Polyphenol Oxidase Reaction of Flavanols. EGCG (500 mg) was incubated in the above crude polyphenol oxidase solution (500 mL) at 32 °C for 3 h. To stop the reaction, 250 mL of 90% CH3CN containing 1% TFA was added to the reaction mixture, and then the solution was diluted 4 times with H2O and applied on an HP-20 column (400 mL,Mitsubishi Chemical Co., Ltd.). After washing with H2O, catechins were eluted by 90% CH3CN containing 0.1% TFA. The reactant was purified by prep-HPLC. The HPLC was accomplished with the use of an ODS column (Develosil ODS-UG-15/30, 500 mm × 50 mm,
Nomura Chemical, Ltd.) with a flow rate of 32 mL/min and monitoring at A ) 280 nm. The solvent systems used included a linear gradient elution for 100 min using 20-50% of solvent B (90% CH3CN, 0.1%TFA in H2O) in solvent A (0.1% TFA in H2O). As a result of this chromatogram, 16 mg of oolongtheanin gallate was obtained.
(+)-Cathechin (100 mg) was incubated in the above crude enzyme solution (100 mL) at 32 °C for 3 h. To stop the reaction, 50 mL of 90% CH3CN containing 1% TFA was added to the reaction mixture,and then the solution was diluted 4 times by H2O and applied on HP-20. After washing with H2O, catechins were eluted by 90% CH3CN containing 0.1% TFA. The reactant was purified by HPLC using Develosil C30-UG-5 (250 mm × 20 mm, Nomura Chemical Co.,Ltd.) with a flow rate of 6 mL/min and monitoring at A ) 280 nm togive pure dehydrodicatechin A (2 mg). The solvent systems used included linear gradient elution for 60 min using 20-50% of solvent B (90% CH3CN, 0.1% TFA in H2O) in solvent A (0.1% TFA in H2O).
ปฏิกิริยา Polyphenol Oxidase ของ Flavanols EGCG (500 มิลลิกรัม) ถูก incubated ในน้ำมัน polyphenol oxidase โซลูชัน (500 mL) ที่ 32 ° C สำหรับ 3 h หยุดปฏิกิริยา mL 250% 90 CH3CN ประกอบด้วย 1% TFA ได้เพิ่มส่วนผสมปฏิกิริยา และการแก้ปัญหาถูกผสม 4 ครั้งกับ H2O และใช้คอลัมน์ที่มี HP-20 (400 มล มิตซูบิชิเคมี Co., Ltd.) หลังจากซักผ้ากับ H2O catechins มี eluted % 90 CH3CN ประกอบด้วย 0.1% TFA ตัวทำปฏิกิริยาไม่บริสุทธิ์ โดยเตรียม HPLC HPLC มีได้ ด้วยการใช้คอลัมน์เป็น ODS (Develosil ODS-ยูจี-15/30, 500 มม. × 50 มม.
เคมีพัฒนสิน Ltd.) ด้วยอัตราการไหลของ 32 mL/min และตรวจสอบที่ A) 280 nm ระบบตัวทำละลายที่ใช้รวม elution ไล่ระดับสีเป็นเส้นในนาทีที่ 100 ใช้ 20-50% ของตัวทำละลาย B (90% CH3CN, 01% TFA ใน H2O) ในตัวทำละลาย A (0.1% TFA ใน H2O) จากนี้ chromatogram, oolongtheanin gallate 16 มก.รับ
()-Cathechin (100 มิลลิกรัม) ถูก incubated ในโซลูชันเอนไซม์ดิบ (100 mL) ที่ 32 ° C สำหรับ 3 h หยุดปฏิกิริยา mL 50% 90 CH3CN ประกอบด้วย 1% TFA ได้เพิ่มส่วนผสมปฏิกิริยา และการแก้ปัญหาได้ยกเว้น 4 ครั้ง โดย H2O และใช้กับ HP-20 หลังจากซักผ้ากับ H2O, catechins มี eluted % 90 CH3CN ประกอบด้วย 0.1% TFA ตัวทำปฏิกิริยาไม่บริสุทธิ์ โดย HPLC ใช้ Develosil C30-ยูจี-5 (250 มม. × 20 มม. พัฒนสิน Chemical Co., Ltd.) มีอัตราการไหลของ 6 mL/min และตรวจสอบที่ A) 280 nm togive บริสุทธิ์ dehydrodicatechin (มก. 2) ระบบตัวทำละลายที่ใช้รวม elution เส้นไล่ระดับสำหรับใช้ 20-50% ของตัวทำละลาย B (90% CH3CN, 0 60 นาที1% TFA ใน H2O) ในตัวทำละลาย A (0.1% TFA ใน H2O)
การแปล กรุณารอสักครู่..
