3. Results and discussion3.1. Optim

3. Results and discussion
3.1. Optimization of callus induction medium
Vigorous callus growth was observed throughout the entire culture
period. Embryogenic calli quickly developed in all eight induction
media within the first week of incubation. Callus induction rate was
the highest on medium M11AP (84.0%) followed by M11APC1
(78.7%). However, callus fresh weight was significantly lower on
M11AP than on M11APC1 (Table 2). Overall, M11APC1 was found to
be the most efficient callus induction medium for SA281 among the
eight media tested. Similar experiments were preformed to optimize
callus induction media for Tx430 (Fig. 1c) and 91419R (data not
shown). Results indicated that M11APC1 was the optimal medium for
those two lines as well.
The callus fresh weight was significantly higher onM11AP (0.058 g/IE)
than onM11 (0.030 g/IE) (Table 2), indicating the beneficial effects
of L-asparagine and L-proline on callus growth which is in agreement
with a previous report (Elkonin et al., 1995). We further observed that
callus fresh weight was significantly higher on M11APC1 (0.068 g/IE)
than on M11AP (0.058 g/IE), suggesting that CuSO4•5H2O at 1.0 μM
has a positive effect on callus proliferation. These results highlighted
the importance of an appropriate concentration of additional ingredient
for optimizing callus induction medium in sorghum.
3.2. Optimization of callus regeneration medium
When IE-derived calli were subcultured on regeneration medium,
they turned into green tissue within one week (Fig. 1d). Notably,
calli on regeneration medium with plant growth regulators developed
more effectively than on media without growth regulators. For example,
SA281 calli on B1I1C1 produced maximum number of shoots
(72.6 per IE) (Fig. 1e and f). In contrast, calli on MSC1 produced the
least number of shoots (20.9 per IE) (Table 3). Moreover, BA and IAA
together were better than BA alone for callus regenerability when the
medium B1I1C1 (72.6 per IE) was compared with B2C1 (56.3 per IE).
Additional ingredients in regeneration medium have a significant
impact on regenerability. L-Asparagine and L-proline fostered significant
improvement in the number of shoots on B2C1AP (66.4 per IE) as compared
to that on B2C1 (56.3 per IE). PVP at 1 g/Lwhen supplemented in
B2C1P markedly increased shoot production (65.3 per IE) as compared
to B2C1 without PVP (56.3 per IE). These results are in agreement with
earlier reports (Elkonin et al., 1995; Hagio, 2002). A higher concentration
of CuSO4•5H2Oat1μM(ten-fold higher than that in MS) drastically
enhanced shoot production on B2C1 (56.3 per IE) as compared to that
on B2 (40.6 per IE), confirming the beneficial effect of high Cu level on
sorghum tissue culture (Nirwan and Kothari, 2003). Overall, B1I1C1
was the best regeneration medium for SA281 (Table 3).
In the present system, regeneration rates up to 100% have been
routinely obtained from three tested lines, much higher than 20–50%
recorded earlier for cv. X4004 (Gamborg et al., 1977). Recently, callus
regenerability was improved to 22.8 shoots per IE from sorghum line
IS 3566 (Pola et al., 2008). By comparison, the regenerability was
improved markedly in our experiments; over 60 regenerants were
produced from a single IE of SA281 within eight weeks' incubation
(Fig. 1e, f, g and h).
3.3. Effects of callus age
Callus rapidly grew across the three tested lineswithin twoweeks of
incubation (Fig. 1b and c), with a significant increase in callus fresh
weight (Table 4). However, variation in callus growth was observed
among the tested lines; SA281 callus grew faster than the other two.
The most rapid callus growth occurred between one and two weeks
as demonstrated by weekly callus growth ratio (the fresh weight of
current week divided by the fresh weight of previous week). Both
regeneration rate and regenerability (shoots per IE) peaked at two
weeks across these three lines (Table 4).
Unlike rice embryogenic callus which can maintain regenerability
over 40 weeks (Nabors et al., 1983), sorghum embryogenic callus does
not maintain a useful level of regenerability over fourweeks. The reason
for this phenomenon is, as yet, unknown. Our data from three tested
lines unequivocally demonstrated that the optimal callus age was
two-weeks old. When callus was four-weeks old, the regeneration
rate and regenerability dropped markedly. For instance, SA281 could
produce 59 shoots per IE when callus was two-weeks old; however, it
only generated 3 shoots per IE when callus was four-weeks old
(Table 4). Therefore, callus age plays a critical role on regenerability,
which provides important information for establishing a robust tissue
culture system for sorghum.
