2.6. Hematology
Nine Caspian white fish from each individual tank (36 fish per
diet) were anaesthetized with clove oil (Barijesans, 50 mg l1).
Then, blood samples were obtained by cutting the tail of the fish.
Blood samples getting from the same dietary experimental group
were pooled and immediately divided into two half parts. One half
was transferred to a tube containing anti-coagulant (heparin) for
studying the respiratory burst assay and make the hematological
analysis, while the other half was transferred to non-heparinized
tubes for biochemical and immunological studies. Sera samples
were obtained by blood centrifugation (3000 g, 15 min) and stored
at 80 C until use. The total red blood cells (RBC: 106 mm3) and
white blood cells (WBC: 103mm3) were enumerated in an
improved Neubaeur hemocytometer using Hayem and Turck
diluting fluids [27]. Hematocrit (Ht %) was determined by the
standard microhematocrit method and expressed as percentage.
The hemoglobin (Hb, g dl1) level was determined according to
cyanomethemoglobin procedure. Furthermore, differential leukocyte
cells were measured by preparing Giemsa stained smears.
Blood smears were studied by light microcopy in order to make
blood cell counts.
2.7. Immune parameters in blood
Serum lysozyme activity was measured according method that
described by Ref. [28] with some modifications. Briefly, 25 mL sera
of was added to 1 mL of a suspension of Micrococcus lysodeikticus
(0.2 mg ml1 in a 0.05 M sodium phosphate buffer (pH 6.2) and
absorbance was measured at 670 nm after 30 s and 180 s by
spectrophotometer (Biophotometer Eppendorf). Serum immunoglobulin
(IgM) content was measured according to the method
described by Ref. [29] by using a microprotein determination
method (C-690; Sigma), prior and after precipitating down the
immunoglobulin molecules by means of a 12 % solution of polyethylene
glycol (Sigma). The difference in protein content was
considered as the IgM content. Serum total protein (TP) levels were
measured using commercial kits (Pars Azmon Co, Tehran, Iran).
Finally, respiratory burst activity was measured by chemiluminescent
assay (CL) by method that described by Ref. [30] with using CL
analysis (LUMI skan Ascent T392, Finland).
2.8. Statistical analysis
All the tests were performed in triplicate. The data were subjected
to statistical analysis using the SPSS software version no. 18
(SPSS Inc., Chicago, IL, USA). The statistical analysis was done by
using one-way analysis of variance (ANOVA) followed by Duncan's
multiple range tests. P-value of
2.6 โลหิตวิทยา
เก้าแคสเปี้ยปลาสีขาวจากถังแต่ละ (36 ปลาต่อ
อาหาร) เป็นอสัญญีด้วยน้ำมันกานพลู (Barijesans 50 mg L? 1).
จากนั้นตัวอย่างเลือดที่ได้รับโดยการตัดหางของปลา.
ตัวอย่างเลือดที่ได้รับจากการเดียวกัน กลุ่มทดลองอาหาร
ถูกรวบรวมและแบ่งออกได้ทันทีเป็นสองส่วนครึ่ง ครึ่งหนึ่ง
ถูกย้ายไปยังหลอดที่มีป้องกันการตกตะกอน (เฮ) เพื่อ
ศึกษาการทดสอบระเบิดทางเดินหายใจและทำให้โลหิตวิทยา
วิเคราะห์ในขณะที่อีกครึ่งหนึ่งถูกย้ายไปที่ไม่ใช่ heparinized
หลอดสำหรับการศึกษาทางชีวเคมีและภูมิคุ้มกัน ตัวอย่างซีรั่ม
ที่ได้จากการหมุนเหวี่ยงเลือด (3000 กรัม 15 นาที) และเก็บไว้
ที่? 80? C จนถึงการใช้งาน รวมเซลล์เม็ดเลือดแดง (RBC: 106 มม 3) และ
เซลล์เม็ดเลือดขาว (WBC: 103mm 3) ถูกระบุใน
hemocytometer Neubaeur ปรับปรุงการใช้ Hayem และ Turck
ของเหลวเจือจาง [27] Hematocrit (HT%) ถูกกำหนดโดย
วิธีการ microhematocrit มาตรฐานและแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์.