polyphenol oxidase ปฏิกิริยาของ flavanols . EGCG ( 500 มิลลิกรัม ) คือ บ่มในข้างต้นดิบ polyphenol oxidase โซลูชั่น ( 500 มล. ) ที่ 32 ° C เป็นเวลา 3 ชั่วโมง เพื่อหยุดปฏิกิริยาของ 90% ch3cn ประกอบด้วย 1 % ระดับ 250 ml เพิ่มกับปฏิกิริยาที่ผสมแล้วสารละลายที่เจือจาง 4 ครั้งกับ H2O และประยุกต์ใน hp-20 คอลัมน์ ( 400 มิลลิลิตร , Mitsubishi Chemical Co . , Ltd . ) หลังจากล้างด้วย H2O ,ตัวอย่าง ch3cn catechins เป็น 90% ที่ประกอบด้วย 0.1% ในระดับ . ตัวทำปฏิกิริยาบริสุทธิ์โดยวิธี HPLC เตรียม พบได้ด้วยการใช้คอลัมน์ ODS ( develosil ods-ug-15 / 30 , 500 มม. × 50 mm
โนมูระ เคมีคอล จำกัด ด้วยอัตราการไหล 3 มล. / นาที ) และการตรวจสอบที่ 280 nm . ระบบตัวทำละลายที่ใช้ ได้แก่ การใช้เส้น 100 นาทีใช้ 20-50% ของตัวทำละลาย B ( ch3cn 90 % 0ระดับ 1 ( H2O ) ในตัวทำละลายที่เป็นระดับ 0.1% ใน H2O ) ผลของการปลูกถ่ายไตนี้ 16 มิลลิกรัม oolongtheanin แกลเลตได้
( ) - แคททิชิน ( 100 มก. ) คือ บ่มในสารละลายเอนไซม์ที่ข้างต้น ( 100 ml ) ที่ 32 ° C เป็นเวลา 3 ชั่วโมง เพื่อหยุดปฏิกิริยา , 50 ml 90% ch3cn ประกอบด้วย 1 % กรดไขมันที่ถูกเพิ่มเข้าไปในปฏิกิริยา ส่วนผสม และสารละลายที่เจือจาง 4 ครั้งโดย H2O และประยุกต์ใน hp-20 .หลังจากล้างด้วย H2O catechins คือตัวอย่าง โดย 90% ch3cn ที่มีระดับ 0.1 เปอร์เซ็นต์ . ตัวทำปฏิกิริยาบริสุทธิ์โดยวิธี HPLC โดยใช้ develosil c30-ug-5 ( 250 มม. × 20 มม. โนมูระ Chemical Co . , Ltd . ) ด้วยอัตราการไหล 6 มิลลิลิตรต่อนาที และการตรวจสอบที่ ) 280 nm ประกอบ dehydrodicatechin บริสุทธิ์ ( 2 มก. ) ระบบรวมการใช้ตัวทำละลายชนิดเชิงเส้นสำหรับ 60 นาทีใช้ 20-50% ของตัวทำละลาย B ( ch3cn 90 % 0ระดับ 1 ( H2O ) ในตัวทำละลายที่เป็นระดับ 0.1% ใน H2O )
การแปล กรุณารอสักครู่..