Cellulase activity was detected in

Cellulase activity was detected in four peak fractions (P-1–P-4) in TOYOPEARL CM-650M chromatography performed for the proteins obtained by the ammonium sulfate fractionation (Figure 1). The N-terminal amino-acid sequences of major proteins in P-1–P-4 fractions were analyzed with the samples blotted to PVDF membranes after SDS-PAGE. According to BLAST search analyses, the 40 kDa protein in P-1 fraction (N-terminal sequence: RLHIQNGHFVLNGQRVFLSG) was identified as A. kurodai β-mannanase AkMan (Zahura et al., 2010). The 21 kDa protein in P-2 fraction (N-terminal sequence: EQKCQPNSHGVRVYQGKKCA) was considered to be a GHF45 cellulase corresponding to 21K cellulase previously reported by Tsuji et al. (2013). The 45 kDa protein in P-4 fraction (N-terminal sequence: AKNYGQALGLSIKFYEAQ) was regarded as a GHF9 cellulase similar to H. discus hannai HdEG66 (Suzuki et al., 2003) and 45K cellulase reported by Tsuji et al. (2013). While 38 kDa protein (N-terminal sequence: RLTVSGKTFRLNNQQVFLSG) was regarded as the β-mannanase-like protein that had been annotated in A. california genome (GenBank accession number, XP_005100017). The 21 kDa cellulase in P-2 fraction was recovered in high yield, while the GHF9-type cellulase in P-4 fraction poorly recovered. The GHF9-type cellulase exhibited similar properties as abalone cellulase HdEG66 (Suzuki et al., 2003) and Aplysia 66K cellulase (Tsuji et al., 2013). Therefore, in the present study, we focused on the 21 kDa cellulase in P-2 fraction to characterize it as a GHF45 cellulase.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พบกิจกรรม cellulase สี่ยอดบางส่วน (P-1 – P-4) ใน TOYOPEARL ซม. - 650M chromatography สำหรับโปรตีนที่ได้รับ โดยแยกส่วนแอมโมเนียซัลเฟต (รูปที่ 1) ลำดับกรดอะมิโนเอ็นเทอร์มินัลของโปรตีนสำคัญในส่วน P-1 – P-4 ได้วิเคราะห์กับตัวอย่างที่ blotted หลังจาก SDS หน้าเพื่อสาร PVDF ตามระเบิดค้นวิเคราะห์ โปรตีน 40 kDa ใน P-1 เศษ (ลำดับสถานี N: RLHIQNGHFVLNGQRVFLSG) ระบุเป็น A. kurodai β mannanase AkMan (Zahura et al., 2010) โปรตีน 21 kDa ใน P-2 เศษ (ลำดับสถานี N: EQKCQPNSHGVRVYQGKKCA) ถือเป็น cellulase GHF45 ที่สอดคล้องกับก่อนหน้านี้ รายงานโดย Tsuji et al. (2013) cellulase 21K โปรตีน 45 kDa ในเศษ 4 P (ลำดับสถานี N: AKNYGQALGLSIKFYEAQ) ได้ถือว่าเป็นความ GHF9 cellulase คล้ายกับ H. ปลาปอมปาดัวร์ hannai HdEG66 (ซูซูกิและ al., 2003) และ cellulase 45K รายงานโดย Tsuji et al. (2013) ในขณะที่ 38 kDa โปรตีน (ลำดับสถานี N: RLTVSGKTFRLNNQQVFLSG) ได้ถือเป็นโปรตีนβ mannanase เหมือนที่มีการใส่คำอธิบายประกอบในแคลิฟอร์เนีย A. จีโนม (GenBank เลขทะเบียน XP_005100017) Cellulase kDa 21 ใน P-2 เศษถูกกู้คืนผลตอบแทนสูง ขณะ cellulase GHF9 ชนิดใน 4 P ส่วนงานการกู้คืน Cellulase GHF9 ชนิดจัดแสดงคุณสมบัติคล้ายเป็นเป๋าฮื้อ cellulase HdEG66 (ซูซูกิและ al., 2003) และ cellulase Aplysia 66K (Tsuji et al., 2013) ดังนั้น ในการศึกษาปัจจุบัน เราเน้น cellulase kDa 21 ใน P-2 เศษลักษณะเป็น GHF45 cellulase

