Background
Air nicotine monitoring is a well-known procedure for estimation of exposure to second hand smoke. Few research studies were realized in Romania to evaluate environmental tobacco smoke (ETS) exposure of humans in different public places. The levels of airborne nicotine from environmental tobacco smoke and urinary cotinine and nicotine levels of some subjects were analyzed. In order to better implement/enforce the European legislation regarding the interdiction of smoking in the public places the national authorities need a rapid and reliable analytical method to quickly asses the state of the pollution with cigarette smoke of these populated areas.
Results
The nicotine concentration in the air from different types of public buildings was determined. The median concentration of nicotine in the air from 32 pubs where the smoking was allowed was 590 ng · L-1, comparing with the pubs where the smoking was not permitted (22 locations) where the median concentration of nicotine was only 32 ng · L-1. Similarly, the median concentration of nicotine in restaurants where the smoking was allowed (23 locations) was 510 ng · L-1, in comparison with the restaurants where the smoking was prohibited (11 places) where the median value was 19 ng · L-1. The lowest concentrations of nicotine were found in high schools (8 locations, median concentration 7.4 ng · L-1), universities (5 locations, 23 ng · L-1) and hospitals (6 locations, 16 ng · L-1).
Conclusions
The method was validated and gave good linearity, precision, accuracy and limit of detection. The buildings included hospitals, high schools, universities, pubs and restaurants. The presence of air nicotine was recorded in all buildings studied. The highest median levels of air nicotine were found in pubs and restaurants. The presence of air nicotine in indoor public buildings indicates weak implementation of the smoke free law in Romania.
Keywords: Air; Nicotine; Cotinine; UPLC–MS; ETS
Background
Environmental tobacco smoke (ETS) is one of the most widespread carcinogenic exposures, being a class A carcinogen, and is considered a preventable occupational health risk. ETS is recognized to be an important risk factor for several chronic diseases such as lung cancer [1-3], coronary heart disease [4-7] and asthma [8-10]. Several epidemiological surveys have documented the link between second hand smoke (SHS) exposure and increased morbidity and mortality [11].
People have become aware of SHS exposure since the studies made during the 9th decade of the previous century [12]. The WHO Framework Convention on Tobacco Control promotes smoke-free environments to protect the health of nonsmokers from SHS [13]. The dissemination of the ETS monitoring studies results is very important especially for young people, because in the age group of 15 to 17 years, there are many persons who have a strong dependence on nicotine [14-16].
In Romania, since 2005 smoking in some public places is prohibited by the national law [17], that contains restriction of smoking in different areas such as public places, hospitals, high schools, workplaces, restaurants for nonsmokers, buses and in the vicinity of pregnant women and children [14]. The implementation of the law remained largely ineffective in the first seven years.
Measurement of nicotine is highly sensitive because it is a specific biomarker of tobacco smoke that represents the only possible source of nicotine in the air. Nicotine deposits almost entirely on indoor surfaces in a concentration of about 30 μg · m-3, and persists for weeks to months [18,19]. Nicotine is rapidly metabolized, the half life time being about 2 h [20]. Cotinine, one of the major nicotine metabolite with a half life time of 20 h is frequently used for assessing tobacco smoke exposure and is typically detectable for several days (up to one week) after the use of tobacco. [20,21]. Cotinine can be measured in different body fluids or tissues including blood [22] urine, saliva, hair, [23] and teeth [24]. This bio-marker can differentiate the levels of exposure to tobacco smoke and levels of intake. The time needed to acquire increased levels of urinary cotinine is higher than 10 h after heavy ETS in a passive smoker [14].
The methods most used for the ETS monitoring are gas chromatography (GC) with flame ionization detection (FID) or nitrogen specific detectors [25], or GC coupled, with electron impact mass spectrometers (EI-MS) [14,23,24,26] as well as high performance liquid chromatography (HPLC) with MS detectors [27,28].
The existing surveillance system in Romania has no mechanism for routinely measuring exposure to SHS. There have been few studies or researches to look at exposure to SHS in different environments. In the current study, environmental measurements were used to characterize SHS exposure in key indoor public places in Romania. This paper presents an ultra performance liquid chromatography–mass spectrometric (UPLC–MS) quantitative method for nicotine levels in the indoor air, and for measuring the levels of airborne nicotine in some public houses, as a selective marker of tobacco smoke.
Results
Evaluation of the extraction solvent
Acetonitrile was selected as sampling solvent because it adsorbs/dissolves the highest quantity of nicotine, comparing with the other two solvents used (i.e. methanol and dichloromethane). Moreover, an additional dilution and/or evaporation step could be needed if using dichloromethane.
Method validation
Aliquot samples containing 0.005, 0.02, 0.078, 0.313, 1.250, and 5 μg · mL-1 nicotine in acetonitrile were used for the method validation.
The calibration graph resulted from the analysis of the calibration standard solutions prepared in acetonitrile was linear during the entire range of calibration solutions with a regression curve: y = 2.83 · 107× - 5.51 · 105 and a determination coefficient of 0.9998. The limit of detection (LOD) was 100 ng · mL-1 and the limit of quantification was 300 ng · mL-1 (for details of calculation see Additional file 1).
Additional file 1. Worksheet “Calib-curve” presents the data used to draw the calibration curve for nicotine. Some extra-data regarding this experiment can be obtained from the worksheet “Dilutions”. The worksheet “Precision” presents the data used to calculate the precision of the analytical method. The worksheet “Accuracy” presents the data used to calculate the accuracy of the analytical method. Several worksheets were used as help the processing the data from the experiments of evaluation the nicotine concentration in the air collected from public places. The worksheet “AIR_SamplePrep” presents the summary of the sample preparation, “AirSamples” present the nicotine concentration, calculated from peak area, “AirSam-Calculus” and “AirSamp_Table” are intermediary calculations and “AirSamp_Fig3” is used to realize the Figure 3. The worksheet “UrineSamples” is used for the experiment of determination of nicotine and cotinine in the urine samples. The worksheet “Solvents” presents the data used to select the best solvent for sample preparation.
