีเขียว) และ ไอโอไดด์ propidium (ซึ่งคราบสกปรกแบคทีเรีย ด้วยสารเสียหาย เนื่องจากมันช่วยลด SYTOs9 fluorescence เมื่อใดทั้งปัจจุบัน ไม่ได้เซลล์สีแดง)4.2 การจำแนกตัวอย่างเลือกวัสดุที่สาม และมี: เหล็กกล้าไร้สนิม AISI 304L, AA1100 อะลูมิเนียมและทองแดง electrolytic เหล่านี้จะใช้โดยทั่วไปวัสดุวิศวกรรม รวมถึงใน microfabrication สร้างขึ้นเพื่อผลิตบกพร่องขนาดเล็กของสัณฐานวิทยาอุดรธานี รูปเหมือน เป็นส่วนหนึ่งของตัวคูณสเกลเกี่ยวกับมิติ reproducibility ดี และง่ายต่อการวัด ดังนั้น ข้อบกพร่องถูก artificially ผลิตด้วยอาศัยความแข็งไมโคร Mitutoyo HM-112 โหลดแตกต่างกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ของเทคนิค, ชุดอาจจะมีการวาดภาพกับเซลล์ถูกให้แห้งร่วมกับสื่อที่เป็นน้ำที่เหมาะสมในการฟื้นฟูเซลล์เพื่อให้ผู้ประกอบการสามารถใช้ชุดนี้ในลักษณะที่คล้ายกับในสีย้อมแทรกซึม.
4 วัสดุและวิธีการ
ในการตรวจสอบเทคนิค NDT ใหม่ทดลองดำเนินการในเงื่อนไขรายละเอียดหลังจากนั้น con Fi RM
สมมติฐานที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้.
4.1 เซลล์แบคทีเรีย
เซลล์แบคทีเรียสายพันธุ์ที่ได้รับใช้อาร์ erythropolis DCL14 และคุณสมบัติที่น่าสนใจสำหรับการศึกษานี้ได้สรุปไว้ในตารางที่ 1.
แบคทีเรียถูกไฟแยกแรกโดยฝ่ายจุลชีววิทยาอุตสาหกรรมของ Wageningen University, เนเธอร์แลนด์,
จากตัวอย่างที่เก็บจาก คลองใน Reeuwijk [16] มันเป็นเงินฝากและการบำรุงรักษาที่สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพและวิศวกรรมชีวภาพ, Instituto Superior Técnico, ลิสบอน, โปรตุเกส.
เซลล์ที่ถูกปลูกใน 100 มลรูปกรวยชั้นถามที่มี 20 มิลลิลิตรของกลางแร่เสริมด้วย 0.25% (v / v) เอทานอล (99.9% Panreac) หรือ 0.25% (v / v) n-hexadecane (99.9% Sigma-Aldrich) เป็นแหล่งคาร์บอน เซลล์ที่ถูกปลูกในอิทธิพลโคจร (Aralab Lda) วันที่ 28 1C และ 200 รอบต่อนาทีและเก็บที่สิ้นสุดระยะการเจริญเติบโต หลังจากการปั่นแยกเซลล์ที่ถูกล้างและ ressuspended ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH7, 50 มิลลิเมตร) เพื่อความหนาแน่นของออปติคอล (วัดที่ 600 นาโนเมตร) 1 ที่จะสร้างมาตรฐานความเข้มข้นเริ่มต้นของเซลล์ในการตรวจ การระงับเซลล์สด / ตายชุดที่มีศักยภาพ BacLightTM แบคทีเรียจาก Probes โมเลกุล (Invitrogen จำกัด ) เพิ่ม (0.5 ไมโครลิตรต่อ 500 ไมโครลิตรของเซลล์แขวนลอย) ชุดที่มีส่วนผสมของ SYTOs9 สีเขียวชั้น uorescent คราบกรดนิวคลีอิก (ซึ่งคราบแบคทีเรียสีเขียว) และ
ไอโอไดด์ propidium (ซึ่งคราบแบคทีเรียเท่านั้นที่มีเยื่อเสียหายเนื่องจากมันช่วยลด uorescence ชั้น SYTOs9 เมื่อพวกเขาอยู่ทั้งในปัจจุบัน, เซลล์ที่ไม่ทำงานได้เป็นสีแดง ). 4.2 ตัวอย่างตัวละครสามวัสดุที่ได้รับการคัดเลือกและเหล่านี้คือ: สแตนเลสเกรด 304L, AA1100 อลูมิเนียมและทองแดงด้วยไฟฟ้า เหล่านี้เป็นวัสดุที่นิยมใช้ในงานวิศวกรรมรวมทั้งในชิ้นงานขนาดเล็ก มันตั้งใจที่จะผลิตข้อบกพร่องขนาดเล็ก ๆ ของสัณฐานวิทยา wellknown มีรูปร่างเหมือนกันเป็นส่วนหนึ่งของปัจจัยระดับที่เกี่ยวข้องกับมิติ, การทำสำเนาที่ดีและง่ายต่อการวัด ดังนั้นข้อบกพร่องอยู่ถึงแม้ว่าสายศิลปะการผลิตโดยใช้ความแข็งไมโครหัวกด Mitutoyo HM-112 กับโหลดที่แตกต่างกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

