■ EXPERIMENTAL SECTION General Expe

■ EXPERIMENTAL SECTION General Experimental Procedures. A SANYO Gallenkamp (UK) melting point apparatus was used to determine melting points. A JASCO DIP-1000 digital polarimeter was used to identify the optical rotation. An Agilent 8453 UV−visible spectrophotometer (Germany) was used to record the UV spectra. IR spectra were recorded as thin films using a PerkinElmer Spectrum One FT-IR spectrophotometer (UK). The NMR spectra were recorded on a Varian Mercury plus spectrometer (UK) operating at 400 MHz (1H) and at 100 MHz (13C). The solvent residual peak was used for chemical shift referencing (δH 3.31, δC 49.0 for methanol-d4 and δH 7.26, δC 77.2 for CDCl3). Mass spectra were obtained on a Micromass Q-TOF 2 hybrid quadrupole time-of-flight (Q-TOF) mass spectrometer with a Z-spray ES source (Micromass, UK). Column chromatography (CC) was carried out using silica gel 60 (100−200 mesh, Merck). TLC was performed on silica gel 60 F254 (Merck) precoated aluminum sheets. The compounds were visualized under UV light and by spraying with acidic anisaldehyde solution followed by heating. Gel filtration was carried out over Sephadex LH-20 (Pharmacia) suspended in MeOH. Distilled solvents were used throughout the separation process. Plant Material. The roots of Pterolobium macropterum were collected from Khon Kaen Province, Thailand, in August 2012. The plant was identified by Prof. Dr. Pranom Chantaranothai, Faculty of Science, Khon Kaen University, where a voucher specimen (KKU032012) is deposited. Extraction and Isolation. Air-dried roots (2.0 kg) of P. macropterum were ground and successively extracted at room temperature with hexanes (3 × 12 L), EtOAc (3 × 5 L), and MeOH (3 × 5 L). After the evaporation of solvents, the crude hexanes (29 g), EtOAc (48 g), and MeOH (125 g) extracts were obtained. The crude hexanes extract was separated by silica gel flash column chromatography (FCC) and eluted with a gradient system of hexanes,
EtOAc, and MeOH. On the basis of their TLC characteristics, the fractions that contained the same major compounds were combined to give five fractions, HF1 to HF5. Fraction HF2 was purified by silica gel FCC, and 10% EtOAc−hexanes was used as an eluent to give two subfractions, HF2.1 and HF2.2. Further purification of these two subfractions by preparative thin layer chromatography (PLC) and developing with 1% acetone−hexanes afforded 8 (7.4 mg, 0.0004%) and 6 (15.4 mg, 0.0008%), respectively. Fraction HF3 was purified by silica gel FCC and eluted with an isocratic system of 50% CH2Cl2− hexanes to give three subfractions, HF3.1−HF3.3. Subfractions HF3.1 and HF3.2 were further purified by PLC using 50% CH2Cl2−hexanes and 10% EtOAc−hexanes as eluting solvents to give 3 (3.5 mg, 0.0002%) and 13 (10.7 mg, 0.00005%), respectively. The purification of subfraction HF3.3 by silica gel FCC (50% CH2Cl2−hexanes) gave three subfractions, HF3.3.1−HF3.3.3. Further purification of HF3.3.1 with PLC (100% CH2Cl2)a fforded 15 (13.6 mg, 0.0007%). Purifications of HF3.3.2 and HF3.3.3 were carried out on PLC using 10% EtOAc− hexanes as the eluting solvent to give 9 (33.7 mg, 0.0017%) and 10 (13.8 mg, 0.0007%), respectively. Fraction HF4 was purified by silica gel column chromatography and eluted with a gradient of 20% EtOAc−hexanes to give three subfractions, HF4.1−HF4.3. Subfraction HF4.1 was purified by Sephadex LH-20 column chromatography and eluted with 100% MeOH to afford 1 (13.2 mg, 0.0007%). Subfraction HF4.2 was purified using PLC, and 30% acetone−hexanes was used as developing solvent to give 5 (5.3 mg, 0.0003%). Subfraction HF4.3 was purified by Sephadex LH-20 column chromatography (100% MeOH) followed by PLC (100% CH2Cl2) to yield 4 (9.5 mg, 0.0005%). The crude EtOAc extract was subjected to silica gel FCC and eluted with a gradient system of hexanes, EtOAc, and MeOH to afford five subfractions, EF1−EF5. Subfraction EF2 was subjected to silica gel FCC and eluted with a gradient of 20% EtOAc−hexanes to give three subfractions, EF2.1−EF2.3. Subfraction EF2.2 was purified by PLC (10% acetone−hexanes) to yield 13 (10.7 mg, 0.0005%). Further purification of EF2.3 by silica gel FCC and elution with a gradient of 50% CH2Cl2−hexanes gave 11 (9.8 mg, 0.0005%) and 16 (9.6 mg, 0.0005%). Fraction EF3 was purified by silica gel FCC (20% EtOAc− hexanes as eluent) to give subfractions EF3.1 and EF3.2. Further purification of EF3.1 with PLC (100% CH2Cl2) yielded 7 (18.3 mg, 0.0009%). Purification of EF3.2 by reversed-phase column chromatography and elution with 20% H2O−MeOH afforded 2 (7.3 mg, 0.0004%). Fraction EF4 was purified by silica gel FCC and eluted with 30% EtOAc−hexanes to give two subfractions, EF4.1 and EF4.2. Subfraction EF4.2 was subjected to gel filtration over Sephadex LH-20 (MeOH) to afford two subfractions, EF4.2.1 and EF4.2.2. After purification of subfraction EF4.2.1 with PLC (20% EtOAc−hexanes), 14 (11.4 mg, 0.0006%) was obtained. Subfraction EF4.2.2 was