Format: XLSX Size: 62KB Download fileOpen Data
Precision was studied by collecting directly with the impinger the smoke from one cigarette and repeating the experiment 5 times. The average nicotine quantity found in the smoke collected during 2 minutes of suction at 0.8 L · min-1 was 1320 ± 60 μg per cigarette (RSD 4.6%).
Accuracy was determined by spiking with reference standard solution (1.25 μg · mL-1) 5 blank samples, i.e. collecting air from a well ventilated laboratory. These samples were treated as described in the Sample Preparation procedure. The data obtained were compared with theoretical concentration (i.e. 1.25 μg · mL-1). Under these conditions the accuracy was expressed as percentage recovery: 89% (RSD 8.0%).
Determination of nicotine in air and nicotine and cotinine in urine sample
In order to prove that there is a correlation between the quantities of nicotine inhaled as SHS at the working place, for two volunteers subjects (a non-smoker working in a pub where smoking was allowed and a non-smoker janitor from a hospital) the urine samples were also analyzed. Both of them have been working in their institutions for more than 6 months. The nicotine and cotinine levels present in their urine were considerably higher than the levels found in the urine of a technician (also non-smoker) working in a ventilated laboratory.
MS/MS optimized conditions for the Xevo TQD MS instrument are presented in Table 1. Figure 1 presents MS/MS spectra of nicotine (a panel) and cotinine (b panel). These spectra were used to select appropriate transitions for the quantification of these two analytes.
Table 1. Mass spectrometer parameters for nicotine and cotinine detection
thumbnailFigure 1. Fragmentation mass spectra of nicotine (upper panel) and cotinine (lower panel) in the conditions mentioned in Table 1.
As it can see from Table 2, there is a significant connection between the level of nicotine in the breathed air and the urine level of nicotine and cotinine, proving that the secondary smoke can be almost as dangerous as the primary/direct smoking.
Table 2. Correlation between SHS expressed as nicotine in inhaled air for 8 h and nicotine and cotinine level in urine
As an example, Figure 2 shows two MRM chromatograms (transition 163 > 130) for nicotine analysis in air in a non-smoking pub (upper panel) and a smoking pub (lower panel). The difference between the nicotine content in those two environments, given by the scale in the top right corner, is of two orders of magnitude.
thumbnailFigure 2. Nicotine MRM (transition 163 > 130) chromatogram of the air sampled from a non-smoking pub (upper panel) and a smoking pub (lower panel). The conditions are presented in Table 1.
Air nicotine concentrations (ng · L-1) in different types of buildings
พื้นหลังการตรวจสอบอากาศนิโคตินเป็นขั้นตอนรู้จักการประเมินของการสัมผัสกับควันมือสอง ศึกษาวิจัยน้อยได้รับรู้ในโรมาเนียเพื่อประเมินความเสี่ยงสิ่งแวดล้อมควันยาสูบ (ETS) ของมนุษย์ในสถานสาธารณะต่าง ๆ มีวิเคราะห์ระดับของนิโคตินอากาศจากสิ่งแวดล้อมยาสูบควัน และท่อปัสสาวะ cotinine และนิโคตินระดับบางเรื่อง ดี ใช้/บังคับใช้กฎหมายยุโรปเกี่ยวกับตรวจของการสูบบุหรี่ในสถานสาธารณะแห่งชาติหน่วยงานต้องรวดเร็ว และเชื่อถือได้วิเคราะห์วิธีการประเมินอย่างรวดเร็วสถานะของมลพิษกับบุหรี่ควันด้านประชากรผลลัพธ์ความเข้มข้นนิโคตินในอาคารสาธารณะประเภทต่าง ๆ ที่ถูกกำหนด ความเข้มข้นมัธยฐานของนิโคตินในอากาศจากผับ 32 ที่สูบบุหรี่ที่ได้รับอนุญาตถูก 590 ng · L-1 เปรียบเทียบกับผับที่สูบบุหรี่ที่ไม่ได้รับอนุญาต (22 ตำแหน่ง) ที่เข้มข้นมัธยฐานของนิโคตินได้เฉพาะ 32 ng · L-1 ในทำนองเดียวกัน ความเข้มข้นมัธยฐานของนิโคตินในบุหรี่ที่ได้รับอนุญาต (23 ตำแหน่ง) ที่ร้านอาหารถูก 510 ng · L-1 เมื่อเปรียบเทียบกับร้านอาหารที่ปลอดบุหรี่ที่ถูกห้าม (11 สถาน) ซึ่งค่ามัธยฐานคือ 19 ng · L-1 ความเข้มข้นต่ำสุดของนิโคตินพบในโรงเรียนสูง (8 สถาน เข้มข้นมัธยฐาน 7.4 ng · L-1), มหาวิทยาลัย (ตำแหน่งที่ 5, 23 ng · L-1) และโรงพยาบาล (ตำแหน่งที่ 6, 16 ng · L-1)บทสรุปวิธีการถูกตรวจสอบ และให้ดีแบบดอกไม้ ความแม่นยำ ความถูกต้อง และขีดจำกัดของการตรวจสอบ อาคารรวมโรงพยาบาล โรงเรียนสูง มหาวิทยาลัย ผับ และร้านอาหาร บันทึกของนิโคตินอากาศในอาคารทั้งหมดที่ศึกษา มัธยฐานระดับสูงสุดของอากาศนิโคตินพบในผับและร้านอาหาร ของนิโคตินในอากาศในอาคารสาธารณะในร่มบ่งชี้นำอ่อนแอกฎหมายฟรีควันในโรมาเนียคำสำคัญ: อากาศ นิโคติน Cotinine UPLC – MS ETSพื้นหลังควันยาสูบสิ่งแวดล้อม (ETS) เป็นแพร่หลายที่สุด carcinogenic ไง เป็นสารก่อมะเร็งเป็นคลาส A อย่างใดอย่างหนึ่ง และถือเป็นความเสี่ยงทางอาชีวอนามัย preventable ETS เป็นรู้จักที่จะเป็นปัจจัยเสี่ยงสำคัญสำหรับโรคเรื้อรังต่าง ๆ เช่นโรคมะเร็งปอด [1-3], โรค [4-7] และโรคหอบหืด [8-10] สำรวจหลายความได้จัดทำเอกสารการเชื่อมโยงระหว่างความเสี่ยง (SHS) ควันมือสอง และ morbidity เพิ่มขึ้น และการตาย [11]คนได้เริ่มตระหนักว่า SHS แสงตั้งแต่ศึกษาขึ้นในระหว่างทศวรรษ 9 ศตวรรษก่อนหน้านี้ [12] การที่อนุสัญญาควบคุมยาสูบส่งเสริมสภาพแวดล้อมที่ปลอดบุหรี่เพื่อป้องกันสุขภาพของสูบบุหรี่ SHS [13] เผยแพร่ผลการศึกษาตรวจสอบของ ETS เป็นสิ่งสำคัญมากโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับคนหนุ่มสาว เนื่องจากในกลุ่มอายุ 15-17 ปี มีหลายท่านที่พึ่งนิโคติน [14-16] แข็งแรงโรมาเนีย ตั้งแต่ 2005 การสูบบุหรี่ในบางสถานสาธารณะเป็นสิ่งต้องห้ามตามกฎหมายแห่งชาติ [17], ที่ประกอบด้วยข้อจำกัดของการสูบบุหรี่ในพื้นที่ต่าง ๆ เช่นสถานสาธารณะ โรงพยาบาล โรงเรียนสูง ทำงาน ร้านอาหารสูบ บุหรี่ บัส และ ดีหญิงตั้งครรภ์และเด็ก [14] ใช้กฎหมายยังคงไม่ใหญ่ในเจ็ดปีแรกวัดนิโคตินจะมีความไวสูงเนื่องจากเป็นไบโอมาร์คเกอร์เฉพาะควันยาสูบที่แสดงแหล่งที่มาของนิโคตินในอากาศเท่า ฝากนิโคตินเกือบทั้งหมดบนพื้นผิวภายในในความเข้มข้นประมาณ 30 μg · m-3 และยังคงอยู่ในสัปดาห์เดือน [18,19] นิโคตินเป็นอย่างรวดเร็ว metabolized เวลาครึ่งชีวิตอยู่ประมาณ 2 h [20] Cotinine, metabolite นิโคตินหลักกับเวลาครึ่งชีวิตของ 20 h อย่างใดอย่างหนึ่งมักใช้สำหรับการประเมินการสัมผัสควันยาสูบ และเป็นโดยปกติจะตรวจหลายวัน (ถึงหนึ่งสัปดาห์) หลังจากการใช้ยาสูบ [20,21] สามารถวัด Cotinine ในของเหลวของร่างกายต่าง ๆ หรือเนื้อเยื่อรวมทั้งเลือดปัสสาวะ น้ำลาย ผม, [23] [22] และฟัน [24] ไบโอเครื่องนี้สามารถแยกความแตกต่างระดับของบริโภคและระดับของการสัมผัสกับควันยาสูบ เวลาที่ต้องการได้รับการเพิ่มระดับของ cotinine ท่อปัสสาวะจะสูงกว่า 10 h หลังจาก ETS หนักในการสูบบุหรี่แฝง [14]วิธีการที่ใช้มากที่สุดสำหรับ ETS ที่ตรวจสอบมีแก๊ส chromatography (GC) กับเปลวไฟตรวจ ionization (FID) หรือตรวจจับเฉพาะไนโตรเจน [25], ขึ้น GC ควบ คู่ ด้วยอิเล็กตรอนตรวจโดยรวมผลกระทบ (EI-MS) [14,23,24,26] และประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) กับ MS จับ [27,28]ระบบเฝ้าระวังที่มีอยู่ในประเทศโรมาเนียมีกลไกสำหรับการวัดแสงการ SHS เป็นประจำ มีการศึกษาหรือวิจัยที่สัมผัส SHS ในสภาพแวดล้อมที่แตกต่างกันไม่กี่ ในการศึกษาปัจจุบัน ประเมินสิ่งแวดล้อมได้ใช้ลักษณะของ SHS แสงในสถานสาธารณะภายในสำคัญในโรมาเนีย เอกสารนี้แสดงประสิทธิภาพของระบบของเหลว chromatography – มวล spectrometric (UPLC – MS) เชิงปริมาณวิธีการระดับนิโคตินในอากาศภายในอาคาร และวัดระดับของนิโคตินอากาศในบางสาธารณะต่าง ๆ เป็นเครื่องหมายที่ใช้ควันยาสูบผลลัพธ์การประเมินของตัวทำละลายสกัดAcetonitrile ถูกเลือกเป็นการสุ่มตัวอย่างตัวทำละลายเนื่องจากมัน adsorbs/ละลาย ปริมาณสูงสุดของนิโคติน เปรียบเทียบกับอื่นสองหรือสารทำละลายใช้ (เช่นเมทานอลและ dichloromethane) นอกจากนี้ การเจือจางเพิ่มเติมและ/หรือขั้นตอนการระเหยสามารถใช้ใช้ dichloromethaneวิธีการตรวจสอบตัวอย่าง aliquot 0.005, 0.02, 0.078, 0.313, 1.250 และ 5 μg · นิโคติน mL 1 ใน acetonitrile ถูกใช้สำหรับการตรวจสอบวิธีกราฟปรับเทียบผลจากการวิเคราะห์เทียบโซลูชั่นมาตรฐานที่จัดทำในระหว่างช่วงทั้งหมดของโซลูชั่นเทียบกับเส้นโค้งถดถอยไม่เชิงเส้น acetonitrile: y = 2.83 · × 107 - 5.51 · 105 และสัมประสิทธิ์ความมุ่งมั่นของ 0.9998 ขีดจำกัดของการตรวจสอบ (ลอด) ถูก 100 ng · ถูก 300 ng · mL-1 และจำนวนนับ mL-1 (สำหรับรายละเอียดของการคำนวณดูเพิ่มเติมแฟ้ม 