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมเซลลูเลสถูกตรวจพบในสี่เศษส่วนสูงสุด (P-1-P-4) ใน TOYOPEARL โค CM-650M ดำเนินการสำหรับโปรตีนที่ได้จากการแยกแอมโมเนียมซัลเฟต (รูปที่ 1) N-ขั้วลำดับกรดอะมิโนของโปรตีนที่สำคัญใน P-1-P-4 เศษส่วนวิเคราะห์กับตัวอย่างเปื้อนที่แผ่นเยื่อ PVDF หลังจาก SDS-PAGE ตามการวิเคราะห์ค้นหาระเบิดโปรตีน kDa 40 P-1 ส่วน (ลำดับ n- ขั้ว: RLHIQNGHFVLNGQRVFLSG) ถูกระบุว่าเป็นเอ kurodai β-mannanase Akman (. Zahura et al, 2010) โปรตีน 21 kDa ในส่วน P-2 (ลำดับ n- ขั้ว: EQKCQPNSHGVRVYQGKKCA) ได้รับการพิจารณาให้เป็น GHF45 เซลลูเลสที่สอดคล้องกับเซลลู 21K รายงานก่อนหน้านี้โดยซูจิ et al, (2013) 45 กิโลดาลตันโปรตีนใน P-4 ส​​่วน (ลำดับ n- ขั้ว: AKNYGQALGLSIKFYEAQ) ถูกมองว่าเป็น GHF9 เซลลูเลสคล้ายกับเอชจักร hannai HdEG66 45K และเซลลูเลสรายงานโดยซูจิ, et al (ซูซูกิ et al, 2003). (2013) ในขณะที่โปรตีน 38 กิโลดาลตัน (ลำดับ n- ขั้ว: RLTVSGKTFRLNNQQVFLSG) ถูกมองว่าเป็นโปรตีนβ-mannanase เหมือนที่ได้รับการบันทึกย่อในจีโนมเอแคลิฟอร์เนีย (หมายเลขภาคยานุวัติ GenBank, XP_005100017) 21 กิโลดาลตันเซลลูเลสในส่วน P-2 คืนผลตอบแทนสูงในขณะที่เซลลู GHF9 ชนิดในส่วน P-4 ฟื้นตัวได้ไม่ดี GHF9 ชนิดเซลลูเลสแสดงคุณสมบัติที่คล้ายกันเป็นหอยเป๋าฮื้อเซลลู HdEG66 (ซูซูกิ et al., 2003) และ Aplysia 66K เซลลูเลส (ซูจิ et al., 2013) ดังนั้นในการศึกษาครั้งนี้เรามุ่งเน้นไปที่ 21 กิโลดาลตันเซลลูเลสใน P-2 ส่วนที่จะอธิบายลักษณะเป็น GHF45 เซลลูเลส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมของเอนไซม์ถูกตรวจพบใน 4 ยอดเศษส่วน ( P-1 ) ห้องพีสี่นะ ) toyopearl cm-650m โครมาโปรตีนที่ได้จากแอมโมเนียซัลเฟต ( ( รูปที่ 1 ) และกรดอะมิโนลำดับกรดอะมิโนของโปรตีนหลักใน P-1 –ห้องพีสี่นะ เศษส่วน วิเคราะห์กับตัวอย่างที่เปื้อนให้ PVDF เมมเบรนหลังจากถูก . ตามการวิเคราะห์ค้นหาระเบิด ,40 กิโลดาลตันส่วนลำดับกรดอะมิโนใน P-1 : rlhiqnghfvlngqrvflsg ) ที่ถูกระบุว่าเป็น kurodai บีตา - เอ็นไซม์ Akman ( zahura et al . , 2010 ) 21 kDa และโปรตีนในส่วนลำดับกรดอะมิโน P-2 : eqkcqpnshgvrvyqgkkca ) ถือว่าเป็น ghf45 เซลลูเลสที่สอดคล้องกับ 21k เซลก่อนหน้านี้ รายงานโดย สึจิ et al . ( 2013 )45 kDa และโปรตีนในส่วนห้องพีสี่นะ ( ถูกลำดับ : aknygqalglsikfyeaq ) ก็ถือได้ว่าเป็น ghf9 cellulase คล้ายกับ H . จักร hannai hdeg66 ( Suzuki et al . , 2003 ) และเซลลูเลส รายงานโดย 45K สึจิ et al . ( 2013 ) ตอนที่ 38 kDa โปรตีน ( กรดอะมิโนลำดับ : rltvsgktfrlnnqqvflsg ) ถือเป็นบีตาแตกต่างกันเช่นโปรตีนที่ถูกแสดงใน .จีโนมแคลิฟอร์เนีย ( ขนาดหนังสือเลขที่ xp_005100017 ) 21 กิโลดาลตัน เอนไซม์ใน P-2 เศษส่วนก็หายในผลผลิตสูง ในขณะที่ ghf9 ชนิดเซลลูเลสในส่วนห้องพีสี่นะไม่หาย การ ghf9 ชนิดมีคุณสมบัติคล้ายหอยเซลเซล hdeg66 ( Suzuki et al . , 2003 ) และ aplysia 66k เซล ( สึจิ et al . , 2013 ) ดังนั้นในการศึกษาครั้งนี้เราเน้น 21 kDa เอนไซม์ใน P-2 เศษส่วนในลักษณะเป็น ghf45 เซล .