To efficiently regenerate sorghum in vitro cultures, it is imperative
to introduce a management strategy to minimize the effect of short
duration of callus regenerability. It is necessary to continuously initiate
fresh IEs in order to maintain a highly efficient tissue culture system.
Sorghum lines, such as Tx430 and SA281, can grow in a temperaturecontrolled
glasshouse throughout the year facilitating the harvest
of fresh IEs at any time. Therefore, vigorous embryogenic calli can be
generated consistently allowing the optimized tissue culture system to
be utilized for transformation irrespective of growing seasons.
Acknowledgments
We are thankful to the ARC (Australian Research Council)
(LP0883808) and Pacific Seeds Pty. Ltd. for their financial support
on Linkage project LP0883808. We are also grateful to GRDC (Grains
Research & Development Corporation) for providing a Grains Research
Top-up scholarship (GRS10405). Last but not least, we would like to
thank Dr. Yue Sun and Dr. Bradley Campbell for their effort during the
editing process.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผลลัพธ์ และสนทนา3.1 การเพิ่มประสิทธิภาพของสื่อเหนี่ยวนำให้เจริญเติบโตให้คึกคักได้สังเกตตลอดทั้งวัฒนธรรมรอบระยะเวลา Calli เยื่อที่พัฒนาอย่างรวดเร็วในการเหนี่ยวนำ 8 ทั้งหมดสื่อภายในสัปดาห์แรกของคณะทันตแพทยศาสตร์ อัตราการเหนี่ยวนำให้ถูกสูงสุดในขนาด M11AP (84.0%) ตาม ด้วย M11APC1(78.7%) อย่างไรก็ตาม ให้น้ำหนักสดต่ำในM11AP กว่าบน M11APC1 (ตารางที่ 2) โดยรวม M11APC1 พบเป็นสื่อเหนี่ยวนำให้มีประสิทธิภาพสูงสุดสำหรับ SA281 ในการทดสอบสื่อ 8 การทดลองคล้ายถูก preformed เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพcallus สื่อเหนี่ยวนำสำหรับ Tx430 กิน 1c) และ 91419R (ข้อมูลไม่แสดง) ผลระบุว่า M11APC1 ถูกราคาปานกลางที่ดีที่สุดสองบรรทัดเช่นกันให้น้ำหนักสดถูก onM11AP อย่างมีนัยสำคัญ (0.058 กรัม/IE)กว่า onM11 (0.030 g/IE) (ตาราง 2), ระบุผลประโยชน์L asparagine และ L-proline ในเจริญเติบโตของแคลลัสที่ตกลงมีรายงานก่อนหน้านี้ (Elkonin และ al., 1995) เราสังเกตเพิ่มเติมที่ให้น้ำหนักสดสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน M11APC1 (0.068 g/IE)กว่าใน M11AP (0.058 กรัม/IE), แนะนำที่ CuSO4•5H2O ที่ 1.0 μMมีผลดีต่อให้แพร่หลาย ผลลัพธ์เหล่านี้เน้นความสำคัญของความเข้มข้นที่เหมาะสมของส่วนผสมเพิ่มเติมในการเพิ่มประสิทธิภาพสื่อเหนี่ยวนำแคลลัสในข้าวฟ่าง3.2 การเพิ่มประสิทธิภาพของสื่อให้ฟื้นฟูเมื่อได้ subcultured calli มา IE บนสื่อกลางฟื้นฟูจะเปลี่ยนเป็นสีเขียวเนื้อเยื่อภายในหนึ่งสัปดาห์ (Fig. 1 d) ยวดพัฒนา calli บนกลางฟื้นฟูกับหน่วยงานกำกับดูแลการเจริญเติบโตของพืชได้อย่างมีประสิทธิภาพมากกว่าการสื่อ โดยไม่มีเจริญเติบโตของหน่วยงานกำกับดูแลการ ตัวอย่างจำนวนสูงสุดของยอดผลิต calli SA281 บน B1I1C1(72.6 ต่อ IE) (Fig. 1e และ f) ในทางตรงกันข้าม calli บน MSC1 ผลิตจำนวนยอด (20.9 ต่อ IE) น้อยที่สุด (ตาราง 3) นอกจากนี้ IAA และ BAกันได้ดีกว่า BA เพียงอย่างเดียวสำหรับ regenerability ให้เมื่อการB1I1C1 กลาง (72.6 ต่อ IE) ได้เปรียบเทียบกับ B2C1 (56.3 ต่อ IE)ส่วนผสมเพิ่มเติมในฟื้นฟูมีความสำคัญผลกระทบบน regenerability L Asparagine และ L proline เด็ก ๆ อย่างมีนัยสำคัญปรับปรุงจำนวนยอดใน B2C1AP (66.4 ต่อ IE) เป็นการเปรียบเทียบการที่ B2C1 (56.3 ต่อ IE) PVP ที่ 1 g/Lwhen เสริมในB2C1P ผลิตยิง (65.3 ต่อ IE) เป็นการเปรียบเทียบที่เพิ่มขึ้นอย่างเด่นชัดการ B2C1 ไม่ PVP (56.3 ต่อ IE) ผลลัพธ์เหล่านี้จะสอดคล้องกับรายงานก่อนหน้านี้ (Elkonin และ al., 1995 Hagio, 2002) ความเข้มข้นสูงของ CuSO4•5H2Oat1μM (ten-fold สูงกว่า MS) อย่างรวดเร็วเพิ่มผลิตยิงบน B2C1 (56.3 ต่อ IE) เมื่อเทียบกับที่ใน B2 (เป็นมูลค่า 40.6 ต่อ IE), ยืนยันผลประโยชน์ระดับสูง Cu ในข้าวฟ่างเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (Nirwan และโพธิวรคุณ 2003) โดยรวม B1I1C1มีสื่อฟื้นฟูสุด SA281 (ตาราง 3)ในระบบปัจจุบัน ฟื้นฟูราคาลดสูงสุดถึง 100% ได้ได้รับเป็นประจำจากทดสอบบรรทัด สูงกว่า 20 – 50%บันทึกก่อนหน้านี้สำหรับพันธุ์ X 4004 (Gamborg et al., 1977) ล่าสุด callusregenerability ถูกปรับปรุงให้ยอด 22.8 ต่อ IE ต้นข้าวฟ่างเป็น 3566 (โพลา et al., 2008) โดยการเปรียบเทียบ regenerability ที่ถูกเพิ่มขึ้นอย่างเด่นชัดในการทดลองของเรา มีมากกว่า 60 regenerantsผลิตจากเดียว IE ของ SA281 ภายใน 8 สัปดาห์คณะทันตแพทยศาสตร์(Fig. 1e, f, g และ h)3.3. ผลของอายุให้ให้เติบโตอย่างรวดเร็วข้าม twoweeks lineswithin ทดสอบสามของคณะทันตแพทยศาสตร์ (Fig. 1b และ c), มีการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในแคลลัสสดน้ำหนัก (ตาราง 4) อย่างไรก็ตาม การเปลี่ยนแปลงอัตราการเติบโตของแคลลัสถูกสังเกตระหว่างบรรทัดการทดสอบ SA281 ให้เติบโตได้เร็วกว่าอีกสองการเจริญเติบโตให้รวดเร็วที่สุดเกิดขึ้นระหว่างสัปดาห์ที่หนึ่ง และสองเป็นการสาธิตโดยสัปดาห์ callus (สดน้ำหนักของอัตราการเจริญเติบโตปัจจุบันสัปดาห์หาร ด้วยน้ำหนักสดของสัปดาห์ก่อนหน้า) ทั้งสองอย่างอัตราฟื้นฟู และ regenerability (ยอดต่อ IE) peaked ที่สองสัปดาห์ข้ามบรรทัดเหล่านี้ (ตาราง 4)ซึ่งแตกต่างจากข้าวเยื่อแคลลัส ที่สามารถรักษา regenerabilityกว่า 40 สัปดาห์ (Nabors et al., 1983), ข้าวฟ่างเยื่อแคลลัสไม่ไม่รักษาระดับความเป็นประโยชน์ของ regenerability ผ่าน fourweeks เหตุผลสำหรับปรากฏการณ์นี้ไม่ เป็นได้ รู้จัก ข้อมูลที่ 3 ทดสอบรายการได้แสดงว่า อายุให้ดีที่สุดคือ unequivocallyสัปดาห์ที่สองอายุ เมื่อให้ได้สี่สัปดาห์เก่า การฟื้นฟูregenerability และอัตราลดลงอย่างเด่นชัด เช่น SA281 สามารถผลิตยอด 59 ต่อ IE เมื่อให้ถูกสองสัปดาห์เก่า อย่างไรก็ตาม มันเดียวสร้างยอด 