For inoculum preparation Pseudomona

For inoculum preparation Pseudomonas koreensis 2.74 was precultured
on nutrient agar for 48 h at room temperature. A single
colony from the nutrient agar was transferred to 50 mL nutrient
broth (Difco 234000) and incubated on a rotary shaker (180 rpm)
for 18 h at room temperature. One ml of the seed culture was used
as an inoculum and added to a 1-L Erlenmeyer flask with 250 mL of
KB broth (King et al., 1954). The flasks were incubated for 48 h at
room temperature on a rotary shaker (180 rpm). Three different
types of inocula were tested in the present study: I) The cells were
harvested by centrifugation (17 000 g, 35 min: Avanti J-10, Beckman
Coulter, CA, USA), washed once with 0.85% NaCl and dissolved
in nutrient solution, and added to the plant system. The washed
cells were added in two concentrations, log 7.5 cfu mL
1 and log
5.2 cfu mL
1. II) KB culture medium including cells (0.5 L broth
added to 20 L nutrient solution)was directly added to the system to
achieve a cell concentration of log 7.5 cfu mL
1. III) Pseudomonas
koreensis 2.74 were cultivated in oil minimal medium based on the
nutrient solution used in the plant system (NH4Cl 0.02 M, KCl
0.02 M, MgSO4 0.0016 M, K2HPO4, KH2PO4 amended with 2% of
rapeseed oil, pH 5.9). The minimal oil broth was then incubated for
7 days on a rotary shaker (180 rpm) at room temperature and added
directly to the system (0.5 L broth was added to 20 L nutrient
solution). In this treatment the concentration of P. koreensis 2.74
was log 6.3 cfu mL
1 in the plant cultivation system.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สำหรับ inoculum เตรียม Pseudomonas koreensis 2.74 preculturedใน agar ธาตุอาหารสำหรับ 48 h ที่อุณหภูมิห้อง เดียวโคโลนีจาก agar ธาตุอาหารถูกถ่ายโอนไป 50 มลสารซุป (Difco 234000) และ incubated ในเชคเกอร์โรตารี่ (180 รอบต่อนาที)สำหรับ h 18 ที่อุณหภูมิห้อง ใช้ ml หนึ่งวัฒนธรรมเมล็ดเป็นการ inoculum และเพิ่มความหนาว Erlenmeyer 1 L กับ 250 mL ของซุป KB (กษัตริย์ร้อยเอ็ด al., 1954) น้ำถูก incubated สำหรับ h 48 ที่อุณหภูมิห้องในเชคเกอร์โรตารี่ (180 รอบต่อนาที) สามแตกต่างกันทดสอบชนิด inocula ในการศึกษาปัจจุบัน: ฉัน) เซลล์ได้เก็บเกี่ยว โดย centrifugation (ขั้นต่ำ 35, 17 000 g: J เรียนโรส-10, BeckmanCoulter, CA, USA), ล้างครั้งเดียว ด้วย 0.85% NaCl และส่วนยุบในโซลูชันที่ธาตุอาหาร และเพิ่มลงในระบบโรงงาน ที่หินเซลล์มีเพิ่มความเข้มข้น 2 ล็อก 7.5 cfu mL 1 และบันทึก5.2 cfu mL 1 II) สื่อวัฒนธรรม KB รวมไปถึงเซลล์ (ซุป 0.5 Lเพิ่มลงในโซลูชันธาตุอาหาร 20 L) ถูกเพิ่มโดยตรงกับระบบการให้ความเข้มข้นเซลล์ของล็อก 7.5 cfu mL 1 III) pseudomonaskoreensis 2.74 ถูกปลูกในน้ำมันปานกลางน้อยที่สุดตามโซลูชันที่ใช้ในระบบพืชธาตุอาหาร (NH4Cl 0.02 M, KCl0.02 M, MgSO4 0.0016 M, K2HPO4, KH2PO4 แก้ไขกับ 2% ของเมล็ดต้นเรพน้ำมัน ค่า pH 5.9) ซุปน้ำมันน้อยที่สุดแล้วถูก incubated สำหรับวันในเชคเกอร์โรตารี่ที่ (180 รอบต่อนาที) ที่อุณหภูมิห้อง และเพิ่มโดยตรงกับระบบ (0.5 ถูกเพิ่มซุป L อาหาร 20 Lการแก้ปัญหา) ในการนี้รักษาความเข้มข้นของ P. koreensis 2.74ถูกล็อก 6.3 cfu mL 1 ในระบบปลูกพืช

