2. Materials and methods2.1. Sample

2. Materials and methods
2.1. Sample preparation and sterilization

Beef byproducts (heart, liver, lungs, lumen, omasum, large intestine, and small intestine) and pork byproducts (heart, large intestine, liver, and small intestine) were purchased from a livestock wholesale market in Daejeon and Gyeonggi, Korea. Prior to the inoculation test, each byproduct was vacuum packaged and sterilized by EB-irradiation (35 kGy at 10 MeV) using a linear electron beam RF accelerator (EB Tech, Daejeon, Korea) to achieve the complete inactivation of the indigenous microflora.

2.2. Test pathogens and culture condition

E. coli O157:H7 (KCCM 40406) and L. monocytogenes (KCTC 3569) were obtained from the Korean Culture Center of Microorganisms (KCCM, Seoul, Korea) and Korean Collection for Type Culture (KCTC, Daejeon, Korea), respectively. E. coli O157:H7 and L. monocytogenes were cultivated in tryptic soy broth (Difco Laboratories, Detroit, MI, USA) and tryptic soy broth containing 0.6% yeast extract (Difco Laboratories), at 37 °C for 48 h. The cultures were then centrifuged at 3100 rpm for 15 min at 4 °C in a refrigerated centrifuge (UNION 32R, Hanil Science Industrial, Co., Ltd., Korea). The resulting pellet was washed twice with sterile saline solution (0.85%),the viable cell density was approximately 109 CFU/mL. Aliquots of 100 μL of the test culture preparation were inoculated on the cut beef and pork byproducts (5 g). Half the sample were vacuum packaged in low-density polyethylene/nylon vacuum bags (20 cm×20 cm; oxygen permeability of 22.5 mL/m2/24 h atm at 60% RH/25 °C; water vapor permeability of 4.7 g/m2/24 h at 100% RH/25 °C) by a vacuum packaging machine (FJ-600XL; Hankook Fujee Industries Co., Hwaseong, Korea) at −650 mm Hg, and half were aerobically packaged in polyethylene bags (20 cm×20 cm).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การเตรียมการและการฆ่าเชื้อตัวอย่างเนื้อพลอย (หัวใจ ตับ ปอด lumen, omasum ลำไส้ใหญ่ และลำไส้เล็ก) และหมูพลอย (หัวใจ ลำไส้ใหญ่ ตับ และลำไส้เล็ก) ที่ซื้อจากตลาดขายส่งปศุสัตว์ในแทจอนและคยองกี เกาหลี ก่อนทดสอบ inoculation จิตสำนึกแต่ละเป็นสุญญากาศบรรจุ และ sterilized โดย EB-วิธีการฉายรังสี (35 kGy ที่ 10 MeV) ใช้คันเร่งแสง RF อิเล็กตรอนเชิงเส้น (เทคนิค EB แทจอน เกาหลี) ให้มีการยกเลิกการเรียกเสร็จสมบูรณ์ของ microflora ชน2.2 การทดสอบโรคและสภาพวัฒนธรรมO157:H7 e. coli (KCCM 40406) และ L. monocytogenes (KCTC 3569) ได้รับมาจากเกาหลีวัฒนธรรมศูนย์ของจุลินทรีย์ (KCCM โซล เกาหลี) ชุดเกาหลีสำหรับวัฒนธรรมชนิด (KCTC แทจอน เกาหลี), ตามลำดับ O157:H7 e. coli และ L. monocytogenes ถูกปลูกในซุปถั่วเหลือง tryptic (ปฏิบัติ Difco ดีทรอยต์ MI สหรัฐอเมริกา) และประกอบด้วยสารสกัดจากยีสต์ 0.6% (Difco Laboratories), ซุปถั่วเหลือง