Determination of fungal IAA product

Determination of fungal IAA production

M. cinnamomi was grown in 25 mL of potato dextrose broth (PDB; CONDA®, Madrid, Spain), pH 6.0 supplemented with 2 mg mL−1 of l-tryptophan in 100 mL Erlenmeyer flask. Five mycelial plugs (5 mm in diameter) from the periphery of a colony growing on PDA in an incubator (25 ± 2 °C) for 2 week were transferred to PDB. Incubation was performed on a reciprocal shaker, at 150 rpm in the dark at 25 ± 2 °C. After 2 week of incubation, the cultures were centrifuged at 11,000 rpm for 15 min to harvest the supernatant. For IAA production screening, a colorimetric assay was used (Tsavkelova et al., 2007). Two milliliters of Salkowski’s reagent (1 mL of 0.5 M FeCl3 in 50 mL of 35% HClO4) was mixed with 1 mL of the supernatant and incubated in the dark for 30 min. A pink to red color was considered positive for IAA production.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดผลิต IAA เชื้อราม. cinnamomi ถูกปลูกใน 25 mL ของซุปมันฝรั่งขึ้น (PDB CONDA ® มาดริด สเปน), pH 6.0 เสริม ด้วย mL−1 2 มิลลิกรัมของ l-ทริปโตเฟนใน Erlenmeyer หนาว 100 mL 5 mycelial ปลั๊ก (5 mm เส้นผ่านศูนย์กลาง) จากยสปริงของโคโลนีที่ขึ้นบน PDA บ่มเพาะวิสาหกิจ (25 ± 2 ° C) ในสัปดาห์ที่ 2 มีการถ่ายโอนการ PDB ทำการบ่มตามที่เชคเกอร์ซึ่งกันและกัน ที่ 150 รอบต่อนาทีในมืดที่ 25 ± 2 องศาเซลเซียส หลังจากสัปดาห์ที่ 2 ของคณะทันตแพทยศาสตร์ วัฒนธรรมถูก centrifuged ที่ 11000 rpm สำหรับเกี่ยว supernatant 15 นาที สำหรับ IAA ผลิตคัด วิเคราะห์เทียบเคียงถูกใช้ (Tsavkelova et al., 2007) Milliliters 2 ของรีเอเจนต์ของ Salkowski (1 mL ของ 0.5 M FeCl3 ใน 50 mL 35% HClO4) ถูกผสมกับ mL 1 ของ supernatant และ incubated ในมืดสำหรับ 30 นาที สีชมพูสีแดงถือเป็นค่าบวกสำหรับ IAA ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความมุ่งมั่นของการผลิต IAA เชื้อราเมตร cinnamomi ถูกปลูกใน 25 มิลลิลิตรของน้ำซุปมันฝรั่งเดกซ์โทรส (PDB; CONDA®, มาดริด, สเปน), พีเอช 6.0 เสริมด้วย 2 มิลลิกรัม mL-1 ของโพรไบโอ l-100 มิลลิลิตรขวด Erlenmeyer ห้าปลั๊กเส้นใย (5 มม) จากขอบของอาณานิคมที่เจริญเติบโตบนพีดีเอในศูนย์บ่มเพาะ (25 ± 2 ° C) เป็นเวลา 2 สัปดาห์ที่ถูกย้ายไป PDB บ่มเพาะได้ดำเนินการในเครื่องปั่นซึ่งกันและกันที่ 150 รอบต่อนาทีในที่มืดที่อุณหภูมิ 25 ± 2 องศาเซลเซียส หลังจากนั้น 2 สัปดาห์ของการบ่มวัฒนธรรมที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 11,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 15 นาทีที่จะเก็บเกี่ยวใส สำหรับการคัดกรองการผลิต IAA การทดสอบสีที่ใช้ (Tsavkelova et al., 2007) สองมิลลิลิตรน้ำยา Salkowski ของ (1 มิลลิลิตร 0.5 M FeCl3 ใน 50 มล 35% HClO4) ผสมกับ 1 มิลลิลิตรใสและบ่มในที่มืดเป็นเวลา 30 นาที สีชมพูเป็นสีแดงได้รับการพิจารณาในเชิงบวกสำหรับการผลิต IAA