Two grams ofpowdered leaf tissue wa

Two grams of
powdered leaf tissue was homogenized with a polytron (Brinkman
model PT3100) at maximum speed for 30 seconds (twice, 10
seconds apart) with 20 ml of cold acetone containing 10% TCA
(trichloroacetic acid) and 0.07% ME (2-mercaptoethanol). The
homogenate was centrifuged at 39,000 g for 20 minutes and the
supernatant liquid was removed. The pellet was again
homogenized with fresh acetone (containing 10% TCA and
0.07% ME). This pre-protein extraction procedure was repeated
4-5 times or until the pigments from the plant tissue had
been removed. The pellet was then again homogenized with
the polytron with cold acetone containing 0.07% ME but
without TCA and centrifuged at 39,000 g for 20 minutes. This
step was repeated two more times and then the pellet was dried
under nitrogen, and the proteins were extracted by thoroughly
vortexing and sonicating the pellet in 5 ml of UTC extraction
solution (8.8 M urea, 2.0 M thiourea, 4% CHAPS
(3-[3-cholamidopropyl dimethylammonio]-1-propanesulfonate),
20 mM DTT (dithiotheritol), 0.01% biolytes pH 3-10, 0.04%
biolytes pH 4-7). The protein extract was centrifuged at 39,000 g

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สองกรัมของเนื้อเยื่อใบผงถูก homogenized เป็นกลุ่มกับฝากระจกโค้ง (Brinkmanรุ่น PT3100) ที่ความเร็วสูงสุด 30 วินาที (ครั้ง 10วินาทีกัน) กับ 20 ml ของอะซีโตนเย็นประกอบด้วย 10% TCA(trichloroacetic กรด) และ 0.07% ฉัน (2-mercaptoethanol) ที่homogenate ถูก centrifuged ที่ 39,000 g 20 นาทีและของเหลว supernatant ถูกเอาออก เม็ดถูกอีกครั้งhomogenized เป็นกลุ่ม ด้วยอะซีโตนสด (ประกอบด้วย 10% TCA และ0.07% ฉัน) กระบวนการสกัดโปรตีนก่อนนี้ไม่ซ้ำกัน4 - 5 ครั้งหรือจน กว่าสีจากเนื้อเยื่อพืชได้เอาออก เม็ดถูกอีก homogenized เป็นกลุ่มด้วยฝากระจกโค้ง ด้วยอะซีโตนเย็นประกอบด้วย 0.07% ฉัน แต่โดย TCA และ centrifuged ที่ g 39,000 20 นาที นี้ขั้นตอนที่ซ้ำสองครั้ง และเม็ดถูกอบแห้งภายใต้ไนโตรเจน และโปรตีนที่ถูกสกัดด้วยอย่างละเอียดvortexing และ sonicating เม็ดใน 5 ml ของ UTC สกัดโซลูชั่น (ยูเรีย 8.8 M, 2.0 M thiourea, CHAPS 4%(3- [dimethylammonio 3 cholamidopropyl] -1-propanesulfonate),20 มม. DTT (dithiotheritol), biolytes 0.01% ค่า pH 3-10, 0.04%biolytes ค่า pH 4-7) สารสกัดโปรตีนถูก centrifuged ที่ 39,000 g

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สองกรัมของ
เนื้อเยื่อใบขี้เหล็กทำให้เป็นเนื้อเดียวกันกับ Polytron (Brinkman
รุ่น PT3100) ที่ความเร็วสูงสุด 30 วินาที (ครั้งที่สอง, 10
วินาทีกัน) 20 มิลลิลิตรของอะซิโตนเย็นที่มี 10% TCA
(กรดไตรคลอโร) และ 0.07% ME (2 mercaptoethanol)
homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 39,000 กรัมเป็นเวลา 20 นาทีและ
ของเหลวใสถูกลบออก เม็ดอีกครั้ง
หดหายด้วยอะซิโตนสด (ที่มี TCA 10% และ
0.07% ME) ขั้นตอนนี้ก่อนการสกัดโปรตีนซ้ำ
4-5 ครั้งหรือจนกว่าจะมีเม็ดสีจากเนื้อเยื่อพืชได้
ถูกลบออก เม็ดจากนั้นก็หดหายอีกครั้งกับ
Polytron ด้วยอะซีโทนเย็นที่มี 0.07% แต่ ME
โดยไม่ต้อง TCA และหมุนเหวี่ยงที่ 39,000 กรัมเป็นเวลา 20 นาที นี้
ขั้นตอนซ้ำอีกสองครั้งแล้วเม็ดถูกทำให้แห้ง
ภายใต้ไนโตรเจนและโปรตีนสกัดโดยทั่วถึง
และ vortexing sonicating เม็ดใน 5 มิลลิลิตร UTC สกัด
การแก้ปัญหา (8.8 M ยูเรีย 2.0 M thiourea, 4% CHAPS
(3- [3 cholamidopropyl dimethylammonio] -1-propanesulfonate),
20 มม DTT (dithiotheritol) 0.01% ค่า pH biolytes 3-10, 0.04%
biolytes ค่า pH 4-7) สารสกัดจากโปรตีนถูกหมุนเหวี่ยงที่ 39,000 กรัม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สองกรัม
เนื้อเยื่อใบผงบดกับ polytron ( บริคแมน
รูปแบบ pt3100 ) ที่ความเร็ว 30 วินาที ( 2 , 10
วินาที กับ 20 มิลลิลิตร ) เย็นแบบบรรจุ 10 % TCA
( กรดไตรคลอโรอะซิติก ) และ 0.07 % ( อย่างเดียว )
แยกเป็นระดับที่ 39 , 000 กรัมเป็นเวลา 20 นาทีและ
นำของเหลวจะถูกลบออก เม็ดอีกครั้ง
สดบดด้วยอะซีโตน ( ที่มี TCA 10%
0.07 % ค่ะ ) ขั้นตอนการสกัดโปรตีนนี้ก่อนกัน
4-5 ครั้งหรือจนกว่าสีจากเนื้อเยื่อพืชได้
ถูกลบออก เม็ดเป็นแล้วบดด้วย
polytron ด้วยอะซีโทนเย็นที่มี 0.07 % ผมแต่
โดย TCA ไฟฟ้าที่ 39 , 000 กรัมเป็นเวลา 20 นาที นี้
ขั้นตอนซ้ำอีก 2 ครั้ง แล้วเม็ดแห้ง
ภายใต้ไนโตรเจนและโปรตีนที่สกัดได้โดยละเอียดและ
vortexing sonicating เม็ด 5 มิลลิลิตรของสารละลายสกัด
UTC ( 8.8 M ยูเรีย Thiourea Chaps 2.0 M 4 %
( 3 - [ ] - 3-cholamidopropyl dimethylammonio 1-propanesulfonate )
20 มม. 20 ( dithiotheritol ) 0.01 % biolytes pH 3-10 , 0.04 %
biolytes pH 4-7 )โปรตีนที่สกัดได้ในระดับ 39 , 000 กรัม