Prairie vole (Microtus ochrogaster)

Prairie vole (Microtus ochrogaster) is a highly social animal and is a commonly used animal model for neuropsychopharmacological and psychiatric studies. To date, only a few reports on the development of transgenic prairie voles which was primarily due to the suboptimal development of assisted reproductive technology (ART) in prairie voles. Limitations in ART further hinder the development of genetically modified prairie voles such as the application of conventional gene targeting technologies using embryonic stem (ES) or induced pluripotent stem (iPS) cells to generate chimeric prairie voles. Moreover, recent advancement in genome-editing tools such as transcription activator-like effector nuclease (TALEN) and clustered regulatory interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/Cas technology provide an unprecedented opportunity to create gene targeting animal model and the development of ART in prairie voles is necessary for future development of novel transgenic prairie vole model. We have established efficient method for in vitro embryo culture and sperm cryopreservation with high fertilization rate. In G-1 PLUS and G-2 PLUS sequential culture condition, 81.0% (# of Blastocysts/total n) of one-cell embryos developed to blastocysts. In contrary, no embryos were developed to blastocyst stage in KSOM medium (0/total # of embryos in culture). In vitro fertilization rate using fresh and frozen-thawed sperm was 32.6% and 29.3%, respectively. This is the first report of IVF using cryopreserved prairie vole sperm. We employed mouse IVF methods in prairie voles and optimize culture conditions using human G-1/G-2 PLUS sequential culture method that resulted in high embryonic development rate. The development in vole reproductive technology will facilitate the generation of transgenic voles in the future.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทุ่งหญ้า vole (Microtus ochrogaster) เป็นสัตว์สังคมมาก และเป็นแบบสัตว์โดยทั่วไปใช้สำหรับการศึกษาทางจิตเวชและ neuropsychopharmacological วันที่ บางรายงานในการพัฒนาพื้นที่ทุ่งหญ้าถั่วเหลืองซึ่งเป็นหลักเนื่องจากการพัฒนาสภาพช่วยสืบพันธุ์เทคโนโลยี (ศิลปะ) ในพื้นที่ทุ่งหญ้า ข้อจำกัดในการขัดขวางการพัฒนาของพื้นที่ทุ่งหญ้าดัดแปลงพันธุกรรมเช่นยีนปกติกำหนดเป้าหมายเทคโนโลยีที่ใช้ต้นกำเนิดตัวอ่อน (ES) ประยุกต์ใช้เพิ่มเติม หรือเกิดจากเซลล์ต้นกำเนิด (iPS) pluripotent เพื่อสร้างพื้นที่ทุ่งหญ้า chimeric ยิ่งไปกว่านั้น ความก้าวหน้าล่าสุดในกลุ่มที่มีการแก้ไขเครื่องมือ nuclease effector activator เหมือน transcription (TALEN) และกลุ่มกำกับดูแล interspaced สั้น palindromic ซ้ำ (CRISPR) / เทคโนโลยี Cas ให้โอกาสประวัติการณ์สร้างยีนที่กำหนดเป้าหมายการพัฒนาศิลปะในพื้นที่ทุ่งหญ้าและรูปสัตว์เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับอนาคตของทุ่งหญ้าถั่วเหลืองนวนิยาย vole รุ่น เราได้สร้างวิธีที่มีประสิทธิภาพสำหรับการเพาะเลี้ยงเอ็มบริโอวัฒนธรรมและสเปิร์ม cryopreservation มีอัตราการปฏิสนธิสูง ในสภาพวัฒนธรรมลำดับ G 1 บวกและ G-2 บวก 81.0% (จำนวน n Blastocysts/รวม) ของเซลล์หนึ่งโคลนพัฒนาเพื่อ blastocysts ในตรงกันข้าม โคลนไม่ได้พัฒนาถึงระยะบลาสโตซิสท์ใน KSOM (0/รวม จำนวนโคลนในวัฒนธรรม) อัตราการปฏิสนธิในหลอดที่ใช้อสุจิสด และแช่แข็ง-thawed เป็น 32.6% และ 29.3% ตามลำดับ นี้เป็นรายงานแรกของ IVF ใช้สเปิร์ม vole ทุ่งหญ้า cryopreserved เราจ้างวิธี IVF เมาส์ในพื้นที่ทุ่งหญ้า และปรับเงื่อนไขวัฒนธรรมมนุษย์ G-1/G-2 บวกวัฒนธรรมลำดับวิธีที่ทำให้เกิดการพัฒนาตัวอ่อนสูงอัตรา การพัฒนาเทคโนโลยีการเจริญพันธุ์ vole