3 ต่อ IE เมื่อแคลลัสได้ 4 สัปดาห์เก่า(ตาราง 4) ดังนั้น อายุให้มีบทบาทสำคัญใน regenerabilityซึ่งให้ข้อมูลที่สำคัญสำหรับสร้างเนื้อเยื่อแข็งแรงระบบวัฒนธรรมข้าวฟ่างฟื้นฟูข้าวฟ่างในหลอดวัฒนธรรมได้อย่างมีประสิทธิภาพ มีความจำเป็นแนะนำกลยุทธ์การจัดการเพื่อลดผลของสั้นระยะเวลาของแคลลัส regenerability จำเป็นต้องเริ่มต้นอย่างต่อเนื่องIEs สดเพื่อรักษาระบบการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อมีประสิทธิภาพสูงข้าวฟ่างบรรทัด Tx430 และ SA281 สามารถเติบโตในการ temperaturecontrolledเรือนกระจกสำหรับปลูกต้นไม้ตลอดทั้งปีที่อำนวยความสะดวกในการเก็บเกี่ยวของ IEs สดตลอดเวลา ดังนั้น calli คึกคักเยื่อสามารถสร้างขึ้นอย่างต่อเนื่องทำให้ระบบการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อให้เหมาะสามารถใช้สำหรับการเปลี่ยนแปลงโดยไม่คำนึงถึงฤดูกาลเติบโตตอบเราจะขอบคุณส่วนโค้ง (สภาวิจัยออสเตรเลีย)(LP0883808) และแปซิฟิคเมล็ดพันธุ์เนชั่ลแนล จำกัดสำหรับการสนับสนุนทางการเงินเชื่อมโยงโครงการ LP0883808 เราจะขอบคุณเพื่อ GRDC (ธัญพืชวิจัยและพัฒนา บริษัท) สำหรับการให้บริการวิจัยธัญพืชทุนด้านบน (GRS10405) สุดท้ายแต่ไม่น้อย เราต้องการขอขอบคุณดร. Yue Sun และดร. Bradley Campbell สำหรับความพยายามของพวกเขาในระหว่างกระบวนการแก้ไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผลการอภิปรายและ
3.1 การเพิ่มประสิทธิภาพของการเหนี่ยวนำแคลลัสขนาดกลาง
พลังการเจริญเติบโตของแคลลัสเป็นที่สังเกตตลอดทั้งวัฒนธรรม
ระยะเวลา เพาะแคลลัสได้รับการพัฒนาอย่างรวดเร็วในทุกแปดเหนี่ยวนำ
สื่อภายในสัปดาห์แรกของการบ่ม แคลลัสอัตราการเหนี่ยวนำเป็น
ที่สูงที่สุดใน M11AP กลาง (84.0%) ตามมาด้วย M11APC1
(78.7%) แต่แคลลัสน้ำหนักสดอย่างมีนัยสำคัญที่ลดลงใน
M11AP กว่า M11APC1 (ตารางที่ 2) โดยรวม, M11APC1 ถูกพบว่า
เป็นสื่อเหนี่ยวนำแคลลัสที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับ SA281 หมู่
แปดสื่อการทดสอบ การทดลองที่คล้ายกัน preformed เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพ
สื่อเหนี่ยวนำแคลลัสสำหรับ Tx430 (รูป. 1c) และ 91419R (ข้อมูลไม่
แสดง) ผลการศึกษาพบว่า M11APC1 เป็นสื่อที่เหมาะสมสำหรับ
ทั้งสองสายเป็นอย่างดี.
แคลลัสน้ำหนักสดสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ onM11AP (0.058 กรัม / IE)
กว่า onM11 (0.030 กรัม / IE) (ตารางที่ 2) แสดงให้เห็นผลประโยชน์
ของ L-asparagine และ L-Proline ต่อการเจริญเติบโตแคลลัสซึ่งอยู่ในข้อตกลง
ที่มีรายงานก่อนหน้านี้ (Elkonin et al., 1995) เรายังตั้งข้อสังเกตว่า
แคลลัสน้ำหนักสดอย่างมีนัยสำคัญที่สูงขึ้นใน M11APC1 (0.068 กรัม / IE)
กว่า M11AP (0.058 กรัม / IE) บอกว่า CuSO4 • 5H2O ที่ 1.0 ไมครอน
มีผลในเชิงบวกต่อการขยายแคลลัส ผลการศึกษานี้เน้น
ความสำคัญของความเข้มข้นที่เหมาะสมของส่วนผสมเพิ่มเติม
เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพสื่อเหนี่ยวนำแคลลัสในข้าวฟ่าง.