1)เพิ่มเติมไฟล์ 1 แผ่นงาน "Calib-โค้ง" นำเสนอข้อมูลที่ใช้ในการวาดเส้นโค้งเทียบสำหรับนิโคติน บางข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการทดลองนี้ได้จากแผ่นงาน "Dilutions" แผ่นงาน "ความแม่นยำ" แสดงข้อมูลที่ใช้ในการคำนวณความแม่นยำของวิธีวิเคราะห์ แผ่นงาน "ถูกต้อง" แสดงข้อมูลที่ใช้ในการคำนวณความถูกต้องของวิธีวิเคราะห์ แผ่นงานต่าง ๆ ถูกใช้เป็นช่วยประมวลผลการเก็บรวบรวมข้อมูลจากการทดลองการประเมินเข้มข้นนิโคตินในอากาศจากสถานสาธารณะ แผ่นงาน "AIR_SamplePrep" นำเสนอสรุปการเตรียมตัวอย่าง "AirSamples" แสดงความเข้มข้นนิโคติน คำนวณจากพื้นที่สูงสุด "AirSam-แคลคูลัส" และ "AirSamp_Table" เป็นตัวกลางการคำนวณ และใช้ "AirSamp_Fig3" เพื่อตระหนักถึง 3 รูป แผ่นงาน "UrineSamples" ใช้ในการทดลองของความมุ่งมั่นของนิโคตินและ cotinine ในตัวอย่างปัสสาวะ แผ่นงาน "หรือสารทำละลาย" แสดงข้อมูลที่ใช้ในการเลือกตัวทำละลายที่ดีที่สุดสำหรับการเตรียมตัวอย่างรูปแบบ: XLSX ขนาด: fileOpen 62KB ดาวน์โหลดข้อมูลมีศึกษาความแม่นยำ โดยรวบรวมโดยตรงกับใน impinger ควันจากบุหรี่หนึ่ง และทดลองซ้ำ 5 ครั้ง ปริมาณนิโคตินเฉลี่ยที่พบในควันรวบรวมในช่วงนาทีที่ 2 ของดูดที่ 0.8 L · 1 นาทีได้ μg ± 60 1320 ต่อบุหรี่ (RSD 4.6%)ความถูกต้องถูกกำหนด โดย spiking ด้วยสารละลายมาตรฐานอ้างอิง (1.25 μg · mL-1) ตัวอย่างเปล่า 5 อากาศเช่นเก็บรวบรวมจากห้องปฏิบัติการดีสม่ำเสมอ ตัวอย่างเหล่านี้ได้รับการรักษาตามที่อธิบายไว้ในขั้นตอนการเตรียมสารตัวอย่าง ข้อมูลที่ได้ถูกเปรียบเทียบกับทฤษฎีความเข้มข้น (เช่น 1.25 μg · mL-1) ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ ความถูกต้องถูกแสดงเปอร์เซ็นต์การกู้: 89% (RSD 8.0%)ความมุ่งมั่นของนิโคตินในอากาศ และนิโคตินและ cotinine ในตัวอย่างปัสสาวะเป็นการพิสูจน์ที่มีความสัมพันธ์ระหว่างปริมาณของนิโคตินที่ช่วยในเป็น SHS ที่สถานที่ทำงาน สำหรับเรื่องอาสาสมัครสอง (ทำงานไม่สูบบุหรี่ในผับที่มีการอนุญาตให้สูบบุหรี่และ janitor บุหรี่จากโรงพยาบาล) ตัวอย่างปัสสาวะก็ยังวิเคราะห์ พวกเขาทั้งสองได้ทำงานในสถาบันของพวกเขามากกว่า 6 เดือน นิโคตินและ cotinine ระดับอยู่ในปัสสาวะของพวกเขามีมากสูงกว่าระดับที่พบในปัสสาวะทำงานเป็นช่างเทคนิค (นอกจากนี้บุหรี่) ในห้องปฏิบัติสม่ำเสมอMS/MS ปรับเงื่อนไขสำหรับเครื่อง Xevo TQD MS จะแสดงในตารางที่ 1 รูปที่ 1 แสดงแรมสเป็คตรา MS/MS ของนิโคติน (แผง) และ cotinine (b แผง) แรมสเป็คตราเหล่านี้ถูกใช้เพื่อเลือกช่วงที่เหมาะสมสำหรับนับของ analytes เหล่านี้สองตารางที่ 1 สเปกโตรมิเตอร์โดยรวมพารามิเตอร์ตรวจนิโคตินและ cotininethumbnailFigure 1 การกระจายตัวของมวลแรมสเป็คตรานิโคติน (บนแผง) และ cotinine (แผงล่าง) ในเงื่อนไขที่ระบุไว้ในตารางที่ 1มันสามารถดูได้จากตารางที่ 2 มีการเชื่อมต่อที่สำคัญระหว่างระดับของนิโคตินในอากาศ breathed และปัสสาวะระดับนิโคตินและ cotinine พิสูจน์ว่า ควันรองสามารถเกือบจะเป็นอันตรายเป็นบุหรี่ตรงหลักตารางที่ 2 ความสัมพันธ์ระหว่างแสดงเป็นนิโคตินในระดับ 8 h และนิโคติน และ cotinine ในปัสสาวะสูดดมอากาศ SHSเป็นตัวอย่าง รูปที่ 2 แสดงสอง MRM chromatograms (เปลี่ยน 163 > 130) สำหรับการวิเคราะห์นิโคตินในอากาศในผับบุหรี่ (บนแผง) และผับสูบบุหรี่ (แผงล่าง) ความแตกต่างระหว่างเนื้อหานิโคตินระบบที่สอง โดยสเกลที่มุมขวาบน เป็นอันดับสองของขนาดthumbnailFigure 2 Chromatogram MRM (เปลี่ยน 163 > 130) นิโคตินอากาศตัวอย่างบุหรี่ผับ (บนแผง) และผับสูบบุหรี่ (แผงล่าง) เงื่อนไขจะนำเสนอในตารางที่ 1อากาศความเข้มข้นนิโคติน (ng · L-1) อาคารประเภทต่าง ๆ
การแปล กรุณารอสักครู่..
Background
Air nicotine monitoring is a well-known procedure for estimation of exposure to second hand smoke. Few research studies were realized in Romania to evaluate environmental tobacco smoke (ETS) exposure of humans in different public places. The levels of airborne nicotine from environmental tobacco smoke and urinary cotinine and nicotine levels of some subjects were analyzed. In order to better implement/enforce the European legislation regarding the interdiction of smoking in the public places the national authorities need a rapid and reliable analytical method to quickly asses the state of the pollution with cigarette smoke of these populated areas.
