drying for 24 h at 100 ± 5 ◦ C; cru

drying for 24 h at 100 ± 5 ◦ C; crude protein (N × 6.25), by the micro- Kjeldahl digestion and distillation after acid digestion, using a Tecator Digestion System together with Kjeltec 1026 Distilling Unit (Tecator, Sweden); lipids, by extracting the residue with petroleum ether (40–60 ◦ C) for 8 h in a Soxhlet apparatus; crude fibre, as loss on ignition of dried lipid-free residues after digestion with 1.25% H2SO4 and 1.25% NaOH using Fibertec System 2021 (Foss Teca- tor, Sweden); ash, by ignition of samples at 550◦C in a muffle furnace to constant weight. Nitrogen-free extract (NFE) was com- puted by taking the sum of values for crude protein, crude lipid, ash, crude fibre, and moisture and subtracting this from 100 (Maynard et al., 1979). Gross energy of the diets was measured with a bomb- calorimeter (Lab-X, Kolkata, India). Total free amino acids and free fatty acids in the raw and fermented groundnut oil cake were esti- mated according to Moore and Stein (1948) and Cox and Pearson (1962), respectively. The amino acid compositions of raw and fer- mented substrates were determined using an automated amino acid analyzer (Shimadzu-10 AS, Japan) after hydrolyzing the sam- ples with 6 M HCl at 110 ◦ C for 24 h (Bassler and Buchholz, 1993). The sulphur containing amino acids were oxidized using performic acid before the acid hydrolysis. The tryptophan contents of the above mentioned samples were determined spectrophotometri- cally by the method of Pinter-Szakacs and Molnar-Perl (1990).
Chromic oxide levels in the diets and in the faecal samples were estimated spectrophotometrically (Bolin et al., 1952). Proximate analyses of whole body of fish were done both at the beginning and termination of the feeding experiment (on wet weight basis) following the methods stated earlier. The water quality param- eters were monitored following the standard procedures (APHA, 1995). Average live weight gain (%), specific growth rate (SGR; % day−1), feed conversion ratio (FCR), protein efficiency ratio (PER) and apparent net protein utilization (ANPU%) were calculated using standard methods (Steffens, 1989). The apparent dry mat- ter digestibility (ADD) and apparent digestibility of nutrients were calculated according to Cho et al. (1982).
Among ANFs, tannin content was determined using Folin–Denis reagent (Schanderi, 1970). Tannin was extracted in boiling dis- tilled water (30 min). After centrifugation (2500 × g, 20 min), the supernatant was collected, mixed with Folin–Denis reagent, alka- linized by 15% (w/v) sodium carbonate and kept in the dark (30min) at room temperature. The absorbance of the solution was read at 700 nm using a spectrophotometer (Shimadzu UV/VIS- 1800, Kyoto, Japan) and the concentration of tannin in the extract was determined using pure tannic acid (Merck, Mumbai, India) as a standard. Phytic acid was extracted using 2.4% HCl, with continuous shaking (220rpm) for 16h. After extraction, the sus- pension was