White spot syndrome virus (WSSV) is

White spot syndrome virus (WSSV) is a viral pathogen that emerged in the early 1990s and has since spread throughout Asia and to the Americas. Diseased shrimp are lethargic and slow swimming and show reduced feed consumption. Histopathology has revealed that WSSV-infected shrimp tissues are of ectodermal and mesodermal origin (3, 6, 19, 39). WSSV is an ellipsoid to bacilliform, enveloped particle of about 275 nm in length and 120 nm in width, with a tail-like appendage at one end. It is the type species of the genus Whispovirus in the family Nimaviridae (36). It is unique, with an infection strategy that does not match infection models of any other known virus, and must therefore be investigated ab initio.

All three of the WSSV isolates that have been sequenced have a genome of about 300 kbp, and genetic comparisons have shown a high degree of genetic similarity (16). The availability of the complete WSSV sequence facilitates the global molecular characterization of the virus by genomic and proteomic approaches and has recently led to the discovery of many important WSSV genes, including latency-associated genes (10, 11), immediate-early genes (15), many other nonstructural genes (5, 29, 30, 33), and more than 39 structural genes (6, 13, 19, 31, 32, 35, 43). To date, however, little is known of the interaction between shrimp and WSSV at the cellular and molecular levels.

Neutralization experiments with a major WSSV envelope protein, VP28, have shown that it is involved in systemic infection of WSSV (34). It has further been shown that VP28 is able to bind to the surface of shrimp cells (41) and that feeding with recombinant VP28 can protect shrimp from WSSV infection (38). However, until now there have been no reports on the interaction of VP28 with a specific shrimp protein(s). Therefore, in the present study, to identify shrimp hemocyte membrane (SHM) proteins involved in WSSV binding, a virus overlay protein binding assay (VOPBA) was performed (9, 21). VP28 was selected as the WSSV target because it is the most abundant exposed protein in the WSSV envelope (32). One of the candidate proteins from this assay was further characterized, and its full-length sequence was analyzed. Its expression pattern in response to WSSV infection was investigated, and a glutathione S-transferase (GST) pull-down assay tested the specificity of its binding to recombinant VP28 (rVP28). An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and an in vivo neutralization assay were also conducted. This is the first study to describe the specific binding of a shrimp protein to the WSSV major structural protein VP28.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุดสีขาวดาวน์ซินโดรไวรัส (WSSV) เป็นเชื้อไวรัสที่เกิดขึ้นในช่วงปี 1990 และมีการแพร่กระจายตั้งแต่ทั่วเอเชียและอเมริกา กุ้งที่เป็นโรคจะว่ายน้ำและการแสดงลดปริมาณอาหารที่กินเซื่องซึมและช้า ติดต่อโดยตรงได้เปิดเผยว่าตัวแดงดวงขาวเชื้อเนื้อเยื่อกุ้งมี ectodermal mesodermal และต้นกำเนิด (3, 6, 19, 39) ตัวแดงดวงขาวเป็นทรงรีที่จะ bacilliform อนุภาคห่อหุ้มประมาณ 275 นาโนเมตรและมีความยาว 120 นาโนเมตรกว้างมีรยางค์หางเหมือนที่ปลายด้านหนึ่ง มันเป็นชนิดพันธุ์ของพืชและสัตว์ Whispovirus ในครอบครัว Nimaviridae นี้ (36) มันเป็นเอกลักษณ์กับกลยุทธ์ของการติดเชื้อที่ไม่ตรงกับรูปแบบการติดเชื้อของไวรัสที่รู้จักกันอื่น ๆ และดังนั้นจึงต้องตรวจสอบเริ่มแรก. ทั้งสามตัวแดงดวงขาวแยกที่ได้รับการจัดลำดับมีจีโนมประมาณ 300 KBP และเปรียบเทียบทางพันธุกรรมได้ แสดงให้เห็นถึงระดับสูงของความคล้ายคลึงกันทางพันธุกรรม (16) ความพร้อมใช้งานของลำดับตัวแดงดวงขาวสมบูรณ์อำนวยความสะดวกในลักษณะโมเลกุลทั่วโลกของไวรัสด้วยวิธีจีโนมและโปรตีโอมิและได้นำไปเมื่อเร็ว ๆ นี้การค้นพบยีนตัวแดงดวงขาวที่สำคัญจำนวนมากรวมทั้งยีนแฝงที่เกี่ยวข้อง (10, 11), ยีนทันที-ต้น (15 ) หลายยีนอื่น ๆ nonstructural (5, 29, 30, 33) และอื่น ๆ กว่า 39 ยีนโครงสร้าง (6, 13, 19, 31, 32, 35, 43) ในวัน แต่ไม่ค่อยมีใครรู้จักของการปฏิสัมพันธ์ระหว่างกุ้งตัวแดงดวงขาวในระดับเซลล์และโมเลกุล. การทดลองการวางตัวเป็นกลางด้วยโปรตีนซอง WSSV สำคัญ VP28 ได้แสดงให้เห็นว่ามันมีส่วนเกี่ยวข้องในการติดเชื้อในระบบของตัวแดงดวงขาว (34) มันได้รับการต่อไปแสดงให้เห็นว่า VP28 สามารถที่จะผูกกับพื้นผิวของเซลล์กุ้ง (41) และที่เลี้ยงลูกด้วยนมที่มี VP28 recombinant สามารถป้องกันกุ้งจากการติดเชื้อตัวแดงดวงขาว (38) อย่างไรก็ตามจนถึงขณะนี้มีการรายงานเกี่ยวกับการทำงานร่วมกันของ VP28 ที่มีโปรตีนกุ้งเฉพาะ (s) ดังนั้นในการศึกษาครั้งนี้เพื่อแจ้งเยื่อหุ้มเซลล์เม็ดเลือดกุ้ง (SHM) โปรตีนที่เกี่ยวข้องในการ WSSV ผูกพันการทดสอบโปรตีนซ้อนทับไวรัสที่มีผลผูกพัน (VOPBA) ได้ดำเนินการ (9, 21) VP28 ได้รับเลือกเป็นเป้าหมาย WSSV เพราะมันเป็นโปรตีนที่สัมผัสมากที่สุดในซองจดหมาย WSSV นี้ (32) หนึ่งในผู้สมัครโปรตีนจากการทดสอบนี้ก็มีลักษณะต่อไปและลำดับยาวเต็มรูปแบบของการวิเคราะห์ รูปแบบการแสดงออกในการตอบสนองต่อการติดเชื้อ WSSV ถูกตรวจสอบและกลูตาไธโอน S-transferase (GST) ดึงลงทดสอบการทดสอบความจำเพาะของผลผูกพันในการ VP28 recombinant นี้ (rVP28) เป็นเอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโน (ELISA) และการวางตัวเป็นกลางในร่างกายการทดสอบยังได้ดำเนินการ นี่คือการศึกษาแรกที่อธิบายเฉพาะที่มีผลผูกพันของโปรตีนกุ้งไปยังตัวแดงดวงขาวที่สำคัญโปรตีนโครงสร้าง VP28

