2.1. Strains and plasmidsE. coli BL

2.1. Strains and plasmids
E. coli BL21(DE3) was purchased from Novagen. The E. coli BL21(DE3)ΔacrA strain was constructed by P1 phage transduction, described previously (Datsenko and Wanner), using the BW25113ΔacrA strain (The Coli Genetic Stock Center, Yale, USA) as the donor strain. These two strains were engineered using genes encoding for Mycobacterium marinum carboxylic acid reductase (CAR), Sfp from Bacillus subtilis, tes3 (thioesterase from Anaerococcus tetradius with accession no. EEI82564) and Ahr (an aldehyde reductase previously known as yjgB) from E. coli. The construct cloning approach was described previously ( Akhtar et al., 2013 and Kallio et al., 2014). The plasmids pET-TPC3 (encoding Tes3, Sfp and CAR (TPC3, Akhtar et al., 2013 and Kallio et al., 2014), assembled as a synthetic operon ( Akhtar and Jones, 2009), and pCDF-Ahrhis (encoding Ahr with an N-terminal 6xHis-tag) were transformed into chemically competent E. coli BL21 (DE3) to generate the TPC3 Ahr strain.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.1. สายพันธุ์ และ plasmidsE. coli BL21(DE3) ที่ซื้อจาก Novagen E. coli BL21 (DE3) ต้องใช้ ΔacrA ถูกสร้างขึ้น โดย P1 phage transduction อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Datsenko และ Wanner), ใช้พันธุ์ BW25113ΔacrA (เดอะ Coli พันธุหุ้นศูนย์ เยล สหรัฐอเมริกา) เป็นผู้บริจาคพันธุ์ สายพันธุ์เหล่านี้สองได้วางแผนโดยใช้ยีนที่เข้ารหัสสำหรับมัยโคแบคทีเรีย marinum กรด carboxylic reductase (รถยนต์), Sfp จากคัด subtilis, tes3 (thioesterase จาก tetradius Anaerococcus มีทะเบียนไม่ EEI82564) และ Ahr (เป็นแอลดีไฮด์ reductase เดิม เรียกว่า yjgB) จาก E. coli สร้างโคลนวิธีที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (al. Akhtar ร้อยเอ็ด 2013 และ Kallio et al., 2014) Plasmids สัตว์เลี้ยง-TPC3 (รหัส Tes3, Sfp และรถยนต์ (TPC3, al. Akhtar ร้อยเอ็ด 2013 และ Kallio et al., 2014), ประกอบเป็น operon สังเคราะห์ (Akhtar และโจนส์ 2009), และ pCDF-Ahrhis (Ahr เข้ากับแท็ก 6xHis ที่เป็นเทอร์มินัล N) ถูกเปลี่ยนเป็นเชี่ยวชาญสารเคมี E. coli BL21 (DE3) เพื่อสร้างสายพันธุ์ TPC3 Ahr

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 สายพันธุ์และพลาสมิด
อี coli BL21 (DE3) ซื้อมาจาก Novagen เชื้อ E. coli BL21 (DE3) สายพันธุ์ΔacrAถูกสร้างขึ้นโดย P1 พลังงานทำลายจุลินทรีย์ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Datsenko และ Wanner) โดยใช้สายพันธุ์BW25113ΔacrA (ไลพันธุกรรมศูนย์สต็อกเยลสหรัฐอเมริกา) เป็นสายพันธุ์ที่ผู้บริจาค ทั้งสองสายพันธุ์ที่ได้รับการออกแบบโดยใช้ยีนเข้ารหัสสำหรับ Mycobacterium Marinum คาร์บอกซิ reductase กรด (CAR) Sfp จากเชื้อ Bacillus subtilis, tes3 (thioesterase จาก Anaerococcus tetradius กับคู่สัญญาไม่มี. EEI82564) และฮันโนเวอร์ (reductase ลดีไฮด์เป็นที่รู้จักกันก่อนหน้านี้ yjgB) จากเชื้อ E. coli . สร้างโคลนวิธีการที่ได้รับการอธิบายไว้ก่อนหน้า (อัคทา et al., 2013 และกาลิโอ et al., 2014) พลาสมิดสำหรับผู้รักสัตว์ TPC3 (การเข้ารหัส Tes3, Sfp และคัน (TPC3, อัคทา et al., 2013 และกาลิโอ et al., 2014) ประกอบเป็น Operon สังเคราะห์ (อัคทาร์และโจนส์, 2009) และ pCDF-Ahrhis (การเข้ารหัส Ahr กับ N-ขั้ว 6xHis แท็ก) ถูกเปลี่ยนเป็นสารเคมีที่มีอำนาจเชื้อ E. coli BL21 (DE3) เพื่อสร้างสายพันธุ์ TPC3 Ahr

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . สายพันธุ์และพลาสมิด
E . coli BL21 ( DE3 ) ซื้อมาจาก novagen . E . coli BL21 ( DE3 ) Δ ACRA ซึ่งถูกสร้างขึ้นโดยผ่าน P1 ฟาอธิบายก่อนหน้านี้ ( และ datsenko แวนเนอร์ ) โดยใช้สายพันธุ์ bw25113 Δ ACRA ( เชื้อพันธุกรรม Stock ศูนย์ , เยล , USA ) เป็นผู้บริจาค ความเครียดทั้งสองสายพันธุ์มียีนที่เข้ารหัสสำหรับวิศวกรรมโดยใช้เชื้อ marinum กรดคาร์บอกซิลิกเตส ( รถ ) SFP จาก Bacillus subtilis , tes3 ( thioesterase จาก anaerococcus tetradius ด้วยการไม่ eei82564 ) และอาร์ ( ที่รู้จักกันก่อนหน้านี้เป็นอัลดีไฮด์ และ yjgb ) จาก E . coli สร้างโคลนแบบที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( Akhtar et al . , 2013 และ kallio et al . , 2010 )พลาสมิด pet-tpc3 ( tes3 , เข้ารหัสขบวนและรถ ( tpc3 Akhtar , et al . , 2013 และ kallio et al . , 2010 ) , ประกอบเป็นโอเปอรอนสังเคราะห์ ( Akhtar และโจนส์ , 2009 ) , และ pcdf ahrhis การเข้ารหัส AHR กับแท็ก 6xhis กรดอะมิโน ) ถูกเปลี่ยนเป็นสารที่มีความสามารถ E . coli BL21 ( DE3 ) เพื่อสร้าง tpc3 ยา ความเครียด