Tantawiwat et al.14 also developed

Tantawiwat et al.14 also developed a method of multiplex
PCR amplification of lacZ, uidA and plc genes for
the simultaneous detection of total coliform bacteria,
E. coli and Clostridium perfringens, in drinking water.
Detection by agarose gel electrophoresis yielded a band
of 876 bp for the lacZ gene of all coliform bacteria; a
band of 147 bp for the uidA gene and a band of 876 bp
for the lacZ gene of all strains of E. coli; a band of
280 bp for the plc gene for all strains of C. perfringens
and a negative result for all three genes when tested with
other bacteria. The detection limit was 100 pg for E. coli
and C. perfringens, and 1 ng for coliform bacteria when
measured with purified DNA. Spiked water samples with
0–1000 cfu/ml of coliform bacteria and/or E. coli and/or
C. perfringens were detected by this multiplex PCR after
a pre-enrichment step to increase the sensitivity and to
ensure that the detection was based on the presence of
cultivable bacteria. The result of bacterial detection from
the multiplex PCR was comparable with that of a standard
plate count on selective medium (P = 0.62). On
using standard plate counts as a gold standard, the sensitivity
for this test was 99.1% (95% CI 95.33, 99.98) and
the specificity was 90.9% (95% CI 75.67, 98.08).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Tantawiwat et al.14
ยังได้พัฒนาวิธีการหลายขยายของPCR lacZ, ยีน uidA และแอลซีสำหรับการตรวจสอบพร้อมกันของโคลิฟอร์มแบคทีเรียรวมอี . โคไลและเชื้อ Clostridium perfringens ในการดื่มน้ำการตรวจสอบโดยข่าวคราวagarose ให้ผลเป็นวงดนตรีของ876 bp สำหรับยีน lacZ ของโคลิฟอร์มแบคทีเรียทั้งหมด วง 147 bp สำหรับยีน uidA และกลุ่ม 876 bp สำหรับยีน lacZ ของทุกสายพันธุ์ของเชื้อ E. coli; กลุ่ม280 bp สำหรับยีนแอลซีสำหรับทุกสายพันธุ์ของ C. perfringens และผลลบทั้งสามยีนเมื่อทดสอบกับแบคทีเรียอื่น ๆ ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ 100 หน้าสำหรับเชื้อ E. coli และ C. perfringens และ 1 นาโนกรัมสำหรับโคลิฟอร์มแบคทีเรียเมื่อวัดที่มีดีเอ็นเอบริสุทธิ์ ตัวอย่างน้ำถูกแทงด้วย0-1000 cfu / ml ของโคลิฟอร์มแบคทีเรียและ / หรือเชื้อ E. coli และ / หรือซี perfringens ถูกตรวจพบโดยวิธี PCR multiplex นี้หลังจากที่ขั้นตอนก่อนการตกแต่งเพื่อเพิ่มความไวและเพื่อให้แน่ใจว่าการตรวจสอบก็ขึ้นอยู่กับการปรากฏตัวของเชื้อแบคทีเรียที่เพาะปลูก ผลของการตรวจสอบเชื้อแบคทีเรียจากmultiplex PCR ก็เปรียบได้กับการที่มีมาตรฐานจำนวนจุลินทรีย์ในสื่อเลือก(p = 0.62) ในการใช้นับจานมาตรฐานเป็นมาตรฐานทองไวสำหรับการทดสอบนี้เป็น99.1% (95% CI 95.33, 99.98) และความจำเพาะเป็น90.9% (95% CI 75.67, 98.08)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ลี โล่วิรกรณ์ และ al.14 ยังพัฒนาวิธี Amplification เทคนิค multoplex PCR
ของ lacz uida และ PLC , ยีน
ตรวจหาพร้อมกันของโคลิฟอร์มแบคทีเรียทั้งหมด
เชื้ออีโคไลและ Clostridium perfringens ในน้ำดื่ม การตรวจสอบโดยวิธีเจล

จากวงดนตรีของ 306 BP สำหรับ lacz ยีนของแบคทีเรียโคลิฟอร์มทั้งหมด ;
วงดนตรีของ 147 BP สำหรับ uida ยีนและวงดนตรีของ BP
1สำหรับ lacz ยีนของเชื้อ E . coli ; วงของ
280 BP สำหรับ PLC ยีนสำหรับทุกสายพันธุ์ C . perfringens
และผลเชิงลบทั้งหมด 3 ยีน เมื่อทดสอบกับ
แบคทีเรียอื่น ๆ การตรวจสอบวงเงิน 100 PG สำหรับ E . coli
และ C . perfringens และ 1 ng สำหรับโคลิฟอร์มแบคทีเรียเมื่อ
วัดกับดีเอ็นเอบริสุทธิ์ ตัวอย่างน้ำถูกแทงด้วย
0 – 1 , 000 cfu / ml แบคทีเรียโคลิฟอร์มและ / หรือ E( และ / หรือ
C . perfringens ถูกตรวจพบโดยเทคนิค multoplex PCR หลังจาก
ก่อนเพิ่มขั้นตอนเพื่อเพิ่มความไวและ

มั่นใจว่าการตรวจสอบขึ้นอยู่กับสถานะของ
เพาะปลูกแบคทีเรีย ผลจากการตรวจสอบจาก
เทคนิค multoplex PCR ถูกเปรียบได้กับของนับจานมาตรฐาน
เมื่อเลือกขนาดกลาง ( P = 0.62 ) ใช้นับจานบน
มาตรฐานเป็นมาตรฐานทองคำความไว
สำหรับการทดสอบนี้คือ 97.2 % ( 95% CI 95.33 99.98
, ) และความจำเพาะเป็นจำนวนเท่า ( 95% CI ตนเอง 98.08 , )