3.2 การเพิ่มประสิทธิภาพของสื่อการฟื้นฟูแคลลัส
เมื่อแคลลัส IE มาถูกเชื้อในสื่อฟื้นฟู
พวกเขากลายเป็นเนื้อเยื่อสีเขียวภายในหนึ่งสัปดาห์ (รูป. 1D) ยวด
แคลลัสในสื่อการฟื้นฟูด้วยการควบคุมการเจริญเติบโตการพัฒนา
อย่างมีประสิทธิภาพมากกว่าในสื่อโดยไม่ต้องควบคุมการเจริญเติบโต ตัวอย่างเช่น
SA281 แคลลัสใน B1I1C1 ผลิตเป็นจำนวนสูงสุดของหน่อ
(72.6 ต่อ IE) (รูป. 1e และฉ) ในทางตรงกันข้ามแคลลัสใน MSC1 ผลิต
จำนวนน้อยของหน่อ (20.9 ต่อ IE) (ตารางที่ 3) นอกจากนี้ปริญญาตรีและ IAA
ร่วมกันได้ดีกว่า BA เพียงอย่างเดียวสำหรับ regenerability แคลลัสเมื่อ
B1I1C1 กลาง (72.6 ต่อ IE) เมื่อเทียบกับ B2C1 (56.3 ต่อ IE).
ส่วนผสมเพิ่มเติมในกลางมีการฟื้นฟูอย่างมีนัยสำคัญ
ส่งผลกระทบต่อ regenerability L-Asparagine และ L-Proline ส่งเสริมอย่างมีนัยสำคัญ
ในการปรับปรุงในจำนวนของการถ่ายภาพใน B2C1AP (66.4 ต่อ IE) เมื่อเทียบ
กับที่ใน B2C1 (56.3 ต่อ IE) PVP ที่ 1 กรัม / Lwhen เสริมใน
B2C1P เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดการผลิตการถ่ายทำ (65.3 ต่อ IE) เมื่อเทียบ
เพื่อ B2C1 โดยไม่ต้อง PVP (56.3 ต่อ IE) ผลลัพธ์เหล่านี้อยู่ในข้อตกลงที่มี
รายงานก่อนหน้านี้ (Elkonin, et al, 1995;. โต้ Hagio, 2002) ความเข้มข้นที่สูงขึ้น
ของ CuSO4 •5H2Oat1μM (สิบเท่าสูงกว่าใน MS) อย่างรุนแรง
ที่เพิ่มขึ้นในการผลิตการถ่าย B2C1 (56.3 ต่อ IE) เมื่อเปรียบเทียบกับ
ใน B2 (40.6 ต่อ IE) ยืนยันผลประโยชน์ในระดับสูงใน Cu
ข้าวฟ่าง การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (Nirwan และ Kothari 2003) โดยรวม, B1I1C1
เป็นสื่อกลางในการฟื้นฟูที่ดีที่สุดสำหรับ SA281 (ตารางที่ 3).
ในระบบปัจจุบันอัตราการฟื้นฟูถึง 100% ได้รับการ
ได้รับเป็นประจำจากสามบรรทัดการทดสอบสูงกว่า 20-50%
ที่บันทึกไว้ก่อนหน้านี้สำหรับพันธุ์ X4004 (Gamborg et al., 1977) เมื่อเร็ว ๆ นี้แคลลัส
regenerability ได้รับการปรับปรุงเพื่อ 22.8 ยอดต่อ IE จากบรรทัดข้าวฟ่าง
IS 3566 (Pola et al., 2008) โดยเปรียบเทียบ regenerability ได้รับการ
ปรับปรุงให้ดีขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในการทดลองของเรา; กว่า 60 เพาะถูก
ผลิตจาก IE เดียวของ SA281 ภายในบ่มแปดสัปดาห์ '
(รูป. 1E, F, G และเอช).
3.3 ผลของอายุแคลลัส
แคลลัสเติบโตอย่างรวดเร็วทั่วทั้งสามการทดสอบ lineswithin twoweeks ของ
บ่ม (รูปที่ 1b. และค) มีการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในแคลลัสสด
น้ำหนัก (ตารางที่ 4) อย่างไรก็ตามการเปลี่ยนแปลงในการเจริญเติบโตของแคลลัสได้รับการตั้งข้อสังเกต
ในหมู่สายการทดสอบ; แคลลัส SA281 เติบโตเร็วกว่าอีกสอง.
การเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วที่สุดแคลลัสที่เกิดขึ้นระหว่างหนึ่งและสองสัปดาห์ที่ผ่านมา
แสดงให้เห็นว่าอัตราการเจริญเติบโตโดยแคลลัสรายสัปดาห์ (น้ำหนักสดของ
สัปดาห์ปัจจุบันหารด้วยน้ำหนักสดของสัปดาห์ก่อนหน้า) ทั้ง
อัตราการฟื้นฟูและ regenerability (ยอดต่อ IE) แหลมที่สอง
สัปดาห์ที่ผ่านมาทั่วทั้งสามสาย (ตารางที่ 4).