จะอำนวยความสะดวกการสร้างพื้นที่ของถั่วเหลืองในอนาคต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทุ่งหญ้าท้องนา (ไมโคร ochrogaster) เป็นสัตว์สังคมสูงและเป็นรูปแบบของสัตว์ที่ใช้กันทั่วไปสำหรับการศึกษา neuropsychopharmacological และจิตเวช ในวันที่มีเพียงไม่กี่รายงานเกี่ยวกับการพัฒนาของนาทุ่งหญ้าพันธุ์ซึ่งเป็นส่วนใหญ่เนื่องจากการพัฒนาของเทคโนโลยีก่อให้เกิดผลลัพธ์ช่ว​​ยการเจริญพันธุ์ (ART) ในหนูพุกทุ่งหญ้า ข้อ จำกัด ในงานศิลปะต่อไปขัดขวางการพัฒนาของการดัดแปลงทางพันธุกรรมหนูพุกทุ่งหญ้าเช่นการประยุกต์ใช้เทคโนโลยีการกำหนดเป้​​าหมายการชุมนุมโดยใช้ยีนต้นกำเนิดตัวอ่อน (ES) หรือเหนี่ยวนำให้เกิดต้นกำเนิด pluripotent (IPS) ในการสร้างเซลล์หนูพุกทุ่งหญ้าลูกผสม นอกจากนี้ความก้าวหน้าล่​​าสุดในเครื่องมือจีโนมการแก้ไขเช่นการถอดความนิ effector กระตุ้นเหมือน (TALEN) และการกำกับดูแลคลัสเตอร์ interspaced สั้น palindromic ซ้ำ (CRISPR) / เทคโนโลยี Cas ให้โอกาสประวัติการณ์ที่จะสร้างรูปแบบการกำหนดเป้​​าหมายยีนสัตว์และการพัฒนาของศิลปะในทุ่งหญ้า หนูพุกเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการพัฒนาในอนาคตของทุ่งหญ้าพันธุ์นวนิยายรุ่นท้องนา เราได้สร้างวิธีที่มีประสิทธิภาพในการเพาะเลี้ยงตัวอ่อนในหลอดทดลองและเก็บรักษาสเปิร์มที่มีอัตราการปฏิสนธิสูง ใน G-1 PLUS และ G-2 PLUS สภาพวัฒนธรรมลำดับ 81.0% (# ของ blastocysts / รวม n) ตัวอ่อนหนึ่งเซลล์ตัวอ่อนที่พัฒนาขึ้นเพื่อ ในทางตรงกันข้าม, ตัวอ่อนไม่ได้รับการพัฒนาเพื่อให้ตัวอ่อนเวทีกลาง KSOM (0 / # รวมของตัวอ่อนในวัฒนธรรม) ในอัตราการปฏิสนธิในหลอดทดลองโดยใช้สเปิร์มสดและแช่แข็งละลายได้รับ 32.6% และ 29.3% ตามลำดับ รายงานนี้เป็นรายงานแรกของการผสมเทียมโดยใช้สเปิร์มท้องนาทุ่งหญ้าแช่แข็ง เรามีงานทำวิธีการผสมเทียมในเมาส์หนูพุกทุ่งหญ้าและเพิ่มประสิทธิภาพการใช้เงื่อนไขวัฒนธรรมของมนุษย์ G-1/2 G-PLUS วิธีวัฒนธรรมลำดับที่ส่งผลให้อัตราการพัฒนาของตัวอ่อนสูง การพัฒนาในด้านเทคโนโลยีการเจริญพันธุ์ท้องนาจะอำนวยความสะดวกในการสร้างหนูพุกพันธุ์ในอนาคต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Prairie vole ( microtus ochrogaster ) เป็นสัตว์สังคมสูง และเป็นที่นิยมใช้ในสัตว์รูปแบบ neuropsychopharmacological และจิตเวชศาสตร์ เพื่อวันที่เพียงไม่กี่รายงานการพัฒนาอุตสาหกรรม voles ทุ่งหญ้าซึ่งเป็นหลักเนื่องจากการพัฒนา suboptimal ของเทคโนโลยีช่วยการเจริญพันธุ์ ( ART ) ในทุ่งหญ้า voles .ข้อจำกัดในศิลปะต่อไปขัดขวางการพัฒนาดัดแปลงพันธุกรรมทุ่งหญ้า voles เช่นการประยุกต์ใช้ปกติยีนเป้าหมายเทคโนโลยีใช้สเต็ม ตัวอ่อน ( ES ) หรือเกิดพลูริโพเทนท์ก้าน ( IPS ) เซลล์ที่จะสร้างที่ทุ่งหญ้า voles . นอกจากนี้ความก้าวหน้าล่าสุดในกลุ่มเครื่องมือในการแก้ไขเช่น transcription Activator ชอบโต้งนิวเคลียส ( สู่ท่าเลน ) และแบบบังคับ interspaced สั้นพาลินโดรมิคขอ crispr ) / CAS เทคโนโลยีให้เพิ่มโอกาสในการสร้างยีนเป้าหมายสัตว์และรูปแบบการพัฒนาของศิลปะในทุ่งหญ้า voles เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการพัฒนาในอนาคตของนวนิยายยีนแบบทุ่งหญ้าท้องนา .เราได้สร้างวิธีที่มีประสิทธิภาพสำหรับการเพาะเชื้ออสุจิในวัฒนธรรมของตัวอ่อน และอัตราการปฏิสนธิสูง ในบวกและบวกกับสภาพวัฒนธรรม G-1 G-2 ต่อเนื่อง , 81.0 % ( #ของบลาสโตซีสรวม / n ) ของการพัฒนาเซลล์ตัวอ่อนจะโต . ในทางตรงกันข้าม ไม่มีตัวอ่อนระยะบลาสโตซิส มีการพัฒนาไปใน ksom ขนาดกลาง ( 0 / รวม#ของเอ็มบริโอในวัฒนธรรม )อัตราการปฏิสนธิในหลอดทดลองโดยใช้สดและแช่แข็งที่ละลายแล้ว อสุจิเป็นเกษตรและร้อยละ 29.3 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ นี่คือรายงานแรกของการปฏิสนธิการใช้ตรวจสอบคุณภาพของสเปิร์ม vole ทุ่งหญ้า เราใช้วิธี IVF เมาส์ในทุ่งหญ้า voles และปรับสภาพวัฒนธรรม โดยใช้มนุษย์ G-1 / G-2 บวกวิธีวัฒนธรรมต่อเนื่องที่ส่งผลให้เกิดอัตราการพัฒนาเอ็มบริโอสูงการพัฒนาเทคโนโลยีการเจริญพันธุ์ในท้องนาจะช่วยให้รุ่นของต้น voles ในอนาคต