centrifuged (10,000 × g, 20 min) and the supernatant was used for phytate determination using modified Wade reagent (0.03% FeCl3, 6H2O+0.3% sulfosalicylic acid) following Vaintraub and Lapteva (1988). Sodium phytate (phytic acid sodium salt, HiMedia Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India) was used as the standard. Benzoyl-dl-arginine-p-nitroanilide (BAPNA) was used as a substrate to determine trypsin inhibitor activity according to Smith et al. (1980) with minor modification. Trypsin inhibitor was extracted with phosphate buffer (0.15M, pH 8.1, 4◦C). The crude extract was treated with bovine trypsin (0.004%, in 0.025 M glycine HCI buffer), added with the substrate (BAPNA) and incu- bated under optimized condition (37 ◦ C, 60 min). The release of the yellow coloured p-nitroaniline was measured spectrophotometri- cally (410 nm) to determine the residual trypsin activity. The result was expressed as mg trypsin inhibited per g of sample.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แห้งสำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 100 ± 5 โรคปาก C โปรตีน (N × 6.25), ไมโครเจลดาห์ลเมื่อต้องย่อยและกลั่นหลังจากกรดย่อยอาหาร ระบบย่อยอาหาร Tecator ร่วมกับหน่วยการกลั่น Kjeltec 1026 (Tecator สวีเดน); ใช้ ไขมัน โดยแยกกาก ด้วยปิโตรเลียมอีเทอร์ (โรคปาก 40 – 60 C) สำหรับ 8 ชั่วโมงในเครื่อง Soxhlet เส้นใยหยาบ เป็นขาดทุนจากการจุดระเบิดตกค้างแห้งที่ปราศจากไขมันหลังจากย่อยอาหาร 1.25% H2SO4 และ 1.25% NaOH ใช้ Fibertec ระบบ 2021 (Foss Teca ทอร์ สวีเดน); แอช โดยจุดระเบิดอย่างที่ 550◦C ในเตาอุดน้ำหนักคง สารสกัดจากฟรีไนโตรเจน (NFE) เป็น com puted โดยนำผลรวมของค่าโปรตีน ไขมันดิบ เถ้า เส้นใยดิบ และความชื้น และลบนี้จาก 100 (เมย์นาร์ด et al. 1979) พลังงานรวมของอาหารถูกวัด ด้วยการระเบิดแคลอรีมิเตอร์ (Lab X โกลกาตา อินเดีย) กรดอะมิโนอิสระรวมและกรดไขมันอิสระในเค้กน้ำมันถั่วลิสงดิบ และหมักได้ esti-แม่มัวร์ และสไตน์ (ค.ศ. 1948) และ Cox และเพียร์สัน (1962), ตามลำดับ องค์ประกอบของกรดอะมิโนของดิบและพื้นผิว fer mented ได้กำหนดใช้การวิเคราะห์กรดอะมิโนอัตโนมัติ (Shimadzu-10 ว่า ประเทศญี่ปุ่น) หลังจาก hydrolyzing ples sam กับ 6 M HCl ที่โรคปาก 110 C ใน 24 h (Bassler และบุคโฮลซ์ 1993) กรดอะมิโนที่มีซัลเฟอร์ถูกออกซิไดซ์ใช้กรด performic ก่อนย่อยกรด โพรไบโอเนื้อหาข้างต้นกล่าวถึงตัวอย่างที่ถูกกำหนด spectrophotometri-cally โดยวิธีของ Pinter Szakacs และ Molnar-Perl (1990)ระดับ chromic oxide ในอาหาร และ ในตัวอย่าง faecal ได้ประมาณ spectrophotometrically (โบลิน et al. 1952) ร่างกายของปลาย่อมวิเคราะห์ได้ทำทั้ง ที่เริ่มต้นและสิ้นสุดของการทดลองให้อาหารตามวิธีที่ระบุไว้ก่อนหน้านี้ (ในน้ำหนักเปียก) น้ำคุณภาพหยุด-eters ถูกตรวจสอบตามกระบวนการมาตรฐาน (APHA, 1995) น้ำหนักสดเฉลี่ยกำไร (%) อัตราการแปลงอัตรา (แสดงสรุป % day−1), เลี้ยงเติบโตเฉพาะ (FCR), ประสิทธิภาพโปรตีน (ต่อ) และการใช้ประโยชน์โปรตีนสุทธิชัดเจน (ANPU %) ถูกคำนวณโดยใช้วิธีมาตรฐาน (Steffens, 1989) ใช่ย่อยเธอปูแห้ง (ADD) และสารอาหารชัดเจน digestibility ได้คำนวณตามช่อ et al. (1982)Among ANFs, tannin content was determined using Folin–Denis reagent (Schanderi, 1970). Tannin was extracted in boiling dis- tilled