Results
The nicotine concentration in the air from different types of public buildings was determined. The median concentration of nicotine in the air from 32 pubs where the smoking was allowed was 590 ng · L-1, comparing with the pubs where the smoking was not permitted (22 locations) where the median concentration of nicotine was only 32 ng · L-1. Similarly, the median concentration of nicotine in restaurants where the smoking was allowed (23 locations) was 510 ng · L-1, in comparison with the restaurants where the smoking was prohibited (11 places) where the median value was 19 ng · L-1. The lowest concentrations of nicotine were found in high schools (8 locations, median concentration 7.4 ng · L-1), universities (5 locations, 23 ng · L-1) and hospitals (6 locations, 16 ng · L-1).
Conclusions
The method was validated and gave good linearity, precision, accuracy and limit of detection. The buildings included hospitals, high schools, universities, pubs and restaurants. The presence of air nicotine was recorded in all buildings studied. The highest median levels of air nicotine were found in pubs and restaurants. The presence of air nicotine in indoor public buildings indicates weak implementation of the smoke free law in Romania.
Keywords: Air; Nicotine; Cotinine; UPLC–MS; ETS
Background
Environmental tobacco smoke (ETS) is one of the most widespread carcinogenic exposures, being a class A carcinogen, and is considered a preventable occupational health risk. ETS is recognized to be an important risk factor for several chronic diseases such as lung cancer [1-3], coronary heart disease [4-7] and asthma [8-10]. Several epidemiological surveys have documented the link between second hand smoke (SHS) exposure and increased morbidity and mortality [11].
People have become aware of SHS exposure since the studies made during the 9th decade of the previous century [12]. The WHO Framework Convention on Tobacco Control promotes smoke-free environments to protect the health of nonsmokers from SHS [13]. The dissemination of the ETS monitoring studies results is very important especially for young people, because in the age group of 15 to 17 years, there are many persons who have a strong dependence on nicotine [14-16].
In Romania, since 2005 smoking in some public places is prohibited by the national law [17], that contains restriction of smoking in different areas such as public places, hospitals, high schools, workplaces, restaurants for nonsmokers, buses and in the vicinity of pregnant women and children [14]. The implementation of the law remained largely ineffective in the first seven years.
Measurement of nicotine is highly sensitive because it is a specific biomarker of tobacco smoke that represents the only possible source of nicotine in the air. Nicotine deposits almost entirely on indoor surfaces in a concentration of about 30 μg · m-3, and persists for weeks to months [18,19]. Nicotine is rapidly metabolized, the half life time being about 2 h [20]. Cotinine, one of the major nicotine metabolite with a half life time of 20 h is frequently used for assessing tobacco smoke exposure and is typically detectable for several days (up to one week) after the use of tobacco. [20,21]. Cotinine can be measured in different body fluids or tissues including blood [22] urine, saliva, hair, [23] and teeth [24]. This bio-marker can differentiate the levels of exposure to tobacco smoke and levels of intake. The time needed to acquire increased levels of urinary cotinine is higher than 10 h after heavy ETS in a passive smoker [14].
The methods most used for the ETS monitoring are gas chromatography (GC) with flame ionization detection (FID) or nitrogen specific detectors [25], or GC coupled, with electron impact mass spectrometers (EI-MS) [14,23,24,26] as well as high performance liquid chromatography (HPLC) with MS detectors [27,28].
The existing surveillance system in Romania has no mechanism for routinely measuring exposure to SHS. There have been few studies or researches to look at exposure to SHS in different environments. In the current study, environmental measurements were used to characterize SHS exposure in key indoor public places in Romania. This paper presents an ultra performance liquid chromatography–mass spectrometric (UPLC–MS) quantitative method for nicotine levels in the indoor air, and for measuring the levels of airborne nicotine in some public houses, as a selective marker of tobacco smoke.
Results
Evaluation of the extraction solvent
Acetonitrile was selected as sampling solvent because it adsorbs/dissolves the highest quantity of nicotine, comparing with the other two solvents used (i.e. methanol and dichloromethane). Moreover, an additional dilution and/or evaporation step could be needed if using dichloromethane.
Method validation
Aliquot samples containing 0.005, 0.02, 0.078, 0.313, 1.250, and 5 μg · mL-1 nicotine in acetonitrile were used for the method validation.
The calibration graph resulted from the analysis of the calibration standard solutions prepared in acetonitrile was linear during the entire range of calibration solutions with a regression curve: y = 2.83 · 107× - 5.51 · 105 and a determination coefficient of 0.9998. The limit of detection (LOD) was 100 ng · mL-1 and the limit of quantification was 300 ng · mL-1 (for details of calculation see Additional file 1).
Additional file 1. Worksheet “Calib-curve” presents the data used to draw the calibration curve for nicotine. Some extra-data regarding this experiment can be obtained from the worksheet “Dilutions”. The worksheet “Precision” presents the data used to calculate the precision of the analytical method. The worksheet “Accuracy” presents the data used to calculate the accuracy of the analytical method. Several worksheets were used as help the processing the data from the experiments of evaluation the nicotine concentration in the air collected from public places. The worksheet “AIR_SamplePrep” presents the summary of the sample preparation, “AirSamples” present the nicotine concentration, calculated from peak area, “AirSam-Calculus” and “AirSamp_Table” are intermediary calculations and “AirSamp_Fig3” is used to realize the Figure 3. The worksheet “UrineSamples” is used for the experiment of determination of nicotine and cotinine in the urine samples. The worksheet “Solvents” presents the data used to select the best solvent for sample preparation.
Format: XLSX Size: 62KB Download fileOpen Data
Precision was studied by collecting directly with the impinger the smoke from one cigarette and repeating the experiment 5 times. The average nicotine quantity found in the smoke collected during 2 minutes of suction at 0.8 L · min-1 was 1320 ± 60 μg per cigarette (RSD 4.6%).
Accuracy was determined by spiking with reference standard solution (1.25 μg · mL-1) 5 blank samples, i.e. collecting air from a well ventilated laboratory. These samples were treated as described in the Sample Preparation procedure. The data obtained were compared with theoretical concentration (i.e. 1.25 μg · mL-1). Under these conditions the accuracy was expressed as percentage recovery: 89% (RSD 8.0%).
