2.6. DNA sequencingSequencing of 16

2.6. DNA sequencing
Sequencing of 16S rDNAwas carried out at Bangalore Genei Pvt. Ltd., Bangalore, India. The 16S rDNA sequences were analyzed with the nucleotide database available at the Gen Bank using the BLAST tool at NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov) for identification of bacteria and then the 16S rDNA sequences were submitted in NCBI Gen Bank for obtaining accession numbers.
2.7. Seed bacterization
Wheat seeds var. HUW 234 was obtained from Banaras Hindu University, Agriculture farm, Varanasi, Uttar Pradesh, India and surface sterilized (0.1% HgCl2 for 2 min and rinsed five times with sterilized water). Pure cultures of B. megaterium, A. chlorophenolicus and Enterobacter sp. were grown in nutrient agar for experiments. A single colony from each strain was transferred into a 50ml flask, containing nutrient broth and grown aerobically in flasks overnight on a rotating shaker (200 rpm) at 30 1C. Bacteria grown on nutrient broth were then diluted with sterile distilled water, containing 0.025% Tween 20 to a final concentration of 107 CFUml
1. For treatments, seeds were placed at a bacterial suspension of 107 CFU (colony forming unit) ml
1 along with sticker solution (2.5g gum acaciaþ5 g sugar in 100 ml distilled water) for 30min before sowing.
2.8. Pot and field experiments
To study the individual and combined effect of strains, pot and field experiments were conducted with wheat var. HUW 234 during rabi season of 2011–12 and 2012–13. Six inoculated treat- ments viz. Control, B. megaterium, A. chlorophenolicus, Enterobacter sp. each in single and combination of A. chlorophenolicusþ Enterobacter sp. and B. megateriumþA. chlorophenolicusþ Enter- obacter sp. were replicated four times. Sandy loam soil (48.9% sand, 30.7% slit and 20.5% clay) collected from Agricultural Research Farm, BHU. The chemical properties of pot and field soil were pH (7.84 and 7.80), EC (0.164 and 0.161 dS m
1), organic carbon (0.50% and 0.502%) (Walkley and Black, 1934), Available N (0.095 g kg
1 and 202.45 kg ha
1)(Subbiah and Asija, 1956), P (0.01 g kg
1 and19.28 kg ha
1)(Olsen et al., 195

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 ลำดับ DNAลำดับเบสของ 16S rDNAwas ทำที่บังกาลอร์ Genei pvt. Ltd. บังกาลอร์ อินเดีย ที่ 16S rDNA ลำดับได้วิเคราะห์กับฐานข้อมูลนิวคลีโอไทด์ ธนาคาร Gen ที่ใช้เครื่องมือระเบิดที่ NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov) สำหรับ identification ของแบคทีเรียแล้ว ได้ส่งธนาคาร NCBI Gen ที่ 16S rDNA ลำดับสำหรับการได้รับเลขทะเบียน2.7. เมล็ด bacterizationข้าวสาลีเมล็ดเพียง HUW 234 ได้รับจาก มหาวิทยาลัยฮินดู Banaras เกษตรฟาร์ม พาราณสี เซีย อินเดีย และพื้นผิว