of the technique, a kit could be envisaged with the cells being provided lyophilized together with an appropriate aqueous medium to revive the cells, so that the operator can use this kit in a similar way as in dye penetrant.
4. Materials and methods
To validate the new NDT technique, experiments were performed in the conditions detailed thereafter to confirm the
assumptions previously described.
4.1 . เซลล์แบคทีเรียเซลล์แบคทีเรีย
ใช้สายพันธุ์ R . erythropolis dcl14 และคุณสมบัติที่น่าสนใจสำหรับการศึกษานี้สรุปได้ในตารางที่ 1 .
แบคทีเรียได้จึงตัดสินใจเดินทางแยกออกจากกองอุตสาหกรรมจุลชีววิทยามหาวิทยาลัย Wageningen เนเธอร์แลนด์
จากตัวอย่างที่เก็บในคูน้ำใน reeuwijk [ 16 ]มันคือฝากและเก็บรักษาไว้ที่สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพและชีววิศวกรรมที่เหนือกว่าและ Instituto T cnico ลิสบอน โปรตุเกส
เซลล์เติบโตใน 100 ml เออร์เลนเมเยอร์flถามที่มี 20 ml น้ำแร่เติม 0.25 % ( v / v ) แน่นอน เอทานอล ( 99.9% panreac ) หรือ 0.25 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) n-hexadecane ( 99.9% ซิกม่า Aldrich ) เป็นแหล่งคาร์บอน The cells were grown in orbital shakers (Aralab Lda) at 28 1C and 200 rpm and collected at the end of the exponential growth phase. After centrifugation, the cells were washed and ressuspended in phosphate buffer (pH7, 50 mM) to an optical density (measured at 600 nm) of 1 to standardise the initial concentration of cells in the assays. To the cell suspension, a Live/Deads BacLightTM bacterial viability kit from Molecular Probes (Invitrogen Co.) was added (0.5 μL per 500 μL of cell suspension). The kit contains a mixture of SYTOs9 green fluorescent nucleic acid stain (which stains all bacteria green) and
propidium iodide (which stains only bacteria with damaged membranes; since it reduces the SYTOs9 fluorescence when they are both present,เซลล์ทำงานได้ไม่เปื้อนสีแดง )

4.2 . ตัวอย่างลักษณะ
3 วัสดุที่และเหล่านี้คือ : เหล็กกล้าไร้สนิม AISI 304L , aa1100 โลหะผสมอลูมิเนียมและแผ่นทองแดง เหล่านี้มักใช้วัสดุในงานวิศวกรรม รวมทั้งรองรับชิ้นงานขนาดเล็ก . มันมีวัตถุประสงค์เพื่อผลิตขนาดเล็กที่รู้จักกันดีกับข้อบกพร่องของรูปร่าง รูปทรงเดียวกัน a part of a scale factor concerning the dimensions, good reproducibility, and easy to measure. Therefore, defects were artificially produced using a micro hardness indenter Mitutoyo HM-112 with different loads