Determination of nicotine in air and nicotine and cotinine in urine sample
In order to prove that there is a correlation between the quantities of nicotine inhaled as SHS at the working place, for two volunteers subjects (a non-smoker working in a pub where smoking was allowed and a non-smoker janitor from a hospital) the urine samples were also analyzed. Both of them have been working in their institutions for more than 6 months. The nicotine and cotinine levels present in their urine were considerably higher than the levels found in the urine of a technician (also non-smoker) working in a ventilated laboratory.
MS/MS optimized conditions for the Xevo TQD MS instrument are presented in Table 1. Figure 1 presents MS/MS spectra of nicotine (a panel) and cotinine (b panel). These spectra were used to select appropriate transitions for the quantification of these two analytes.
Table 1. Mass spectrometer parameters for nicotine and cotinine detection
thumbnailFigure 1. Fragmentation mass spectra of nicotine (upper panel) and cotinine (lower panel) in the conditions mentioned in Table 1.
As it can see from Table 2, there is a significant connection between the level of nicotine in the breathed air and the urine level of nicotine and cotinine, proving that the secondary smoke can be almost as dangerous as the primary/direct smoking.
Table 2. Correlation between SHS expressed as nicotine in inhaled air for 8 h and nicotine and cotinine level in urine
As an example, Figure 2 shows two MRM chromatograms (transition 163 > 130) for nicotine analysis in air in a non-smoking pub (upper panel) and a smoking pub (lower panel). The difference between the nicotine content in those two environments, given by the scale in the top right corner, is of two orders of magnitude.
thumbnailFigure 2. Nicotine MRM (transition 163 > 130) chromatogram of the air sampled from a non-smoking pub (upper panel) and a smoking pub (lower panel). The conditions are presented in Table 1.
Air nicotine concentrations (ng · L-1) in different types of buildings
การแปล กรุณารอสักครู่..
ตรวจสอบอากาศนิโคตินพื้น
เป็นขั้นตอนที่รู้จักกันดีสำหรับการประมาณค่าของการสัมผัสควันบุหรี่มือสอง . การศึกษาวิจัยมีตระหนักในโรมาเนียเพื่อประเมินการสัมผัสควันบุหรี่สิ่งแวดล้อม ( ETS ) ของมนุษย์ในสถานที่สาธารณะต่าง ๆ ระดับของนิโคตินในควันบุหรี่สิ่งแวดล้อมและโคตินินในปัสสาวะ จากระดับนิโคตินในบางวิชา วิเคราะห์เพื่อให้ใช้บังคับกฎหมาย / ยุโรปเกี่ยวกับการห้ามสูบบุหรี่ในสถานที่สาธารณะเจ้าหน้าที่แห่งชาติต้องการอย่างรวดเร็วและเชื่อถือได้วิธีการวิเคราะห์ได้อย่างรวดเร็วประเมินสภาพมลพิษควันบุหรี่เหล่านี้พื้นที่
ผลความเข้มข้นของนิโคตินในอากาศจากประเภทที่แตกต่างกันของอาคารสาธารณะได้พิจารณาที่มีความเข้มข้นของนิโคตินในอากาศจากผับที่สูบบุหรี่ได้รับอนุญาตเป็น 590 ของ · L-1 เปรียบเทียบกับผับที่สูบบุหรี่ไม่ได้รับอนุญาต ( 22 ตำแหน่ง ) ที่ความเข้มข้นเฉลี่ยของนิโคตินเป็นเพียง 32 นาโน · L-1 . ส่วนมัธยฐานความเข้มข้นของนิโคตินในร้านอาหารที่สูบบุหรี่ได้รับอนุญาต ( 23 ที่ตั้งของ · L-1 ) 510 ,ในการเปรียบเทียบกับร้านอาหารที่การสูบบุหรี่เป็นสิ่งต้องห้าม ( 11 แห่ง ) ที่ค่ามัธยฐานอายุ 19 ของ · L-1 . ความเข้มข้นต่ำสุดของนิโคตินที่พบในโรงเรียนมัธยม ( 8 สถานที่ มัธยฐานความเข้มข้น 7.4 ของ · L-1 ) มหาวิทยาลัย ( 5 ตำแหน่ง , 23 ของ · L-1 ) และโรงพยาบาล ( 6 ตำแหน่ง 16 ของ · L-1 )
สรุปวิธีตรวจสอบให้ดีถึง แน่นอนความถูกต้องและขีด จำกัด ของการตรวจสอบ อาคาร ได้แก่ โรงพยาบาล , โรงเรียน , มหาวิทยาลัย , ผับและร้านอาหาร การปรากฏตัวของอากาศนิโคตินที่ถูกบันทึกไว้ในอาคารทั้งหมดที่ศึกษา สูงสุดเฉลี่ยของอากาศระดับนิโคตินที่พบในผับและร้านอาหาร การปรากฏตัวของอากาศในอาคารสาธารณะในร่ม บ่งชี้ว่า การใช้สารนิโคตินที่อ่อนแอของควันฟรีกฎหมายในประเทศโรมาเนีย
คำสำคัญ : airนิโคติน โคตินิน ; uplc – MS ; แผ่นพื้นหลังควันบุหรี่สิ่งแวดล้อม
( ETS ) เป็นหนึ่งในที่แพร่หลายมากที่สุด เปิดรับสารก่อมะเร็ง เป็นคลาส สารก่อมะเร็ง และถือเป็นความเสี่ยงด้านอาชีวอนามัย สามารถป้องกันได้ . ETS ได้รับการยอมรับเป็นปัจจัยเสี่ยงสำคัญสำหรับโรคเรื้อรังต่าง ๆเช่นโรคมะเร็งปอด [ 1-3 ] , โรคหลอดเลือดหัวใจและโรคหอบหืด [ 4-7 ] [ 8-10 ]การสำรวจหลายและมีเอกสารที่เชื่อมโยงระหว่างควันบุหรี่มือสอง ( SHS ) เปิดรับและการเพิ่มขึ้นของการเจ็บป่วยและการตาย [ 11 ] .