ซึ่งแตกต่างจากข้าวเพาะแคลลัสซึ่งสามารถรักษา regenerability
มากกว่า 40 สัปดาห์ (Nabors et al., 1983), ข้าวฟ่างแคลลัสเพาะไม่
ได้ดูแล ระดับการใช้งานของ regenerability กว่า fourweeks เหตุผล
สำหรับปรากฏการณ์นี้เป็นยังไม่รู้จัก ข้อมูลของเราจากสามการทดสอบ
แสดงให้เห็นถึงเส้นอย่างแจ่มแจ้งว่าอายุแคลลัสที่ดีที่สุดคือ
สองสัปดาห์ เมื่อแคลลัสเป็นสี่สัปดาห์ฟื้นฟู
และอัตราการลดลงอย่างเห็นได้ชัด regenerability ยกตัวอย่างเช่น SA281 สามารถ
ผลิต 59 ยอดต่อ IE เมื่อแคลลัสเป็นสองสัปดาห์; แต่ก็
เพียงสร้าง 3 ยอดต่อ IE เมื่อแคลลัสเป็นสี่สัปดาห์
(ตารางที่ 4) ดังนั้นอายุแคลลัสมีบทบาทสำคัญใน regenerability,
ซึ่งมีข้อมูลที่สำคัญสำหรับการสร้างเนื้อเยื่อที่แข็งแกร่ง
ระบบวัฒนธรรมข้าวฟ่าง.
อย่างมีประสิทธิภาพข้าวฟ่างงอกใหม่ในวัฒนธรรมการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อจึงมีความจำเป็น
ที่จะแนะนำกลยุทธ์การจัดการเพื่อลดผลกระทบของระยะสั้น
ระยะเวลาของแคลลัส regenerability มันเป็นสิ่งที่จำเป็นอย่างต่อเนื่องเริ่มต้น
IEs ใหม่เพื่อรักษาระบบการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อที่มีประสิทธิภาพสูง.
สายข้าวฟ่างเช่น Tx430 และ SA281 สามารถเจริญเติบโตได้ใน temperaturecontrolled
เรือนกระจกตลอดทั้งปีอำนวยความสะดวกในการเก็บเกี่ยว
ของ IEs สดในเวลาใดก็ได้ ดังนั้นแคลลัสเพาะแข็งแรงสามารถ
สร้างขึ้นอย่างต่อเนื่องช่วยให้ระบบการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อที่ดีที่สุดที่จะ
นำไปใช้สำหรับการเปลี่ยนแปลงโดยไม่คำนึงถึงการเจริญเติบโตของฤดูกาล.
กิตติกรรมประกาศ
พวกเราขอบคุณที่ ARC (ออสเตรเลียสภาวิจัย)
(LP0883808) และ บริษัท แปซิฟิคเมล็ดพันธุ์ จำกัด Pty. สำหรับการเงินของพวกเขา การสนับสนุน
ในโครงการเชื่อมโยง LP0883808 นอกจากนี้เรายังรู้สึกขอบคุณ GRDC (ธัญพืช
วิจัยและพัฒนาคอร์ปอเรชั่น) สำหรับการให้ธัญพืชวิจัย
ทุนการศึกษา Top-Up (GRS10405) สุดท้าย แต่ไม่น้อยที่เราอยากจะ
ขอขอบคุณดร. ยูดวงอาทิตย์และดร. แบรดลีย์แคมป์เบลสำหรับความพยายามของพวกเขาในระหว่าง
กระบวนการแก้ไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . ผลและการอภิปราย
3.1 . การเพิ่มประสิทธิภาพของ callus induction medium
แข็งแรงการเจริญเติบโต ของแคลลัสพบตลอดระยะเวลาการเลี้ยง
ทั้งหมด เลี้ยงแคลลัสที่พัฒนาอย่างรวดเร็วในสื่อแปดเหนี่ยว
ทั้งหมดภายในสัปดาห์แรกของการบ่ม อัตราสูงสุดที่ชักนำได้
m11ap ขนาดกลาง ( 84.0 % ) รองลงมา คือ m11apc1
( 78.7 เปอร์เซ็นต์ ) อย่างไรก็ตาม น้ำหนักสดแคลลัสลดลงบน
m11ap กว่า m11apc1 ( ตารางที่ 2 ) รวม m11apc1 พบ

จะมีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับ sa281 callus induction medium ในหมู่
8 สื่อทดสอบ การทดลองที่คล้ายกันถูก preformed เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการ tx430
ลัสสื่อ ( ภาพที่ 1c ) และ 91419r ( ข้อมูลไม่
แสดง ) ผลการศึกษาพบว่า m11apc1 เป็นอาหารที่เหมาะสมสำหรับ

ทั้งสองเส้นได้เป็นอย่างดีอาหารน้ำหนักสดสูงกว่า onm11ap ( 0.056 กรัม / IE )
กว่า onm11 ( 0.030 กรัม / IE ) ( ตารางที่ 2 ) แสดงผลและประโยชน์ของโพร
Name ในการเจริญเติบโต ของแคลลัสซึ่งอยู่ในข้อตกลง
กับรายงานก่อนหน้า ( elkonin et al . , 1995 ) เราสังเกตต่อไปว่า น้ำหนักสด
ลัสสูงกว่าใน m11apc1 ( 0.068 กรัม / IE )
กว่า m11ap ( 0.056 กรัม / IE )แนะนำว่า CuSO4 - อิเล็กที่ 1.0 μ M
มีผลบวกต่อแคลลัสของการแพร่เชื้อ ผลลัพธ์เหล่านี้เน้นความสำคัญของเหมาะสม

ส่วนประกอบเพิ่มเติมสำหรับการเพิ่มความเข้มข้นของชักนำขนาดกลาง ในข้าวฟ่าง
3.2 . การเพิ่มประสิทธิภาพของแคลลัสขนาดกลาง
เมื่อ IE ได้แคลลัสบน regeneration medium
subcultured , พวกเขากลายเป็นเนื้อเยื่อสีเขียวภายในหนึ่งสัปดาห์ ( ฟิค1D ) บริษัทแคลลัสบน regeneration medium

ด้วยสารควบคุมการเจริญเติบโตพัฒนาได้อย่างมีประสิทธิภาพมากกว่าในสื่อโดยไม่ต้องสารควบคุมการเจริญเติบโต ตัวอย่างเช่น
sa281 แคลลัสบน b1i1c1 ผลิตจำนวนสูงสุดของยอด
( ดอกเบี้ยต่อ IE ) ( ภาพที่ 1e และ F ) ในทางตรงกันข้าม , แคลลัสบน msc1 ผลิต
อย่างน้อยจำนวนหน่อ ( 20.9 ต่อ IE ) ( ตารางที่ 3 ) นอกจากนี้ บา และ IAA
ด้วยกันดีกว่า BA คนเดียวส่วน regenerability เมื่อ
กลาง b1i1c1 ( ดอกเบี้ยต่อ IE ) เมื่อเทียบกับ b2c1 ( 56.3 ต่อ IE )
เพิ่มเติมส่วนผสมในการปฏิรูปสื่อมีผลกระทบต่อ regenerability
. และการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญ
โพร Name ( ในจํานวนยอด b2c1ap ( 66.4 ต่อ IE ) โดยเมื่อ
นั้น b2c1 ( 56.3 ต่อ IE )PVP ที่ 1 g / lwhen เสริมในการผลิตเพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัด
b2c1p ยิง ( การดำเนินงานต่อ IE ) เมื่อเทียบกับ b2c1
โดยไม่ PVP ( 56.3 ต่อ IE ) ผลลัพธ์เหล่านี้อยู่ในข้อตกลงกับ
รายงานก่อนหน้า ( elkonin et al . , 1995 ; hagio , 2002 ) มีความเข้มข้นสูงของ CuSO4 5h2oat1 μ
- M ( สิบเท่าสูงกว่าใน MS ) อย่างมาก
ปรับปรุงการผลิตยิง b2c1 ( 56.3 ต่อ IE ) เมื่อเทียบกับที่
ใน B2 ( 406 ต่อ IE ) , ยืนยันผลประโยชน์ของระดับทองแดงสูง
ข้าวฟ่างเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ( nirwan และ kothari , 2003 ) รวม b1i1c1
สุดยอดการฟื้นฟู ขนาดกลาง sa281 ( ตารางที่ 3 ) .