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไวรัสโรคจุดขาว ( ี ) เป็นไวรัสเชื้อโรคที่ออกมาในช่วงปี 1990 และได้แผ่กระจายไปทั่วเอเชียและอเมริกา กุ้งป่วยจะเซื่องซึมและค่อยๆว่ายโชว์อาหารลดลง จุลพยาธิวิทยาพบว่าเนื้อเยื่อของกุ้งีการติดเชื้อตัวแดงดวงมีแหล่งกำเนิด ( 3 , 6 , 19 , 39 ) ีเป็นรูปทรงใบสีส้ม ห่อหุ้มอนุภาคของเกี่ยวกับ 275 nm ในความยาวและความกว้าง 120 นาโนเมตร มีหางเหมือนรยางค์ที่ปลายด้านหนึ่ง มันเป็นประเภท ชนิด ของ สกุล whispovirus ใน nimaviridae ครอบครัว ( 36 ) มันเป็นเฉพาะกับการติดเชื้อกลยุทธ์ที่ไม่ตรงกับรุ่นของการติดเชื้อไวรัสที่รู้จักกันอื่น ๆ และต้องถูกสอบสวน ab initio .ทั้งสามของเชื้อที่ได้รับ นี้ีมีจีโนมของเกี่ยวกับ 300 kbp และเปรียบเทียบทางพันธุกรรมได้แสดงระดับสูงของความคล้ายคลึงกันทางพันธุกรรม ( 16 ) ความพร้อมของลำดับีสมบูรณ์ในทั่วโลก ลักษณะทางโมเลกุลของไวรัสโดยวิธีจีโนมและโปรตีนและนี้ได้นำไปสู่การค้นพบยีนที่ีสำคัญมาก รวมถึงศักยภาพเชื่อมโยงยีน ( 10 , 11 ) ยีนต้นทันที ( 15 ) ยีนที่ไม่ได้อื่น ๆอีกมากมาย ( 5 , 29 , 30 , 33 ) , และมากกว่า 39 โครงสร้างยีน ( 6 , 13 , 19 , 31 , 32 , 35 , 43 ) วัน แต่น้อยเป็นที่รู้จักของปฏิสัมพันธ์ระหว่างกุ้งและีในระดับเซลล์และโมเลกุลการทดลองกับสาขาีซองโปรตีน vp28 แสดงว่า มันเกี่ยวข้องกับการติดเชื้อทั่วร่างกายของี ( 34 ) มีเพิ่มเติมมาแสดงที่ vp28 สามารถผูกกับพื้นผิวของเซลล์กุ้ง ( 41 ) และอาหารที่มีโปรตีน vp28 สามารถปกป้องกุ้งจากการติดเชื้อี ( 38 ) อย่างไรก็ตาม จนถึงขณะนี้ยังไม่มีรายงานเกี่ยวกับการปฏิสัมพันธ์กับโปรตีน vp28 กุ้งเฉพาะ ( s ) ดังนั้นในการศึกษาครั้งนี้ระบุว่า กุ้ง hemocyte เมมเบรน ( SHM ) โปรตีนที่เกี่ยวข้องในีผูก ไวรัสซ้อนทับโปรตีน assay ( vopba ) กำหนด ( 9 , 21 ) vp28 ถูกเลือกเป็นเป้าหมาย เพราะีปริมาณมากที่สุดสัมผัสโปรตีนในีซอง ( 32 ) หนึ่งในผู้สมัครจากโปรตีนในลักษณะนี้ต่อไป และการลำดับแบบเต็มตัวได้วิเคราะห์ การแสดงออกในการตอบสนองต่อการติดเชื้อ ีศึกษา และกลูต้าไธโอน เรส ( GST ) ความจำเพาะของวิธีทดสอบทั้งแบบผูก vp28 ( rvp28 ) เป็น enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA ) และมีฤทธิ์ในการ การทดสอบ ยังดำเนินการ การศึกษานี้เป็นครั้งแรก เพื่ออธิบายเฉพาะการจับของโปรตีนโครงสร้างหลักของโปรตีนที่ีกุ้ง vp28 .