มีคนตระหนักถึงการสัมผัสควันบุหรี่มือสองนั้นตั้งแต่การศึกษาทำในช่วง 9 ทศวรรษแห่งศตวรรษ [ หน้าที่ 12 ] กรอบอนุสัญญาควบคุมการบริโภคยาสูบ องค์การอนามัยโลกส่งเสริมสภาพแวดล้อมที่ปลอดบุหรี่เพื่อคุ้มครองสุขภาพของผู้ไม่สูบบุหรี่จาก SHS [ 13 ]การเผยแพร่ของ ETS ตรวจสอบผลการศึกษาเป็นสิ่งสำคัญมากโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับหนุ่มสาว เพราะในกลุ่มอายุ 15 - 17 ปี มีคนมากมายที่ต้องอาศัยแรงในนิโคติน [ ซึ่ง ] .
ในโรมาเนีย ตั้งแต่ปี 2005 สูบบุหรี่ในบางสถานที่ สาธารณะเป็นสิ่งต้องห้ามโดยกฎหมายระดับชาติ [ 17 ] ที่มีข้อ จำกัด ของการสูบบุหรี่ในพื้นที่ต่าง ๆ เช่น สถานที่ สาธารณะโรงพยาบาล โรงเรียน สถานประกอบการ ร้านอาหาร สำหรับผู้ไม่สูบบุหรี่ , รถโดยสารและในบริเวณใกล้เคียงของหญิงตั้งครรภ์และเด็ก [ 14 ] ในการดำเนินการตามกฎหมาย ยังคงไม่มีผลไปใน 7 ปีแรก วัด
ของนิโคตินมีความไวสูง เพราะมันเป็นเฉพาะไบโอมาร์คเกอร์ของควันบุหรี่ที่เป็นเพียงที่เป็นไปได้แหล่งที่มาของนิโคตินในอากาศนิโคตินเงินฝากเกือบทั้งหมดในร่มพื้นผิวในระดับความเข้มข้นประมาณ 30 μกรัม · m-3 และยังคงอยู่สำหรับสัปดาห์เดือน [ 18,19 ] นิโคตินอย่างรวดเร็วเผาผลาญชีวิตครึ่งหนึ่งของเวลาที่เกี่ยวกับ 2 h [ 20 ] โคตินิน ,หนึ่งของนิโคตินระดับสาขากับชีวิตครึ่งเวลา 20 ชั่วโมงมักใช้เพื่อประเมินการสัมผัสควันบุหรี่ และมักจะได้หลายวัน ( ถึงหนึ่งสัปดาห์หลังจากการใช้ยาสูบ [ 20,21 ] โคตินินสามารถวัดของเหลวในร่างกายที่แตกต่างกัน ได้แก่ เลือด หรือเนื้อเยื่อ [ 22 ] ปัสสาวะ , น้ำลาย , ผม , [ 23 ] และฟัน [ 24 ]ไบโอ เครื่องหมายนี้สามารถแยกระดับของควันบุหรี่ และระดับของการบริโภค เวลาที่จำเป็นในการได้รับการเพิ่มขึ้นของระดับโคตินินในปัสสาวะสูงกว่า 10 ชั่วโมงหลังจากที่ ETS หนักในการสูบบุหรี่ passive [ 14 ] .
วิธีส่วนใหญ่ที่ใช้สำหรับการตรวจสอบแผ่นก๊าซโครมาโทกราฟี ( GC ) กับการตรวจหาไอเปลว ( FID ) หรือไนโตรเจนเฉพาะเครื่องตรวจจับ [ 25 ] หรือ GC คู่กันกับผลกระทบมวลอิเล็กตรอนา ( ei-ms ) [ 14,23,24,26 ] เช่นเดียวกับวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) กับ MS ตรวจจับ [ 27,28 ] .
ระบบเฝ้าระวังที่มีอยู่ในโรมาเนียไม่มีกลไกสำหรับตรวจวัดแสง SHS . มีการศึกษาน้อย หรือวิจัยเพื่อดูแสง SHS ในสภาพแวดล้อมที่แตกต่างกัน ในการศึกษาปัจจุบันการตรวจวัดสิ่งแวดล้อมถูกใช้เพื่อแสดงลักษณะการสัมผัสควันบุหรี่มือสองนั้น คีย์สถานที่สาธารณะในร่มในโรมาเนีย บทความนี้นำเสนอการแสดงพิเศษ liquid chromatography และมวลความ ( uplc ( MS ) การวิเคราะห์เชิงปริมาณสำหรับระดับนิโคตินในอากาศในร่มและวัดระดับของนิโคตินในอากาศบางบ้านประชาชน เป็นเครื่องหมายที่เลือกของควันบุหรี่ ผล
ผลของการสกัดด้วยตัวทำละลาย
ไน ถูกเลือกเป็นตัวทำละลาย ) เพราะมัน adsorbs / ละลายปริมาณสูงสุดของนิโคติน เมื่อเทียบกับอีกสองชนิดที่ใช้ ( เช่นเมทานอลไดคลอโรมีเทน ) นอกจากนี้ เพิ่มเติมการเจือจางและ / หรือการระเหยขั้นตอนอาจจำเป็นถ้าโดยใช้ไดคลอโรมีเทน
วิธีการตรวจสอบ
ส่วนลงตัวตัวอย่างที่มี 0.005 , 0.02 , 0.078 , 0.313 ,1.250 และ 5 μกรัมแน่นอน · นิโคตินในไนใช้สำหรับวิธีการตรวจสอบ
ปรับแต่งกราฟ เป็นผลจากการวิเคราะห์ของการสอบเทียบมาตรฐานโซลูชั่นเตรียมโตไนไตรล์เป็นเส้นตรงในช่วงทั้งหมดของโซลูชั่นการสอบเทียบกับเส้นโค้ง : Y = 2.83 · 107 × - อีก · 105 และการกําหนด สัมประสิทธิ์ของเบียร์ขีดจำกัดของการตรวจหา ( LOD ) 100 กรัม · แน่นอนและจำกัดปริมาณ 300 กรัม · แน่นอน ( รายละเอียดของการคำนวณดูแฟ้มเพิ่มเติม 1 ) .
