Midguts of diseased B. mori samples

Midguts of diseased B. mori samples were dissected and genomic DNA was extracted as per standard protocol. The total RNA was isolated using Trizol reagent (Invitrogen) and first strand cDNA synthesized utilizing oligo (dT)18 primers (MWG India Pvt Ltd., Bangalore) and M-MLV Superscript III reverse transcriptase (Invitrogen) (1 μl) as per standard protocol for utilization in the PCRs. Three sets of DNV-2 specific primers viz. DNV-2, VD1 and VD2 as well as one set of NPV specific primers viz. GP41 were designed utilizing the online software program, primer3http://frodo.wi.mit.edu/cgi-bin/primer3/. Two sets of primers were utilized for detection of nsd-2 gene for resistance and susceptibility to DNV-2, respectively (Ito, 2008). B. mori βactin primers were used as internal standard for qPCR studies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Midguts อย่างโมริเกิดป่วยได้ dissected และ genomic DNA ที่สกัดตามโพรโทคอลมาตรฐาน อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยกโดยใช้ Trizol รีเอเจนต์ (Invitrogen) และใช้ oligo (dT) 18 ไพรเมอร์ (MWG อินเดีย Pvt จำกัด บังกาลอร์) สังเคราะห์ cDNA สาระแรก M MLV III ตัวยกกลับ transcriptase (Invitrogen) (1 μl) ตามโพรโทคอลมาตรฐานสำหรับใช้ในการ PCRs 3 ชุดชุดไพรเมอร์เฉพาะ viz. DNV 2, VD1 และ VD2 เป็นหนึ่ง DNV 2 ของ NPV เฉพาะไพรเมอร์ viz. GP41 ถูกออกแบบใช้โปรแกรมซอฟต์แวร์ออนไลน์ primer3 http://frodo.wi.mit.edu/cgi-bin/primer3/ ชุดสองของไพรเมอร์ที่ใช้ตรวจยีน nsd 2 การต้านทานง่าย DNV-2 ตามลำดับ (อิโตะ 2008) ไพรเมอร์ βactin โมริเกิดขึ้นใช้เป็นมาตรฐานภายในศึกษา qPCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กระเพาะของโรค B. ตัวอย่าง Mori ถูกชำแหละและดีเอ็นเอที่ถูกสกัดตามโปรโตคอลมาตรฐาน อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยกออกโดยใช้น้ำยา Trizol (Invitrogen) และยีนเส้นใยสังเคราะห์แรกใช้ Oligo (dT) 18 ไพรเมอร์ (MWG India Pvt จำกัด บังกาลอร์) และ M-MLV ยก III กลับ transcriptase (Invitrogen) (1 ไมโครลิตร) ตามมาตรฐาน โปรโตคอลสำหรับการใช้ประโยชน์ใน PCRs สามชุด DNV-2 ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจง ได้แก่ DNV-2, VD1 และ VD2 เช่นเดียวกับชุดของ NPV ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจง ได้แก่ gp41 ได้รับการออกแบบโดยใช้โปรแกรมซอฟต์แวร์ออนไลน์ primer3http: //frodo.wi.mit.edu/cgi-bin/primer3/ สองชุดของไพรเมอร์ถูกนำมาใช้ในการตรวจหา NSD-2 ยีนต้านทานและความไวต่อการ DNV-2 ตามลำดับ (Ito 2008) B. Mori ไพรβactinถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐานสำหรับการศึกษาภายใน qPCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

midguts ของโรคบี โมริและจำนวนผ่าจีโนมดีเอ็นเอตามโปรโตคอลมาตรฐาน ยีนทั้งหมดได้ใช้ trizol Reagent ( Invitrogen ) และยีนสังเคราะห์เส้นใช้โอลิโก ( DT ) 18 ชนิด ( mwg อินเดีย Pvt จำกัด , บังกาลอร์ ) และ m-mlv ตัวยก III reverse transcriptase ( Invitrogen ) ( 1 μ L ) ตามมาตรฐาน เพื่อใช้ประโยชน์ใน pcrs .ไพรเมอร์ของ dnv-2 เฉพาะ ได้แก่ สามชุด dnv-2 vd1 vd2 , และเช่นเดียวกับชุดหนึ่งของ NPV เฉพาะ ไพรเมอร์ คือ นำมาใช้ออกแบบใช้โปรแกรมซอฟต์แวร์ออนไลน์ primer3http : / / โฟรโด้ วี ของ MIT . edu / cgi bin / primer3 / สองชุดของไพรเมอร์ที่ใช้ในการตรวจหายีน nsd-2 ความต้านทานและโอกาสเสี่ยงต่อการ dnv-2 ตามลำดับ ( Ito , 2008 ) B .โมริบีตา actin โดยใช้เป็นมาตรฐานภายใน qpcr ศึกษา