tryptic ที่ 37 ° C สำหรับ 48 h วัฒนธรรมมี centrifuged แล้วที่ 3100 rpm สำหรับ 15 นาทีที่ 4 ° C ในเครื่องหมุนเหวี่ยงควบคุมอุณหภูมิ (สหภาพ 32R, Hanil วิทยาศาสตร์อุตสาหกรรม Co., Ltd. เกาหลี) เม็ดได้ถูกล้างสองครั้ง ด้วยน้ำเกลือฆ่าเชื้อ (0.85%),the เซลล์ทำงานได้ความหนาแน่นได้ประมาณ 109 CFU/mL Aliquots μL 100 ของวัฒนธรรมเตรียมมี inoculated ตัดเนื้อและหมูพลอย (5 กรัม) ตัวอย่างครึ่งมีสุญญากาศบรรจุ ด้วยเครื่องบรรจุสูญญากาศ (FJ 600XL เอทิลีนความหนาแน่นต่ำไนล่อนถุงสูญญากาศ (20 ซม. × 20 ซม. ออกซิเจน permeability ของ 22.5 mL/m2/24 h ตู้เอทีเอ็มที่ 60% RH/25 ° C ไอน้ำ permeability ของ 4.7 g/m2/24 h ที่ 100% RH/25 ° C) Hankook Fujee อุตสาหกรรม จำกัด ฮวาซอง เกาหลี) ที่ −650 mm Hg และครึ่งหนึ่งถูก aerobically บรรจุในถุงพลาสติก (20 ซม. × 20 ซม.)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การเตรียมตัวและการฆ่าเชื้อผลพลอยได้เนื้อ (หัวใจ, ตับ, ปอด, ลูเมน Omasum, ลำไส้ใหญ่และลำไส้เล็ก) และผลพลอยได้หมู (หัวใจลำไส้ใหญ่ตับและลำไส้ขนาดเล็ก) ที่ซื้อมาจากสัตว์ที่ตลาดขายส่งใน Daejeon และคยองกี เกาหลี ก่อนที่จะมีการทดสอบการฉีดวัคซีนเป็นผลพลอยได้แต่ละสูญญากาศบรรจุและการฆ่าเชื้อโดย EB-การฉายรังสี (35 กิโลเกรย์ที่ 10 MeV) โดยใช้ลำแสงอิเล็กตรอนเชิงเส้นเร่ง RF (EB เทคแทจอนเกาหลีใต้) เพื่อให้เกิดการใช้งานที่สมบูรณ์ของจุลินทรีย์ท้องถิ่น. 2.2 . เชื้อโรคทดสอบและวัฒนธรรมสภาพอี coli O157: H7 (KCCM 40406) และ L. monocytogenes (KCTC 3569) ที่ได้รับจากศูนย์วัฒนธรรมเกาหลีจุลินทรีย์ (KCCM, กรุงโซลประเทศเกาหลี) และการเก็บเกาหลีสำหรับประเภทวัฒนธรรม (KCTC ใน Daejeon เกาหลี) ตามลำดับ เชื้อ E. coli O157: H7 และ L. monocytogenes ได้รับการปลูกฝังในน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (Difco ห้องปฏิบัติการ, ดีทรอยต์, มิชิแกนสหรัฐอเมริกา) และน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic ที่มีสารสกัดจากยีสต์ 0.6% (Difco ห้องปฏิบัติการ) ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง วัฒนธรรมที่ถูกปั่นแล้วที่ 3100 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 ° C ในเครื่องหมุนเหวี่ยงตู้เย็น (ยูเนี่ยน 32R, Hanil วิทยาศาสตร์อุตสาหกรรม จำกัด เกาหลี) เม็ดส่งผลให้ได้รับการล้างครั้งที่สองกับน้ำเกลือปลอดเชื้อ (0.85%) ความหนาแน่นของเซลล์ที่มีชีวิตอยู่ที่ประมาณ 109 โคโลนี / มิลลิลิตร aliquots 100 ไมโครลิตรวัฒนธรรมของการเตรียมการทดสอบถูกเชื้อในเนื้อตัดและผลพลอยได้หมู (5 กรัม) ครึ่งหนึ่งของกลุ่มตัวอย่างได้รับการสูญญากาศบรรจุในพลาสติกชนิดความหนาแน่นต่ำ / ถุงสูญญากาศไนลอน (20 ซม. × 20 ซมซึมผ่านของออกซิเจน 22.5 มิลลิลิตร / m2 / 24 ตู้เอทีเอ็มชั่วโมงที่ 60% RH / 25 ° C; การซึมผ่านไอน้ำ 4.7 g / m2 / 24 ชั่วโมงที่ 100% RH / 25 ° C) โดยเครื่องบรรจุภัณฑ์สูญญากาศ (FJ-600XL; Hankook Fujee อุตสาหกรรม จำกัด ฮวาซองเกาหลี) ที่ -650 มิลลิเมตรปรอทและครึ่งหนึ่งได้รับการบรรจุออกซิเจนในถุงพลาสติกชนิด (20 ซม× 20 ซม.)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . การเตรียมตัวอย่างและฆ่าเชื้อผลพลอยได้

