The oil
phase was equilibrated with BG11 medium beforehand by mixing
dodecane and BG-11 medium at a ratio of 1:1 by volume, followed
by three periods of centrifugation at 5000g. Cell growth in each
micro-compartmentalized droplet was evaluated by detecting cell
autofluorescence (chlorophyll a and phycocyanin) using fluorescence
microscopy. To detect autofluorescence, an excitation filter
(520–550 nm), a dichroic mirror (565 nm) and an emission filter
(580 nm) were used. The analysis of acquired images was
performed using an EMCCD camera (Luca 658496 pix, Andor
Technology Ltd., Belfast, U.K.) and image analysis software (Andor
IQ, Andor Technology Ltd.). The fluorescence images were taken
under the condition that no signalwas detected in a droplet lacking
cells.We assessed the red points, which were supposed to indicate
cells in the fluorescence images. After that, the cells in phase
difference images were counted. The specific growth rate of
droplet cultures was compared with that of normal liquid cultures
without dodecane in 18mm test tubes.
น้ำมัน
ระยะคือ equilibrated กับ bg11 กลางก่อน โดยการผสมกับอาหารที่ bg-11
โดดีเคนในอัตราส่วน 1 : 1 โดยปริมาตร ตาม
3 รอบ 3 ที่ 5000 กรัม การเจริญเติบโตของเซลล์ในแต่ละหยด
ไมโคร compartmentalized ที่ประเมินโดยตรวจหาเซลล์
autofluorescence ( ปริมาณคลอโรฟิลล์ เอ และไฟโคไซยานิน ) โดยใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงด้วย
ตรวจสอบ autofluorescence , แผ่นกรอง
( 1 ) 550 นาโนเมตร ) , กระจก Dichroic ( 810 nm ) และการปล่อยกรอง
( 580 nm ) สถิติที่ใช้ การวิเคราะห์การใช้ภาพที่ได้มา
emccd กล้อง ( ลูก้า แล้ว 496 PIX , Anchor
เทคโนโลยีจำกัด , กลาสโกว์ , UK ) และซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ภาพ ( Anchor
IQ , Anchor เทคโนโลยี จำกัด ) เรืองแสงด้วยภาพถ่าย
ภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ signalwas ตรวจพบในช่วงขาด
เซลล์เราประเมินจุดสีแดงซึ่งควรจะระบุ
เซลล์ในการภาพ หลังจากนั้นเซลล์ในรูปของเฟสแตกต่าง
ถูกนับ โดยเฉพาะอัตราการเติบโตของวัฒนธรรม
หยดเมื่อเทียบกับที่ของ
วัฒนธรรมเหลวปกติโดยไม่โดดีเคนในหลอดทดลอง 18mm .
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)