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับการเตรียมหัวเชื้อ Pseudomonas koreensis 2.74 ถูก precultured
ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่เวลา 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง เดียว
อาณานิคมจากอาหารเลี้ยงเชื้อที่ถูกย้ายไป 50 มลสารอาหาร
น้ำซุป (Difco 234000) และบ่มในเครื่องปั่นหมุน (180 รอบต่อนาที)
18 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง หนึ่งมิลลิลิตรของวัฒนธรรมเมล็ดพันธุ์ถูกนำมาใช้
เป็นหัวเชื้อและเพิ่มขวดรูปกรวย 1-L 250 มิลลิลิตร
KB น้ำซุป (กิ่ง et al., 1954) ขวดถูกบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่
อุณหภูมิห้องในเครื่องปั่นหมุน (180 รอบต่อนาที) แตกต่างกันสาม
ประเภท inocula ได้มีการทดสอบในการศึกษาปัจจุบัน: I) เซลล์ที่ถูก
เก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยง (17 000 กรัม, 35 นาที: Avanti J-10, Beckman
Coulter, CA, USA), ล้างครั้งเดียวกับ 0.85% และโซเดียมคลอไรด์ที่ละลาย
ใน สารละลายธาตุอาหารและเพิ่มระบบพืช ล้าง
เซลล์ที่ถูกเพิ่มเข้ามาในสองความเข้มข้นเข้าสู่ระบบ 7.5 cfu มิลลิลิตร 1 และเข้าสู่ระบบ
5.2 cfu มิลลิลิตร 1 II) กลางวัฒนธรรมกิโลไบต์รวมทั้งเซลล์ (0.5 ลิตรน้ำซุป
เพิ่ม 20 ลิตรสารละลายธาตุอาหาร) เพิ่มโดยตรงกับระบบเพื่อ
ให้บรรลุความเข้มข้นของเซลล์ล็อก 7.5 cfu มิลลิลิตร 1 III) Pseudomonas
koreensis 2.74 ได้รับการปลูกฝังในสื่อน้ำมันน้อยขึ้นอยู่กับ
การแก้ปัญหาสารอาหารที่ใช้ในระบบพืช (NH4Cl 0.02 M, โพแทสเซียมคลอไรด์
0.02 M, MgSO4 0.0016 M, K2HPO4, KH2PO4 แก้ไขเพิ่มเติมกับ 2% ของ
น้ำมัน rapeseed ค่า pH 5.9) น้ำซุปน้ำมันน้อยที่สุดถูกบ่มแล้วสำหรับ
7 วันในเครื่องปั่นหมุน (180 รอบต่อนาที) ที่อุณหภูมิห้องและเพิ่ม
โดยตรงกับระบบ (0.5 ลิตรน้ำซุปถูกบันทึกอยู่ใน 20 ลิตรสารอาหาร
สารละลาย) ในการรักษานี้ความเข้มข้นของพี koreensis 2.74
เป็น 6.3 log cfu mL? 1 ในระบบการเพาะปลูกพืช

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมเชื้อ Pseudomonas koreensis 2.74 คือ 1949
บน NUMB3RS 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง อาณานิคมเดียว
จาก NUMB3RS ย้ายไป 50 ml nutrient broth (
difco 234 , 000 ) และบ่มในเครื่องปั่น Rotary ( 180 รอบต่อนาที )
18 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง หนึ่งมิลลิลิตร เพาะเมล็ดใช้
เป็นเชื้อ และเพิ่มเป็น 1-l เออร์เลนเมเยอร์ขวดกับ
250 ml .ซุป KB ( King et al . , 1954 ) ขวดถูกบ่ม 48 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิห้องในเครื่องปั่นหมุน
( 180 รอบต่อนาที ) สามชนิดที่แตกต่างกันของ inocula
ทดสอบในการศึกษา ได้แก่ 1 ) เซลล์ก็
เก็บเกี่ยวโดยการเหวี่ยงแยก ( 17 000 กรัม , 35 นาที : AVANTI j-10 Beckman Coulter ,
, CA , USA ) , ล้างเมื่อเติม 0.85 % และละลาย
ในสารละลายธาตุอาหาร และเพิ่มระบบพืช ล้าง
เซลล์มีการเพิ่มความเข้มข้นใน log CFU ml 2 , 7.5
1 และเข้าสู่ระบบ
5.2 CFU ml
1 2 ) อาหารเพาะเลี้ยงเซลล์ ( บางครั้งรวมถึง 0.5 ลิตรซุป
เพิ่ม 20 ลิตร สารละลายธาตุอาหารโดยตรง ) ได้เพิ่มระบบต่างๆ เพื่อให้ได้ปริมาณเซลล์
ล็อก 7.5 CFU ml
1 3 ) ส่วนของ
koreensis 2.74 ปลูกในกลางน้ำมันน้อยที่สุดตาม
สารละลายธาตุอาหารที่ใช้ในระบบพืช ( 4 . 0.02 M .
002 M MgSO4 ใ 0.0016 M , k2hpo4 kh2po4 , แก้ไขเพิ่มเติม 2 %
น้ำมัน rapeseed pH 5.9 ) ซุปน้ำมันน้อยที่สุดแล้ว 20% โดย
7 วันบนเครื่องปั่น Rotary ( 180 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิห้องและเพิ่ม
โดยตรงไปยังระบบ ( 0.5 ลิตร 20 ลิตรน้ำซุปเพิ่มธาตุอาหาร
แก้ปัญหา ) ในการรักษาความเข้มข้นของหน้า koreensis 2.74
ถูกเข้าสู่ระบบ 6.3 CFU ml
1 ในระบบการเพาะปลูกพืช .