เฮโมโกลบิน (Hb, G DL? 1) ระดับได้รับการพิจารณาตาม
ขั้นตอน cyanomethemoglobin นอกจากนี้ค่าเม็ดเลือดขาว
เซลล์ถูกวัดโดยการเตรียมความพร้อม Giemsa รอยเปื้อนเปรอะเปื้อน.
รอยเปื้อนเลือดกำลังศึกษา microcopy แสงเพื่อที่จะทำให้
เม็ดเลือด.
2.7 พารามิเตอร์ของระบบภูมิคุ้มกันในเลือดของ
กิจกรรม lysozyme เซรั่มวัดตามวิธีการที่
อธิบายโดย Ref [28] มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง สั้น ๆ , 25 มลซีรั่ม
ของถูกบันทึกอยู่ใน 1 มิลลิลิตรของการระงับการ Micrococcus lysodeikticus
(0.2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร 1 ในบัฟเฟอร์ 0.05 M โซเดียมฟอสเฟต (pH 6.2) และ
การดูดกลืนแสงวัดที่ 670 นาโนเมตรหลังจาก 30 และ 180 โดยการ
spectrophotometer ( . Biophotometer Eppendorf) อิมมูโนเซรั่ม
(IgM) เนื้อหาวัดตามวิธีการ
อธิบายโดยอ้างอิง [29] โดยใช้ความมุ่งมั่น microprotein.
วิธีการ (C-690; ซิกม่า) ก่อนและหลังการตกตะกอนลง
โมเลกุลอิมมูโนโดยวิธีการของ 12 วิธีการแก้ปัญหา% ของเอทิลีน
ไกลคอล (ซิกม่า). ความแตกต่างในปริมาณโปรตีนได้รับการ
พิจารณาว่าเป็นเนื้อหา IgM. เซรั่มรวมโปรตีน (TP) ระดับถูก
วัดโดยใช้ชุดพาณิชย์ (Pars Azmon Co, เตหะรานประเทศอิหร่าน).
ในที่สุดกิจกรรมหายใจระเบิดวัด โดย chemiluminescent
ทดสอบ (CL) โดยวิธีการที่อธิบายโดย Ref. [30] กับการใช้ CL
วิเคราะห์ (LUMI Skan Ascent T392, ฟินแลนด์).
2.8. การวิเคราะห์สถิติ
การทดสอบทั้งหมดได้ดำเนินการในการเพิ่มขึ้นสามเท่า. ข้อมูลถูกยัดเยียด
เพื่อการวิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้ ซอฟต์แวร์รุ่น SPSS ไม่มี 18
(SPSS อิงค์, Chicago, IL, สหรัฐอเมริกา) การวิเคราะห์ทางสถิติทำโดย
ใช้วิธีการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) ตามด้วยของดันแคน
ทดสอบช่วงหลาย P-value ของ <0.05 ได้รับการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญ.
3 ผลการค้นหา
3.1 การเจริญเติบโตของปลา
น้ำหนักกำไร (WG) อัตราการเจริญเติบโตที่เฉพาะเจาะจง (SGR) และฟีด
อัตราการแปลง (FCR) ของปลาที่เลี้ยงด้วยอาหารทดลองที่แตกต่างกัน
ดังแสดงในตารางที่ 2 เกี่ยวกับ, WG และ SGR มันถูกตั้งข้อสังเกตว่า
การเพิ่มขึ้นของค่าพารามิเตอร์ทั้งสองได้ สะระแหน่ยาที่เกี่ยวข้องกับการเป็น
เพิ่มขึ้นทีละที่สูงที่สุดในปลาที่เลี้ยงสะระแหน่อุดม 3%
อาหาร เกี่ยวกับค่า FCR ปลาควบคุมเลี้ยง (Non-เสริม)
และ 1% อาหารที่อุดมด้วยสะระแหน่มีค่าที่คล้ายกัน
ในขณะที่ลดลงในที่เลี้ยงปลา 2% และ 3% สะระแหน่
อาหารอุดม
การแปล กรุณารอสักครู่..