water (30 min). After centrifugation (2500 × g, 20 min), the supernatant was collected, mixed with Folin–Denis reagent, alka- linized by 15% (w/v) sodium carbonate and kept in the dark (30min) at room temperature. The absorbance of the solution was read at 700 nm using a spectrophotometer (Shimadzu UV/VIS- 1800, Kyoto, Japan) and the concentration of tannin in the extract was determined using pure tannic acid (Merck, Mumbai, India) as a standard. Phytic acid was extracted using 2.4% HCl, with continuous shaking (220rpm) for 16h. After extraction, the sus- pension was centrifuged (10,000 × g, 20 min) and the supernatant was used for phytate determination using modified Wade reagent (0.03% FeCl3, 6H2O+0.3% sulfosalicylic acid) following Vaintraub and Lapteva (1988). Sodium phytate (phytic acid sodium salt, HiMedia Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India) was used as the standard. Benzoyl-dl-arginine-p-nitroanilide (BAPNA) was used as a substrate to determine trypsin inhibitor activity according to Smith et al. (1980) with minor modification. Trypsin inhibitor was extracted with phosphate buffer (0.15M, pH 8.1, 4◦C). The crude extract was treated with bovine trypsin (0.004%, in 0.025 M glycine HCI buffer), added with the substrate (BAPNA) and incu- bated under optimized condition (37 ◦ C, 60 min). The release of the yellow coloured p-nitroaniline was measured spectrophotometri- cally (410 nm) to determine the residual trypsin activity. The result was expressed as mg trypsin inhibited per g of sample.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การอบแห้งเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 100 ± 5 ◦ C; โปรตีน (N × 6.25) โดยการย่อยอาหาร Kjeldahl ไมโครและการกลั่นหลังจากการย่อยอาหารกรดโดยใช้ระบบการย่อยอาหาร Tecator ร่วมกับ Kjeltec 1026 กลั่น Unit (Tecator, สวีเดน); ไขมันโดยการสกัดสารตกค้างด้วยปิโตรเลียมอีเธอร์ (40-60 ◦ C) เป็นเวลา 8 ชั่วโมงในอุปกรณ์วิธีการสกัดแบบ; เยื่อใยเป็นความสูญเสียในการเผาไหม้แห้งตกค้างไขมันฟรีหลังจากการย่อยด้วย H2SO4 1.25% และ 1.25% NaOH ใช้ Fibertec ระบบ 2021 (ฟอสส์ Teca- Tor, สวีเดน); เถ้าจากการเผาไหม้ของกลุ่มตัวอย่างที่550◦Cในเตาเผาให้น้ำหนักคงที่ สารสกัดจากไนโตรเจนฟรี (กศน) คือการสั่ง puted โดยการใช้ผลรวมของค่าสำหรับโปรตีนไขมันดิบเถ้าเยื่อใยและความชื้นและลบนี้จาก 100 (เมย์นาร์ et al., 1979) พลังงานขั้นต้นของการรับประทานอาหารที่ถูกวัดด้วยเครื่องวัดความร้อน bomb- (แล็บ-X, โกลกาตาอินเดีย) รวมกรดอะมิโนอิสระและกรดไขมันอิสระในเค้กน้ำมันถั่วลิสงดิบและหมักถูกผสมพันธุ์ esti- ตามมัวร์และสไตน์ (1948) และค็อกซ์และเพียร์สัน (1962) ตามลำดับ องค์ประกอบของกรดอะมิโนดิบและ fer- พื้นผิวได้ชัดเจนได้รับการพิจารณาโดยใช้การวิเคราะห์กรดอะมิโนอัตโนมัติ (Shimadzu-10, ญี่ปุ่น) หลังจากที่ไฮโดรไลซ์ตัวอย่างทดสอบไว้ Ples กับ 6 M HCl 110 ◦ C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง (Bassler และ Buchholz 1993 ) กำมะถันที่มีกรดอะมิโนที่ถูกออกซิไดซ์โดยใช้กรดก่อนการย่อยกรด เนื้อหาโพรไบโอของกลุ่มตัวอย่างดังกล่าวข้างต้นได้รับการพิจารณาถอนรากถอนโคน spectrophotometri- โดยวิธีพิ-Szakacs และ Molnar-Perl นี้ (1990).