เพิ่มเติมไฟล์ 1 . " calib แผ่นโค้ง " แสดงข้อมูลที่ใช้ในการวาดรูปโค้งสำหรับนิโคติน บางข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการทดลองนี้สามารถหาได้จากแผ่นงาน " เจือจาง "แผ่นงาน " ความแม่นยำ " นำเสนอข้อมูลที่ใช้เพื่อคำนวณความแม่นยำของวิธีวิเคราะห์ แผ่นงาน " ความถูกต้อง " นำเสนอข้อมูลที่ใช้เพื่อคำนวณค่าความถูกต้องของวิธีวิเคราะห์ แผ่นงานหลายแผ่น ) มาใช้ช่วยในการประมวลผลข้อมูลที่ได้จากการทดลองประเมินความเข้มข้นของนิโคตินในอากาศเก็บจากที่สาธารณะแผ่นงาน " air_sampleprep " นำเสนอบทสรุปของการเตรียมตัวอย่าง " airsamples " ปัจจุบันความเข้มข้นของนิโคติน คํานวณพื้นที่พีค " airsam แคลคูลัส " และ " airsamp_table " คนกลาง " การคำนวณและ airsamp_fig3 " ใช้ว่า รูปที่ 3แผ่นงาน " urinesamples " ใช้สำหรับการทดลองของปริมาณของนิโคตินและโคตินินในปัสสาวะตัวอย่าง แผ่นงาน " ละลาย " นำเสนอข้อมูลที่ใช้ในการเลือกตัวทำละลายที่ดีที่สุดสำหรับการเตรียมสารตัวอย่าง .
รูปแบบ : ขนาดเปิดไฟล์ : 62kb fileopen
ดาวน์โหลดข้อมูลที่ต้องการศึกษาโดยการเก็บรวบรวมโดยตรงกับเครื่องควันจากบุหรี่และทำซ้ำการทดลอง 5 ครั้ง ค่าเฉลี่ยปริมาณนิโคตินที่พบในควันเก็บในช่วง 2 นาทีของการดูดที่ 0.8 ลิตร · min-1 ก็จะ ± 60 μกรัมต่อบุหรี่ ( RSD 4.6% ) .
ความถูกต้องถูกกำหนดโดยขึ้นกับวิธีมาตรฐานอ้างอิง ( 1.25 กรัม · μแน่นอน ) 5 ตัวอย่างเปล่า เช่นเก็บอากาศจากอากาศถ่ายเทได้ดีใน ห้องปฏิบัติการ ตัวอย่างเหล่านี้ถูกอธิบายไว้ในตัวอย่างการเตรียมขั้นตอน ข้อมูลที่ได้ถูกนำไปเปรียบเทียบกับทฤษฎี ( เช่น μความเข้มข้น 1.25 กรัม · แน่นอน ) ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้จะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ความถูกต้องคืน : 89% ( RSD 8.0% )
ปริมาณของนิโคตินในอากาศและสารนิโคตินและโคตินินในปัสสาวะ
เพื่อที่จะพิสูจน์ว่ามีความสัมพันธ์ระหว่างปริมาณของนิโคตินสูดดมเป็น SHS ในสถานที่ทำงาน สองอาสาสมัครมีนักสูบบุหรี่ที่ไม่ใช่ทำงานในผับที่สูบบุหรี่ไม่ได้รับอนุญาต และนักสูบบุหรี่ที่ไม่ใช่ภารโรงจากโรงพยาบาล ) ตัวอย่างปัสสาวะยังวิเคราะห์ ทั้งสองของพวกเขาได้ทำงานในสถาบันของตนมากกว่า 6 เดือนนิโคตินและระดับโคตินินในปัสสาวะของพวกเขาถูกมากปัจจุบันสูงกว่าระดับที่พบในปัสสาวะของช่างเทคนิค ( สูบบุหรี่ ) ทำงานในการระบายอากาศในห้องปฏิบัติการ
MS / MS ปรับเงื่อนไขสำหรับ xevo tqd MS เครื่องมือจะแสดงในตารางที่ 1 รูปที่ 1 แสดง MS / MS spectra ของนิโคติน ( แผง ) และโคตินิน ( 2 แผง )ตรวจสอบเหล่านี้ถูกใช้เพื่อเลือกภาพที่เหมาะสมสำหรับปริมาณของทั้งสองสาร
โต๊ะ 1 แมสสเปกโทรมิเตอร์พารามิเตอร์สำหรับนิโคตินและโคตินินตรวจจับ
thumbnailfigure 1 การกระจายตัวของมวลสเปกตรัมของนิโคติน ( แผงด้านบน ) และโคตินิน ( แผงล่าง ) ในเงื่อนไขที่กล่าวไว้ในตารางที่ 1 .
มันสามารถดูได้จากตารางที่ 2มีการเชื่อมต่อที่สำคัญระหว่างระดับของนิโคตินในลมหายใจ อากาศ และระดับของนิโคตินและโคตินินในปัสสาวะ พิสูจน์ว่าควันบุหรี่สามารถเกือบระดับอันตรายเช่นการสูบบุหรี่โดยตรงหลัก /
โต๊ะ 2 ความสัมพันธ์ระหว่าง SHS แสดงเป็นนิโคตินในสูดดมอากาศ 8 H และนิโคตินระดับโคตินินในปัสสาวะและ
เป็นตัวอย่างรูปที่ 2 แสดงสองกลิ่น mrm ( การเปลี่ยน 163 > 130 ) สำหรับการวิเคราะห์สารนิโคตินในอากาศในเขตปลอดบุหรี่ ผับ ( แผงด้านบน ) และสูบบุหรี่ ผับ ( แผงล่าง ) ความแตกต่างระหว่างปริมาณนิโคตินในทั้งสองสภาพแวดล้อมให้โดยมาตราส่วนในมุมขวาด้านบนเป็นอันดับของขนาดสอง
thumbnailfigure 2นิโคติน mrm ( การเปลี่ยน 163 > 130 ) chromatogram ของตัวอย่างอากาศจากห้องปลอดผับ ( แผงด้านบน ) และสูบบุหรี่ ผับ ( แผงล่าง ) เงื่อนไขจะถูกนำเสนอในตารางที่ 1 .
อากาศนิโคตินชนิดของ · L-1 ) ในรูปแบบต่าง ๆของอาคาร
การแปล กรุณารอสักครู่..