2.3. Antibacterial tests
The agar diffusion assay was performed according to
European Pharmacopoe (1997). One loopful of each test
organism (Vibrio anguillarum DSMZ 11323, Pseudomonas
anguilliseptica DSMZ 12111, Yersinia ruckeri
ATCC 29493, Aeromonas salmonicida sp. salmonicida
ATCC 51413, Aeromonas hydrophila sp. hydrophila
DSMZ 6173) was suspended in 3 ml 0.9% NaCl
solution separately. Nutrient agar (Difco™ Tryptic Soy
Agar, Becton Dickinson and Company, USA) was
inoculated with this suspension of the respective
organism and poured into a sterile petri dish. Sterilised
paper discs, containing the extract of the alga (2 mg),
were transferred onto these prepared petri dishes.
Oxytetracycline (Merck, Germany) was used as a
positive, the solvent of each extract as a negative
control. A pre-diffusion for 3 h was guaranteed.
Inhibition zones were measured after 18 h incubation
at 26 °C. The inhibition zones were measured excepting
the 6 mm paper disc. After pre-diffusion and incubation
the petri dishes were sprayed with a colouring solution
(p-iodo nitrotetrazolium violet, 5% in 50% aqueous
ethanole). Living bacteria produce a red coloured
compound, the inhibition zone appears colourless
(Brantner, 1997). Every experiment was carried out 10
times. Inhibition zonesN15 mm were declared as strong,
from 8 to 15 mm as moderate and from 1 to 8 mm as
weak activities. Minimal inhibitory concentration (MIC)
values against V. anguillarum and P. anguilliseptica
were determined by standard serial broth microdilution
assay
2.3. ต้านเชื้อแบคทีเรียทดสอบดำเนินการทดสอบการกระจายอาหารตามยุโรป Pharmacopoe (1997) Loopful หนึ่งของแต่ละการทดสอบสิ่งมีชีวิต (เค็ม anguillarum DSMZ 11323, Pseudomonasanguilliseptica DSMZ 12111, Yersinia ruckeriATCC 29493, Aeromonas salmonicida เอสพี salmonicidaATCC 51413, Aeromonas hydrophila เอสพี hydrophilaDSMZ 6173) ถูกระงับใน 3 ml 0.9% NaClโซลูชันที่แยกต่างหาก อาหารสารอาหาร (Difco ™ Tryptic ถั่วเหลืองมีอาหาร Becton สัน และบริษัท สหรัฐอเมริกา)inoculated กับระงับของชีวิต และเทลงในจานเพาะเป็นหมัน Sterilisedกระดาษแผ่น ที่ประกอบด้วยสารสกัดจาก alga (2 mg),มีการโอนย้ายลงบนอาหาร petri เหล่านี้เตรียมใช้ออกซิเตตราไซคลีน (Merck เยอรมนี) เป็นการบวก ตัวทำละลายของสารสกัดแต่ละเป็นการลบการควบคุม มีรับประกันแพร่ก่อนสำหรับ 3 ชมโซนยับยั้งที่วัดหลังจากบ่ม 18 ชมที่อุณหภูมิ 26 องศาเซลเซียส โซนยับยั้งได้วัดการยกเว้นแผ่นดิสก์กระดาษ 6 มม. หลังจากแพร่ก่อนและกกไข่จาน petri ถูกพ่นด้วยสี(p iodo nitrotetrazolium ม่วง 5% ในสารละลาย 50%ethanole) ชีวิตแบคทีเรียผลิตสีแดงผสม โซนยับยั้งปรากฏสีใส(Brantner, 1997) ทุกการทดลองดำเนินการ 10ครั้ง มม. zonesN15 ยับยั้งถูกประกาศเป็นแข็งจาก 8 ถึง 15 มม. เป็นปานกลาง และ จาก 1 ถึง 8 มิลลิเมตรเป็นกิจกรรมที่อ่อนแอ เข้มข้น inhibitory ต่ำสุด (MIC)ค่ากับ V. anguillarum และ P. anguillisepticaกำหนด โดยมาตรฐานอนุกรมซุป microdilutionทดสอบ
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 การทดสอบการต้านเชื้อแบคทีเรีย
การวิเคราะห์การแพร่วุ้นที่ได้ดำเนินการตาม
ยุโรป Pharmacopoe (1997) หนึ่ง loopful ของการทดสอบแต่ละ
ชีวิต (Vibrio anguillarum DSMZ 11323, Pseudomonas
anguilliseptica DSMZ 12111, Yersinia ruckeri
ATCC 29493, Aeromonas salmonicida Sp. salmonicida
ATCC 51413, เชื้อ Aeromonas Sp. hydrophila
DSMZ 6173) ถูกระงับใน 3 มล 0.9% NaCl
ทางออกที่แยกต่างหาก สารอาหารวุ้น (Difco ™ Tryptic Soy
Agar, Becton ดิกคินสันและ บริษัท USA) ได้รับ
เชื้อด้วยการระงับการตามลำดับนี้
ชีวิตและเทลงในจานเลี้ยงเชื้อผ่านการฆ่าเชื้อ Sterilised
แผ่นกระดาษที่มีสารสกัดจากสาหร่าย (2 มก.) ที่ได้รับการโอนไปยังจานเลี้ยงเชื้อเตรียมเหล่านี้. Oxytetracycline (เมอร์ค, เยอรมนี) ถูกใช้เป็นบวกของแต่ละตัวทำละลายสารสกัดเป็นเชิงลบการควบคุม ก่อนการแพร่กระจายเป็นเวลา 3 ชั่วโมงได้รับการรับประกัน. ยับยั้งวัดหลังจาก 18 ชั่วโมงบ่มที่อุณหภูมิ 26 องศาเซลเซียส โซนยับยั้งวัดยกเว้นแผ่นกระดาษ 6 มม หลังจากที่ก่อนแพร่กระจายและการบ่มจาน Petri ถูกพ่นด้วยวิธีการแก้ปัญหาสี(P-iodo nitrotetrazolium ม่วง, 5% ในน้ำ 50% ethanole) แบคทีเรียที่อาศัยอยู่ผลิตสีแดงผสมบริเวณยับยั้งปรากฏไม่มีสี(Brantner, 1997) ทุกทดลอง 10 ครั้ง ยับยั้ง zonesN15 มมถูกประกาศเป็นที่แข็งแกร่ง, 8-15 มิลลิเมตรขณะที่ในระดับปานกลางและ 1-8 มิลลิเมตรเป็นกิจกรรมที่อ่อนแอ ความเข้มข้นต่ำสุด (MIC) ค่ากับ V. anguillarum พี anguilliseptica ถูกกำหนดโดยมาตรฐานน้ำซุปอนุกรม microdilution ทดสอบ
การแปล กรุณารอสักครู่..