using a Surveyor LC system coupled to a linear ion trap mass spectrometer model LTQ (Thermo Finnigan, San Jose, CA, USA) and protein identification was carried out using SEQUEST algorithm (Bioworks 3.2 package, Thermo Finnigan), allowing optional (Methionine oxidation) and fixed modifica- tions (Cysteine carboxamidomethylation, Lysine and N-terminal modification of þ144.1020Da). The MS/MS raw files were searched against the alphaproteo- bacteria combined with the arachnida Swissprot database (Uniprot release 15.5, 7 July 2009) supplemented with porcine trypsin and human keratins. This joint database contains 638,408 protein sequences. False discovery rate of identification was controlled by searching the same collections of MS/MS spectra against inverted databases constructed from the same target databases. The alphaproteobacteria Swissprot database was used to identify Anaplasma and discard possible symbiotic bacterial sequences from further analyses.
โดยใช้ระบบ LC สำรวจควบคู่ไปกับดักไอออนเชิงมวลสเปกโตรมิเตอร์รุ่น LTQ (เทอร์โม Finnigan, San Jose, CA, USA) และโปรตีน identification ดำเนินการโดยใช้อัลกอริทึม SEQUEST (แพคเกจ Bioworks 3.2 เทอร์โม Finnigan), ให้เลือก (Methionine ออกซิเดชัน) และ fixed modifica-ยวี่ (Cysteine carboxamidomethylation ไลซีนและขั้ว N modification ของ þ144.1020Da) files ดิบของ MS/MS ได้ค้นหาต่อเชื้อแบคทีเรีย alphaproteo รวมกับ arachnida Swissprot ฐานข้อมูล (Uniprot รุ่น 15.5, 7 2552 กรกฎาคม) เสริม ด้วยหมูทริปซินและมนุษย์ keratins ฐานข้อมูลนี้ร่วมกันประกอบด้วยลำดับของโปรตีน 638,408 อัตราการค้นพบเท็จของ identification ถูกควบคุม โดยค้นหาคอลเลกชันเดียวของสเปกตรัม MS/MS คว่ำฐานข้อมูลที่สร้างขึ้นมาจากฐานข้อมูลเป้าหมายเดียวกัน ฐานข้อมูล Swissprot alphaproteobacteria ถูกใช้เพื่อระบุ Anaplasma และละทิ้งไปได้ลำดับแบคทีเรียชีวภาพจากการวิเคราะห์เพิ่มเติม
การแปล กรุณารอสักครู่..