sterilized (0.1% HgCl2 ใน 2 นาทีและเวลา rinsed five ด้วยน้ำ sterilized) วัฒนธรรมบริสุทธิ์ megaterium เกิด A. chlorophenolicus และ sp. Enterobacter ถูกปลูกใน agar ธาตุอาหารสำหรับการทดลอง อาณานิคมเดียวจากแต่ละต้องใช้ถูกโอนย้ายไป flask 50ml ประกอบด้วยธาตุอาหารซุป และเติบโตใน aerobically flasks นอนบนเชคเกอร์หมุนตัว (200 รอบต่อนาที) ที่ 30 1C. แบคทีเรียที่เติบโตบนซุปธาตุอาหารได้แล้วผสมกับน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ ประกอบด้วย 0.025% Tween 20 เพื่อความเข้มข้น final ของ 107 CFUml 1 สำหรับการรักษา เมล็ดถูกจัดวางที่ระงับแบคทีเรีย 107 CFU (อาณานิคมขึ้นรูปหน่วย) ml 1 พร้อมสติ๊กเกอร์โซลูชั่น (2.5 g เหงือก acaciaþ5 g น้ำตาลในน้ำกลั่น 100 มล) สำหรับ 30 นาทีก่อน sowing2.8. หม้อ และทดลอง fieldการศึกษาผลรวม และแต่ละสายพันธุ์ หม้อและ field ได้ดำเนินการทดลองกับข้าวสาลีเพียง HUW 234 ระหว่าง rabi ฤดูกาล 2011 – 12 และ 2012-13 หก inoculated รักษา-ments viz.ควบคุม megaterium เกิด A. chlorophenolicus, Enterobacter sp.แต่ละเดี่ยวและ sp. Enterobacter A. chlorophenolicusþ และ megateriumþA เกิด sp. chlorophenolicusþ obacter ป้อนถูกจำลองแบบสี่ครั้ง Sandy loam ดิน (48.9% ทราย ร่อง 30.7% และ 20.5% ดิน) รวบรวมจากฟาร์มเกษตรวิจัย BHU. คุณสมบัติทางเคมีของดินหม้อและ field ถูก (7.84 และ 7.80), ค่า pH EC (0.161 และ 0.164 dS m 1), อินทรีย์คาร์บอน (0.50% และ 0.502%) (Walkley และดำ 1934), มี N (0.095 g kg กก. 1 และ 202.45 ฮา 1) (Subbiah และ Asija, 1956), P (0.01 g kg 1 and19.28 kg ฮา 1) (โอลเซ็น et al., 195

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 ลำดับดีเอ็นเอ
ลำดับของ 16S rDNAwas ดำเนินการที่บังกาลอร์ Genei Pvt จำกัด , บังกาลอร์, อินเดีย 16S rDNA ลำดับวิเคราะห์กับฐานข้อมูลเบื่อหน่ายที่ Gen ธนาคารโดยใช้เครื่องมือการระเบิดที่พับ (http://www.ncbi.nlm.nih.gov) สำหรับไอออนบวกสายการระบุของแบคทีเรียแล้ว 16S rDNA ลำดับที่ถูกส่งใน NCBI Gen ธนาคารสำหรับการได้รับหมายเลขภาคยานุวัติ.
2.7 เมล็ดพันธุ์ bacterization
ข้าวสาลีเมล็ด var HUW 234 ที่ได้รับจากมหาวิทยาลัยฮินดู Banaras ฟาร์มเกษตร, พารา ณ สี, อุตตรประเทศอินเดียและพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อ (0.1% HgCl2 2 นาทีและล้างไฟและครั้งด้วยน้ำฆ่าเชื้อ) วัฒนธรรมอันบริสุทธิ์ของ megaterium บี chlorophenolicus A. และ Enterobacter SP ถูกปลูกในอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับการทดลอง อาณานิคมเดียวจากแต่ละสายพันธุ์ได้รับการโอนเข้า 50ml ชั้นขอให้มีน้ำซุปสารอาหารและเติบโตขึ้นโดยใช้ออกซิเจนในชั้นถามค้างคืนบนเครื่องปั่นหมุน (200 รอบต่อนาที) วันที่ 30 1C แบคทีเรียที่ปลูกในน้ำซุปสารอาหารที่ถูกเจือจางแล้วด้วยน้ำกลั่นปลอดเชื้อที่มี 0.025% Tween 20 ถึงความเข้มข้น NAL ในสายของ 107 CFUml 1 สำหรับการรักษาเมล็ดถูกวางไว้ที่ระงับแบคทีเรีย 107 CFU (อาณานิคมหน่วยขึ้นรูป) มล 1 พร้อมกับโซลูชั่นสติกเกอร์ (2.5g เหงือกacaciaþ5กรัมน้ำตาลในน้ำกลั่น 100 ml) สำหรับ 30 นาทีก่อนที่จะหว่านเมล็ด.