ในระบบปัจจุบันที่งอกเพิ่มขึ้นถึง 100% ได้
ตรวจได้จากสามทดสอบเส้นที่สูงกว่า 20 – 50%
บันทึกก่อนหน้านี้สำหรับพันธุ์ x4004 ( Gamborg et al . , 1977 ) แคลลัส
เมื่อเร็วๆ นี้regenerability ดีขึ้นถึง 22.8 ยอดต่อ IE จาก
สายข้าวฟ่างเป็น 2376 ( Pola et al . , 2008 ) โดยการเปรียบเทียบ , regenerability คือ
การปรับปรุงอย่างเด่นชัดในการทดลองของเรา กว่า 60 regenerants ถูก
ผลิตจาก IE เดียวของ sa281 ภายใน 8 สัปดาห์ 4
( รูปที่ 1e , F , G และ H )
3 . ผลของแคลลัสอายุ
ลัสอย่างรวดเร็วขยายตัวทั่วสามทดสอบ lineswithin twoweeks
( รูปของการบ่ม1B และ C ) กับผลการเพิ่มน้ำหนักสดแคลลัส
( ตารางที่ 4 ) อย่างไรก็ตาม การเปลี่ยนแปลงในการพัฒนาของแคลลัสจาก
ในการทดสอบเส้น sa281 ลัสเติบโตเร็วกว่าอีกสอง การเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วที่สุด
แคลลัสที่เกิดขึ้นระหว่างหนึ่งและสองสัปดาห์โดยสัปดาห์
แสดงให้เห็นการเจริญเติบโต ของแคลลัส Ratio ( น้ำหนักสดของ
สัปดาห์ปัจจุบันหารด้วยน้ำหนักสดของสัปดาห์ก่อนหน้า ) ทั้ง
อัตราการฟื้นฟู และ regenerability ( ยอดต่อ IE ) ที่บ้านสอง
สัปดาห์ข้ามเหล่านี้สามบรรทัด ( ตารางที่ 4 ) .
ซึ่งแตกต่างจากข้าว เลี้ยงแคลลัสที่สามารถรักษา regenerability
กว่า 40 สัปดาห์ ( Nabors et al . , 1983 ) , ข้าวฟ่างเลี้ยงแคลลัสไม่
ไม่รักษาระดับประโยชน์ของ regenerability กว่า fourweeks . เหตุผลสำหรับปรากฏการณ์นี้คือ
เป็นยังไม่ทราบ ข้อมูลจากสามทดสอบ
สายที่ชัดเจนแสดงให้เห็นว่าอายุแคลลัสที่เหมาะสมคือ
สองอาทิตย์ เมื่อแคลลัสคือสี่สัปดาห์เก่าและใหม่
regenerability อัตราลดลงอย่างเห็นได้ชัด ตัวอย่าง sa281 อาจ
ผลิต 59 ยอดต่อแคลลัสคือ IE เมื่อสองสัปดาห์เก่า อย่างไรก็ตาม เพียงสร้าง 3
ยอดต่อแคลลัสคือเมื่อสี่สัปดาห์เก่า
( ตารางที่ 4 ) ดังนั้นแคลลัสอายุมีบทบาทสำคัญใน regenerability
, ซึ่งมีข้อมูลที่สำคัญสำหรับการสร้างเนื้อเยื่อใหม่

วัฒนธรรมระบบข้าวฟ่าง ข้าวฟ่างในหลอดทดลองให้มีประสิทธิภาพ สร้างวัฒนธรรม มันขวาง
แนะนำกลยุทธ์ในการจัดการเพื่อลดผลกระทบของระยะเวลาสั้น ๆของแคลลัส regenerability
. มันเป็นสิ่งจำเป็นเพื่อเริ่มต้น
อย่างต่อเนื่องสด IES เพื่อรักษาประสิทธิภาพสูงระบบการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ .
ข้าวฟ่างบรรทัด เช่น tx430 และ sa281 สามารถเจริญเติบโตได้ใน temperaturecontrolled
) ตลอดทั้งปีที่เอื้อต่อการเก็บเกี่ยว
ของ IES สดตลอดเวลา ดังนั้น แข็งแรง เลี้ยงแคลลัสที่สามารถสร้างขึ้นอย่างต่อเนื่องให้เหมาะสม


ระบบเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อจะใช้สำหรับการเปลี่ยนแปลงโดยไม่คำนึงถึงฤดูกาลปลูก .

ขอบคุณ เราขอบคุณ ARC ( สภาวิจัย )
( lp0883808 ) และแปซิฟิกเมล็ด Pty . จำกัด สนับสนุนทางการเงินของพวกเขาใน lp0883808
โครงการเชื่อมโยง . เรายังรู้สึกขอบคุณ grdc ( บริษัทพัฒนา&การวิจัยธัญพืช
) สำหรับการให้ทุนการวิจัย
ธัญพืชขึ้นด้านบน ( grs10405 ) สุดท้ายแต่ไม่ท้ายสุดเราก็ชอบ

ขอบคุณหมอเย่ซัน และ ดร. แบรดลี่ย์ แคมป์เบลล์ สำหรับความพยายามของพวกเขาในระหว่าง
แก้ไขกระบวนการ