Blood samples were placed on a filt

Blood samples were placed on a filter paper for ethanol evaporation and total DNA was isolated by incubation in a 200 mL volume with Chelex 100 (SigmaeAldrich, St. Louis, MO, USA) (finalconcentration 5%) at 56 C for 1 h, followed by boiling for 10 min. Before use, samples were centrifuged for 1 min at 15,000 rpm, and 2.5 mL of supernatantwas used for PCR. DNA from fecal sampleswas isolated by a commercial stool kit (Qiagen, Venlo, Limburg, Netherlands). PCR and sequencing were performed for each sample at least in triplicate and, to avoid contamination, in a laboratory that does not work with trypanosomes, always with positive and negative controls included.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใส่ในกระดาษกรองสำหรับเอทานอลระเหยตัวอย่างเลือด และดีเอ็นเอทั้งหมดถูกแบ่งแยกบ่มในปริมาณ 200 mL Chelex 100 (SigmaeAldrich, St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) (finalconcentration 5%) ที่ C 56 สำหรับ 1 h ตาม ด้วยต้มสำหรับ 10 นาที ก่อนใช้ ตัวอย่างถูก centrifuged ที่ 15000 rpm 1 นาที และ 2.5 mL ของ supernatantwas ใช้สำหรับ PCR ดีเอ็นเอจาก sampleswas fecal แยกต่างหาก โดยชุดเก้าอี้พาณิชย์ (Qiagen ใน Venlo, Limburg เนเธอร์แลนด์) PCR และลำดับถูกดำเนินการสำหรับแต่ละตัวอย่างน้อย ใน triplicate และ หลีกเลี่ยงการปนเปื้อน ในห้องปฏิบัติการที่ไม่ทำงานกับ trypanosomes เสมอควบคุมบวก และลบรวม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างเลือดถูกวางไว้บนกระดาษกรองระเหยเอทานอลและ DNA ทั้งหมดถูกแยกออกจากการบ่มในปริมาณ 200 มิลลิลิตร Chelex 100 (SigmaeAldrich, เซนต์หลุยส์, MO, USA) (finalconcentration 5%) ที่ 56 C 1 ชั่วโมง ตามมาด้วยการต้มเป็นเวลา 10 นาที ก่อนที่จะใช้ตัวอย่างที่ถูกปั่นเป็นเวลา 1 นาทีที่ 15,000 รอบต่อนาทีและ 2.5 มิลลิลิตร supernatantwas ใช้สำหรับ PCR ดีเอ็นเอจากอุจจาระ sampleswas แยกจากชุดเก้าอี้ในเชิงพาณิชย์ (Qiagen, Venlo, Limburg, เนเธอร์แลนด์) PCR และการเรียงลำดับได้ดำเนินการสำหรับแต่ละตัวอย่างอย่างน้อยในเพิ่มขึ้นสามเท่าและเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนในห้องปฏิบัติการที่ไม่ได้ทำงานกับ trypanosomes เสมอกับการควบคุมในเชิงบวกและเชิงลบรวม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่างเลือดถูกวางไว้บนกระดาษกรองสำหรับการระเหยของเอทานอลและปริมาณดีเอ็นเอได้ โดย 1 ใน 200 ml ปริมาณที่มี chelex 100 ( sigmaealdrich เซนต์หลุยส์ โม , USA ) ( finalconcentration 5% ) ที่ 56  C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ตามด้วย ต้มนาน 10 นาที ก่อนใช้งาน จำนวนระดับ 1 นาที ที่ 15 , 000 รอบต่อนาที และ supernatantwas 2.5 มิลลิลิตร ใช้ PCRดีเอ็นเอจากอุจจาระ sampleswas แยกด้วยแป้นพาณิชย์ชุด ( เพิ่ม Venlo , Limburg , เนเธอร์แลนด์ , ) วิธี PCR และการแสดงสำหรับแต่ละตัวอย่าง อย่างน้อยทั้งสามใบ และเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อน ในปฏิบัติการที่ไม่ได้ทำงานกับ trypanosomes เสมอกับ บวกและลบ การควบรวม