2.8 หม้อไฟไหม้และการทดลองวิทยาศาสตร์
ในการศึกษาผลกระทบของแต่ละบุคคลและรวมของสายพันธุ์ทดลองในกระถางและไฟไหม้ไฟได้ดำเนินการด้วยข้าวสาลี var HUW 234 ในช่วงฤดู ​​Rabi 2011-12 และ 2012-13 หก ments treat- เชื้อ ได้แก่ ควบคุม B. megaterium, chlorophenolicus A. , Enterobacter SP ในแต่ละเดียวและการรวมกันของ A. chlorophenolicusþ Enterobacter SP และ B megateriumþA chlorophenolicusþประกอบการ obacter SP ถูกจำลองแบบสี่ครั้ง ดินดินร่วนปนทราย (ทราย 48.9%, 30.7% ช่องและดินเหนียว 20.5%) ที่เก็บได้จากการเกษตรฟาร์มวิจัย, BHU คุณสมบัติทางเคมีของหม้อดินและไฟไหม้ไฟมีค่า pH (7.84 และ 7.80), EC (0.164 และ 0.161 dS ม. 1), สารอินทรีย์คาร์บอน (0.50% และ 0.502%) (Walkley และดำ, 1934), มี N (0.095 กรัมต่อกิโลกรัม ? ที่ 1 และ 202.45 กิโลกรัมต่อเฮกตาร์? 1) (Subbiah และ Asija, 1956), p (0.01 กรัมต่อกิโลกรัม 1 and19.28 กิโลกรัมต่อเฮกตาร์? 1) (โอลเซ่น et al., 195

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 ลำดับการใช้ rdnawas
ดำเนินการในบังกาลอร์ genei Pvt . จำกัด อินเดีย อินเดีย ดีเอ็นเอ การลำดับ 16S rDNA กับฐานข้อมูลวิเคราะห์ลำดับเบสที่มีอยู่ในธนาคาร โดยใช้เครื่องมือที่ ncbi ระเบิด ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov ) จึง identi ไอออนบวกของแบคทีเรียแล้วลำดับ 16S rDNA ถูกส่งใน ncbi Gen ธนาคารได้รับหมายเลขภาคยานุวัติ .
2.7 .ข้าวสาลีเมล็ดพันธุ์เมล็ดพันธุ์ bacterization
huw 234 ได้จากมหาวิทยาลัยฮินดู Banaras เกษตรฟาร์ม เมืองพาราณสีรัฐอุตตรประเทศ ประเทศอินเดีย และฆ่าเชื้อที่ผิว ( 0.1% hgcl2 2 นาทีและล้างด้วยน้ำฆ่าเชื้อจึงได้ครั้ง ) เชื้อบริสุทธิ์ของ B . megaterium อ. chlorophenolicus และ Enterobacter sp . เติบโตใน NUMB3RS สำหรับการทดลองอาณานิคมเดียวจากแต่ละสายพันธุ์ก็ถูกย้ายเข้าไปใน 50ml flถามที่มีสารอาหารและเจริญเติบโตในน้ำซุป aerobically flขอให้ค้างคืนในการหมุนปั่น ( 200 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 30 c ) แบคทีเรียที่ปลูกในน้ำสารอาหารแล้วเจือจางด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อที่มี 0.025% Tween 20 กับนาลจึงความเข้มข้น 107 cfuml
1 . สำหรับการรักษาเมล็ดที่ถูกวางไว้ใน bacterial suspension 107 CFU ( หน่วยเป็นอาณานิคม ) มล.
1 พร้อมกับ สติ๊กเกอร์ โซลูชั่น ( 2.5G กัมอาคาเซียþ 5 กรัม น้ำตาล 100 มล. น้ำกลั่นสำหรับ 30 นาทีก่อนการหว่าน
2.8 . หม้อและละมั่ง
จึงทดลองเพื่อศึกษาผลของสายพันธุ์และรวมแต่ละหม้อและการทดลองจึงได้ดำเนินการกับข้าวสาลีละมั่ง โดยในช่วงฤดูของราบี huw 234 2011 – 12 2012 – 13หก หัวเชื้อรักษา - ละติน คือ ควบคุม , B . megaterium อ. chlorophenolicus , Enterobacter sp . ในแต่ละเดียวและการรวมกันของ . chlorophenolicus þ Enterobacter sp . และ B . megaterium þ . chlorophenolicus þใส่ - obacter sp . จำนวน 4 ครั้ง ดินร่วนปนทราย ( กรีด 30.7 % 48.9 % ทรายและ 20.5 % clay ) รวบรวมจากฟาร์มวิจัยการเกษตรภู .สมบัติทางเคมีของดินหม้อ แล้วจึงคือ pH ( ละมั่ง และ 7.84 7.80 ) , EC ( 0.015 0.161 DS และ M
1 ) , อินทรีย์คาร์บอน ( 0.50 % และ 0.502 % ) ( หนังสือนิยาย - และสีดำ 1934 ) พร้อมใช้งาน ( 0.095 กรัมต่อกิโลกรัม
1 และ 202.45 กกฮา
subbiah asija ( 1 ) และ 1956 ) , P ( 0.01 กรัมต่อกิโลกรัม
1 and19.28 กกฮา
1 ) ( Olsen et al . , 195 คน