Dynamic follow up and analysis of i

Dynamic follow up and analysis of isolated single cells that display non-adhering behavior is hinderedby the fact that they float in the suspension medium and thus requires the implementation of systemsthat physically entrap the cells for successful analysis. We describe the potential of digital microfluidic(DMF) chip technology for conducting analysis of cells in suspension at the single cell resolution. Morespecifically, we demonstrate the use of DMF technology for the analysis of a group of single individualprotoplasts from Arabidopsis thaliana plants that are labeled with magnetic particles and are immobilizedon the DMF chip by magnetic forces. By transporting droplets with different osmotic conditions to thesite where the cells are trapped, we challenge the cells and monitor their responses dynamically witha camera. The use of DMF technology for performing water potential measurements has the followingadvantages: (i) solid particles such as cells and magnetic beads are manipulated on the chip without therisk of clogging channels, (ii) low shear stress during droplet unit operations like mixing and transportthat characterize DMF are particularly suited for analysis of delicate cells types that lack cell walls such asprotoplasts, (iii) the throughput of the analysis is strongly increased as multiple protoplasts are analyzedsimultaneously, in contrast with the traditional methods that can handle and challenge only one cellat a time. We show that the DMF analysis platform is effective in creating the steep osmotic gradientsrequired for calculation of water permeability coefficients (P) as the values found are comparable withpreviously reported ones thus validating the suitability of the technology for such studies. This workillustrates a proof of concept for the applicability of DMF as an unparalleled and promising system forimplementing single cells studies on non-adhering cells in an automated way.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ติดตามแบบไดนามิกและการวิเคราะห์ของเดี่ยวแยกเซลล์ที่แสดงลักษณะที่ไม่ยึดมั่น hinderedby ความจริงที่ว่าพวกเขาลอยในการระงับ และจึง ต้องการใช้งานของ systemsthat จริงล่อให้เซลล์สำหรับการวิเคราะห์ความสำเร็จ เราอธิบายศักยภาพของเทคโนโลยีดิจิตอล microfluidic(DMF) สำหรับการวิเคราะห์ของเซลล์ในช่วงล่างที่ละเอียดเซลล์เดียว Morespecifically เราใช้เทคโนโลยี DMF สำหรับการวิเคราะห์ของ individualprotoplasts เดียวจาก Arabidopsis thaliana พืชที่ติดป้ายชื่อ ด้วยอนุภาคแม่เหล็ก และ immobilizedon ชิ DMF โดยกองกำลังของแม่เหล็ก โดยหยดกับน้ำแตกต่างกันไป thesite ที่เซลล์ที่ติดอยู่ที่ขนส่ง เราท้าทายเซลล์ และตรวจสอบการตอบรับแบบไดนามิก ด้วยกล้อง ของ DMF เทคโนโลยีการวัดค่าน้ำที่อาจเกิดขึ้นได้ followingadvantages: (i) เป็นอนุภาคของแข็งเช่นลูกปัดแม่เหล็กและเซลล์จะจัดการในชิปโดย therisk ของอุดตันช่อง ความเค้นแรงเฉือน (ii) ต่ำในระหว่างการดำเนินงานของหน่วยหยดเช่นผสมและ transportthat ลักษณะ DMF จะเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการวิเคราะห์อ่อนเซลล์ชนิดที่ไม่มีผนังเซลล์เช่น asprotoplasts , (iii) อัตราความเร็วของการวิเคราะห์จะขอเพิ่มเป็นพลาสต์หลาย analyzedsimultaneously สีวิธีดั้งเดิมที่สามารถจัดการ และท้าทาย cellat เดียวกัน เราแสดงที่เวทีวิเคราะห์ DMF มีประสิทธิภาพในการสร้าง gradientsrequired น้ำชันสำหรับการคำนวณน้ำสัมประสิทธิ์การซึมผ่าน (P) ค่าที่พบนี้ใกล้เคียง withpreviously รายงานคนจึง ตรวจสอบความเหมาะสมของเทคโนโลยีการศึกษาดังกล่าว Workillustrates ที่นี้หลักฐานของแนวคิดมาสของ DMF เป็นการศึกษาระบบสำรอง และสัญญา forimplementing เซลล์เดียวในเซลล์ที่ไม่ได้ยึดมั่นในวิธีการอัตโนมัติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แบบไดนามิกติดตามและวิเคราะห์ของเซลล์เดียวที่แยกที่จะแสดงผลที่ไม่ยึดมั่นในพฤติกรรม hinderedby ความจริงที่ว่าพวกเขาลอยอยู่ในกลางระงับและดังนั้นจึงต้องมีการดำเนินการของ systemsthat ร่างกายดักจับเซลล์สำหรับการวิเคราะห์ที่ประสบความสำเร็จ เราอธิบายศักยภาพของไมโครดิจิตอล (DMF) เทคโนโลยีชิปสำหรับการดำเนินการวิเคราะห์ของเซลล์ในการระงับความละเอียดเซลล์เดียว Morespecifically เราแสดงให้เห็นถึงการใช้เทคโนโลยีกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติสำหรับการวิเคราะห์ของกลุ่ม individualprotoplasts เดียวจากพืช Arabidopsis thaliana ที่ถูกกำกับด้วยอนุภาคแม่เหล็กและชิป immobilizedon DMF โดยกองกำลังแม่เหล็กที่ การขนส่งโดยหยดที่มีเงื่อนไขที่แตกต่างกันในการออสโมติก thesite ที่เซลล์จะถูกขังอยู่เราท้าทายเซลล์และตรวจสอบการตอบสนองของพวกเขาแบบไดนามิก witha กล้อง การใช้เทคโนโลยีกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติสำหรับการดำเนินการน้ำวัดที่มีศักยภาพมี followingadvantages: (i) อนุภาคของแข็งเช่นเซลล์และลูกปัดแม่เหล็กจะจัดการบนชิปโดยไม่ต้อง therisk ของการอุดตันช่องทาง (ii) ขจัดความเครียดต่ำระหว่างการดำเนินการของหน่วยหยดเช่นการผสมและ transportthat ลักษณะ DMF เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการวิเคราะห์ชนิดของเซลล์ที่ละเอียดอ่อนที่ขาดผนังเซลล์ asprotoplasts ดังกล่าว (iii) การส่งผ่านของการวิเคราะห์จะเพิ่มขึ้นอย่างมากเป็นโปรโตพลาหลาย analyzedsimultaneously ในทางตรงกันข้ามกับวิธีการแบบดั้งเดิมที่สามารถจัดการและความท้าทายเพียงหนึ่ง cellat เวลา. เราแสดงให้เห็นว่าแพลตฟอร์มการวิเคราะห์กรมเชื้อเพลิงธรรมชาติที่มีประสิทธิภาพในการสร้างออสโมติกสูงชัน gradientsrequired ในการคำนวณค่าสัมประสิทธิ์การซึมผ่านของน้ำ (P) เป็นค่าที่พบจะเปรียบคนรายงาน withpreviously ดังนั้นการตรวจสอบความเหมาะสมของเทคโนโลยีสำหรับการศึกษาดังกล่าว นี้ workillustrates หลักฐานการแนวคิดสำหรับการบังคับใช้ของกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติเป็นที่เหนือชั้นและมีแนวโน้มของระบบการศึกษา forimplementing เซลล์เดียวบนเซลล์ที่ไม่ยึดมั่นในทางอัตโนมัติ