เนื้อหัวใจ ตับ ปอด ลูเมน โอมาซัม ไส้ใหญ่ลำไส้เล็ก ) และผลพลอยได้จากหมู ( หัวใจ ลำไส้ใหญ่ ตับ และลำไส้เล็ก ) ซื้อมาจากตลาดขายส่งและปศุสัตว์ในจอน Gyeonggi เกาหลี ก่อนที่จะได้รับการทดสอบผลพลอยได้คือสูญญากาศบรรจุและฆ่าเชื้อแต่ละพันธุ์ EB ( 35   10   kGy MeV ) โดยใช้เส้นลำแสงอิเล็กตรอน RF คันเร่ง ( EB เทค , Daejeon , เกาหลีใต้ ) เพื่อให้ใช้งานที่สมบูรณ์ของจุลินทรีย์ท้องถิ่น .

. . ทดสอบเชื้อโรคและวัฒนธรรมเงื่อนไข

E . coli เป็นสมาชิก : H7 ( kccm 40406 ) และmonocytogenes ( kctc 3569 ) ที่ได้รับจาก วัฒนธรรมเกาหลี ศูนย์จุลินทรีย์ ( kccm , โซล , เกาหลี ) และคอลเลกชันเกาหลีวัฒนธรรมประเภท ( kctc , Daejeon , เกาหลีใต้ ) ตามลำดับ E . coli เป็นสมาชิก ) และ monocytogenes ปลูกในน้ำซุปถั่วเหลืองอาหาร ( difco ห้องปฏิบัติการ , ดีทรอยต์ , มิชิแกน , สหรัฐอเมริกา ) และอาหารถั่วเหลืองอาหารที่มีสารสกัดจากยีสต์ 0.6% ( difco ห้องปฏิบัติการ ) ที่อุณหภูมิ 37  ° C 48 รึเปล่า .วัฒนธรรมเป็นระดับที่ 3100   15  รอบต่อนาที นาทีที่ 4  ° C ในเหวี่ยงเย็น ( 32r Hanil วิทยาศาสตร์อุตสาหกรรม Co . , Ltd . เกาหลี ส่งผลให้เม็ดซักสองครั้งกับหมันน้ำเกลือ ( 0.85 % ) ความหนาแน่นเซลล์ได้ประมาณ 109 CFU / ml ได้รึเปล่าเฉยๆ 100  μ L ของวัฒนธรรมการทดสอบการเตรียมการปลูกเชื้อบนตัดเนื้อและหมู ผลพลอยได้ ( 5  กรัม )ครึ่งหนึ่งของจำนวนสูญญากาศบรรจุในถุงสูญญากาศ ( density polyethylene ไนลอน / 20 รึเปล่า cm × 20 รึเปล่าซม. ออกซิเจนซึมผ่านได้ของ 22.5 มล. / m2 / 24     ATM H 60 เปอร์เซ็นต์ / 25  ° C ; ไอน้ำซึมผ่านได้ของไหม 4.7 g / m2 / 24 ไหม H 100 % RH / 25  ° C ) โดยเครื่องบรรจุภัณฑ์สูญญากาศ ( fj-600xl ; Hankook fujee อุตสาหกรรม Co . , Hwaseong , เกาหลี ) − 650 รึเปล่ามม. ปรอท และครึ่ง aerobically บรรจุในถุง polyethylene ( 20 × 20 ซม. ซม. อะไรเหรอ )