ระดับออกไซด์ Chromic ในอาหารและในตัวอย่างอุจจาระประมาณ spectrophotometrically (Bolin et al., 1952) . วิเคราะห์ใกล้เคียงของร่างกายทั้งของปลาได้ทำทั้งที่จุดเริ่มต้นและการสิ้นสุดของการทดลองให้อาหาร (บนพื้นฐานน้ำหนักเปียก) ตามวิธีการที่ระบุไว้ก่อนหน้า พารารามิเตอร์น้ำที่มีคุณภาพได้รับการตรวจสอบต่อไปนี้ขั้นตอนมาตรฐาน (APHA, 1995) เฉลี่ยกำไรสดน้ำหนัก (%) อัตราการเจริญเติบโตที่เฉพาะเจาะจง (SGR;% วันที่ 1) อัตราการเปลี่ยนอาหาร (FCR) อัตราส่วนประสิทธิภาพโปรตีน (PER) และการใช้ประโยชน์ของโปรตีนสุทธิที่เห็นได้ชัด (ANPU%) ได้รับการคำนวณโดยใช้วิธีการมาตรฐาน (สตีเฟนส์, 1989) ชัดเจน Mat- แห้งตรีย่อย (ADD) และการย่อยได้ชัดเจนของสารอาหารจะถูกคำนวณตาม Cho et al, (1982).
ท่ามกลาง ANFs เนื้อหาแทนนินที่ได้รับการพิจารณาโดยใช้ Folin-Denis น้ำยา (Schanderi, 1970) แทนนินเป็นสารสกัดในการต้มน้ำปรากฏไร่ (30 นาที) หลังจากการหมุนเหวี่ยง (2500 × G, 20 นาที) สารละลายที่ถูกเก็บรวบรวมผสมกับ Folin-Denis น้ำยา alka- linized 15% (w / v) โซเดียมคาร์บอเนตและเก็บไว้ในที่มืด (30 นาที) ที่อุณหภูมิห้อง ค่าการดูดกลืนของการแก้ปัญหาได้อ่านที่ 700 นาโนเมตรโดยใช้ spectrophotometer (Shimadzu UV / VIS- 1800 เกียวโตประเทศญี่ปุ่น) และความเข้มข้นของสารแทนนินในสารสกัดถูกกำหนดโดยใช้กรดแทนนิคบริสุทธิ์ (เมอร์ค, มุมไบ, อินเดีย) เป็นมาตรฐาน กรดไฟติกถูกสกัดโดยใช้ 2.4% HCl, เขย่าต่อเนื่อง (220rpm) สำหรับ 16h หลังจากการสกัดเงินบำนาญ sus- ถูกหมุนเหวี่ยง (10,000 × G, 20 นาที) และสารละลายที่ใช้สำหรับการกำหนดใช้ไฟเตทปรับเปลี่ยนเวดรีเอเจนต์ (0.03% FeCl3, 6H2O + 0.3% กรด sulfosalicylic) ดังต่อไปนี้ Vaintraub และ Lapteva (1988) โซเดียมไฟเตท (phytic กรดเกลือโซเดียม HIMEDIA ห้องปฏิบัติการ Pvt. Ltd. , มุมไบ, อินเดีย) ถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐาน Benzoyl-DL-arginine-P-nitroanilide (BAPNA) ถูกใช้เป็นสารตั้งต้นในการกำหนดกิจกรรมการยับยั้ง trypsin ตามสมิ ธ , et al (1980) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย trypsin ยับยั้งถูกสกัดด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.15M ค่า pH 8.1 4◦C) สารสกัดหยาบรับการรักษาด้วยวัว trypsin (0.004% ใน 0.025 M glycine HCI กันชน) เพิ่มด้วยสารตั้งต้น (BAPNA) และ incu- ซึ้งน้อยลงภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุด (37 ◦ C, 60 นาที) การเปิดตัวของสีเหลืองสี P-nitroaniline วัดถอนรากถอนโคน spectrophotometri- (410 นาโนเมตร) เพื่อตรวจสอบกิจกรรม trypsin ที่เหลือ ผลที่ได้แสดงเป็น trypsin ยับยั้งมิลลิกรัมต่อกรัม