2.5. Furosine determinationDetermin

2.5. Furosine determination
Determination of furosine in the LF-UHT milks and LF-UHT
dairy drinks was performed by ion-pair RP-HPLC following the
method of Resmini et al. (1990). Before analysis, samples (2 mL)
were hydrolyzed with 6 mL of 10.6 N HCl under inert conditions at
110 8C for 24 h in a Pyrex screw-cap vial with PTFE-faced septa. The
hydrolyzate was filtered through Whatman No. 40 filter paper and
0.5 mL of filtrate was applied to a previously activated (methanol
and water) Sep-Pak C18 cartridge (Millipore). Furosine was eluted
with 3 mL of 3 N HCl and 50 mL was injected into the chromatograph.
RP-HPLC analysis of furosine was carried out in a C8 column
(250 mm  4.6 mm, 5 mm) (Alltech furosine-dedicated, Nicolasville,
KY) maintained at 35 8C using a linear binary gradient at a
flow rate of 1.2 mL/min. Mobile phase was constituted by solvent
A, 0.4% acetic acid, and solvent B, 0.3% KCl in phase A. The elution
program was as follows: 100% A from 0 to 12 min, 50% A from 20 to 22.5 min, and 100% A from 24.5 to 30 min. Detection was
performed using a variable wavelength UV detector at 280 nm
(LDC Analytical, SM 4000, Salem, NH). Acquisition and processing
of data were achieved with a HPChem Station (Hewlett-Packard)
software. Quantification was performed by the external standard
method, using a commercial standard of pure furosine (Neosystem
Laboratories, Strasbourg, France). All analyses were done in
duplicate, and the data are the mean values expressed as
milligrams of furosine per kg of protein.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 กำหนด Furosineกำหนด furosine milks LF-ยูเอชทีและ LF-ยูเอชทีทำเครื่องดื่มนมคู่ไอออน RP HPLC ตามวิธีของ Resmini et al. (1990) ก่อนการวิเคราะห์ ตัวอย่าง (2 mL)ถูก hydrolyzed กับ mL 6 ของ 10.6 N HCl inert สภาวะที่110 8C สำหรับ 24 ชมในคอนแทคแบบสกรูฝา Pyrex มี septa PTFE ประสบการ ที่hydrolyzate เป็นกรองโดยใช้กระดาษกรอง Whatman หมายเลข 40 และ0.5 mL ของสารกรองที่ใช้เปิดใช้งานก่อนหน้านี้ (เมทานอลและน้ำ) ตลับ C18 Sep-ปาก (มาก) Furosine เป็น eluted3 mL ของ 3 N HCl และ 50 mL ถูกฉีดเข้า chromatographวิเคราะห์ RP HPLC furosine ทำออกมาในคอลัมน์ C8(250 mm 4.6 mm, 5 mm) (Alltech furosine อุทิศ NicolasvilleKY) รักษาที่ 35 8C ใช้ไล่ฐานเชิงเส้นที่มีอัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่ 1.2 mL/นาที ถูกทะลัก โดยตัวทำละลาย% A, 0.3, 0.4% กรดอะซิติกและตัวทำละลาย B, KCl ในระยะอ. Elution ที่โปรแกรมมีดังนี้: 100% A 0 12 นาที 50% A 20 ไป 22.5 นาที และ 100% A จาก 24.5 30 นาทีตรวจสอบได้ใช้จับตัวแปรความยาวคลื่น UV ที่ 280 nm(LDC วิเคราะห์ SM 4000, Salem เอ็น) ซื้อสินทรัพย์และการประมวลผลข้อมูลความสำเร็จกับสถานี HPChem (Hewlett-Packard)ซอฟต์แวร์ ทำการนับตามมาตรฐานภายนอกวิธี โดยใช้มาตรฐานทางการค้าของบริสุทธิ์ furosine (Neosystemห้องปฏิบัติการ สตราสบูร์ก ฝรั่งเศส) วิเคราะห์ทั้งหมดทำในซ้ำ และข้อมูลจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ยmilligrams ของ furosine ต่อกิโลกรัมของโปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 ความมุ่งมั่นฟูโรซีน
การกำหนดฟูโรซีนในนมยูเอชที LF-และ LF-ยูเอชที
ดื่มนมได้รับการดำเนินการโดยไอออนคู่ RP-HPLC ต่อไปนี้
วิธีการ Resmini และคณะ (1990) ก่อนการวิเคราะห์ตัวอย่าง (2 มิลลิลิตร)
ด้วยเอนไซม์ที่มี 6 มล 10.6 N HCl ภายใต้เงื่อนไขเฉื่อยที่
110 8C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงใน Pyrex ขวดสกรูฝาครอบด้วย PTFE ต้องเผชิญกับ SEPTA
ไฮโดรไลถูกกรองผ่าน Whatman ฉบับที่ 40 กระดาษกรองและ
0.5 มิลลิลิตรกรองที่ถูกนำไปใช้กับการเปิดใช้งานก่อนหน้านี้ (เมทานอล
และน้ำ) ก.ย. ปาก C18 ตลับหมึก (ค) ฟูโรซีนถูกชะ
3 มิลลิลิตร 3 N HCl และ 50 มลถูกฉีดเข้าไปใน Chromatograph.
วิเคราะห์ RP-HPLC ของฟูโรซีนได้ดำเนินการในคอลัมน์ C8
(250 มม? 4.6 มม, 5 มม) (ออลเทคฟูโรซีน-ทุ่มเท Nicolasville,
KY) ไว้ที่ 35 8C ใช้ไบนารีลาดเชิงเส้นที่
อัตราการไหล 1.2 มิลลิลิตร / นาที เฟสเคลื่อนที่เป็นองค์ประชุมโดยตัวทำละลาย
, 0.4% กรดอะซิติกและ B ตัวทำละลาย 0.3% KCl ในขั้นตอน A. ชะ
โปรแกรมมีดังนี้ 100% 0-12 นาที, 50% 20-22.5 นาทีและ 100% 24.5-30 นาที การตรวจสอบได้รับการ
ดำเนินการโดยใช้ความยาวคลื่นตัวแปรเครื่องตรวจจับรังสียูวีที่ 280 นาโนเมตร
(LDC วิเคราะห์ SM 4000, ซาเลม, NH) การเข้าซื้อกิจการและการประมวลผล
ของข้อมูลที่ได้ประสบความสำเร็จกับสถานี HPChem (Hewlett-Packard)
ซอฟแวร์ ปริมาณที่ได้ดำเนินการโดยมาตรฐานภายนอก
วิธีการใช้มาตรฐานการค้าของฟูโรซีนบริสุทธิ์ (Neosystem
ห้องปฏิบัติการ, สบูร์ก, ฝรั่งเศส) การวิเคราะห์ทั้งหมดได้ทำใน
ที่ซ้ำกันและข้อมูลที่มีค่าเฉลี่ยแสดงเป็น
มิลลิกรัมต่อกิโลกรัมฟูโรซีนของโปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การหาปริมาณ
furosine ของ furosine ใน lf-uht milks และ lf-uht
นมเครื่องดื่มโดยใช้ๆไอออนคู่ต่อไปนี้
วิธี resmini et al . ( 1990 ) ก่อนการวิเคราะห์ ตัวอย่าง ( 2 มล. )
ถูกไฮโดรไลซ์ด้วย 6 มิลลิลิตร จำนวน N HCl ภายใต้สภาวะเฉื่อยที่
110 8C 24 ชั่วโมง Pyrex สกรูฝาขวดกับ PTFE เผชิญของ
hydrolyzate ถูกกรองผ่าน whatman ไม่40 ตัวกรองกระดาษ
0.5 ml ของการกรองใช้ก่อนหน้านี้ใช้งาน ( เมทานอล
และน้ำ ) ก.ย. ปาก c18 ตลับ ( มิลลิ ) furosine คือตัวอย่าง
3 ml 3 N HCl และ 50 มล. ฉีดเข้าโครมาโตกราฟ .
การวิเคราะห์ๆของ furosine ได้ดําเนินการในคอลัมน์ขนาด C8
( 250 มม.  4.6 มม. 5 มม. ) ( เพราะ furosine ทุ่มเท nicolasville
, ,KY ) ไว้ที่ 35 8C โดยใช้เส้น ไล่ระดับทวิภาคที่
1.2 มิลลิลิตร / นาที อัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่เป็น constituted โดยตัวทำละลาย
, 1% กรดอะซิติกและสารละลาย B . 0.3% ในเฟส A (
โปรแกรมดังนี้ 100% จาก 0 ถึง 12 นาที , 50 % จาก 20 ถึง 22.5 มินและ 100% จาก 30 นาที ยังสามารถดำเนินการโดยใช้แสง UV
ตัวตรวจจับที่ 280 nm
( LDC วิเคราะห์SM 4000 , Salem , NH ) การได้มาและการประมวลผลข้อมูลได้ด้วย

hpchem สถานี ( Hewlett Packard ) ซอฟต์แวร์ ปริมาณในการใช้วิธีการมาตรฐาน
ภายนอกโดยใช้มาตรฐานทางการค้าของบริสุทธิ์ furosine ( neosystem
ห้องปฏิบัติการ , สตราสบูร์ก , ฝรั่งเศส ) ทั้งหมดทำในการวิเคราะห์
ซ้ำและข้อมูลเป็นค่าเฉลี่ยแสดงเป็น
มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม furosine
ของโปรตีน