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

■ทดลองส่วนทดลองขั้นตอนทั่วไป อุปกรณ์จุดหลอมเหลว SANYO Gallenkamp (UK) ถูกใช้เพื่อกำหนดจุดหลอมเหลว Polarimeter เป็นดิจิทัล JASCO จุ่ม-1000 ถูกใช้เพื่อระบุการหมุนแสง การ Agilent 8453 UV−visible เครื่องทดสอบกรดด่าง (เยอรมนี) ถูกใช้เพื่อบันทึกแรมสเป็คตรา UV IR แรมสเป็คตราถูกบันทึกเป็น films บางที่ใช้แบบ PerkinElmer สเปกตรัมหนึ่งฟุต-IR เครื่องทดสอบกรดด่าง (UK) แรมสเป็คตรา NMR ถูกบันทึกไว้ในดาวพุธแล้วแต่กำหนดและสเปกโตรมิเตอร์ (UK) ที่ความเร็ว 400 เมกะเฮิรตซ์ (1H) และจำนวน ที่ 100 MHz (13C) ยอดเหลือตัวทำละลายถูกใช้สำหรับการอ้างอิง (δH 3.31, δC 49.0 δH 7.26, δC 77.2 สำหรับ CDCl3 และเมทานอล-d4) กะเคมี แรมสเป็คตราโดยรวมได้รับบนเป็น 2 Q TOF Micromass ไฮบริ quadrupole เวลา flight (Q-TOF) โดยรวมสเปกโตรมิเตอร์กับแหล่ง ES Z-สเปรย์ (Micromass, UK) คอลัมน์ chromatography (CC) ได้ดำเนินการใช้ซิลิก้าเจล (100−200 ตาข่าย เมอร์ค) 60 TLC ทำตามซิลิก้าเจล 60 F254 (เมอร์ค) precoated อลูมิเนียมแผ่น สารประกอบมี visualized ภาย ใต้แสง UV และพ่นด้วยโซลูชั่น anisaldehyde เปรี้ยวตาม ด้วยความร้อน เจ filtration ถูกดำเนินการผ่าน Sephadex LH-20 (Pharmacia) ชั่วคราวในทานอ หรือสารทำละลายที่กลั่นได้ใช้ตลอดกระบวนการแยก วัสดุโรงงาน รากของ Pterolobium macropterum ได้รวบรวมจากจังหวัดขอนแก่น ประเทศไทย ในเดือน 2012 สิงหาคม โรงงานถูก identified โดยรศ.ดร. Pranom Chantaranothai คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยขอนแก่น ที่ส่งตัวอย่างใบสำคัญ (KKU032012) สกัดและแยก Air-dried ราก (2.0 kg) P. macropterum มีพื้นดิน และติด ๆ กันสกัดที่อุณหภูมิห้องมี hexanes (3 × 12 L), EtOAc (3 × 5 L), และทานอ (3 × 5 L) หลังจากระเหยหรือสารทำละลาย น้ำมัน hexanes (29 กรัม), EtOAc (48 กรัม), และทานอ ได้รับสารสกัด (125 กรัม) สารสกัดหยาบ hexanes คั่น ด้วยซิลิก้าเจล flash คอลัมน์ chromatography (FCC) และ eluted ด้วยระบบไล่ระดับของ hexanesEtOAc และทานอ ตามลักษณะของ TLC เศษส่วนที่ประกอบด้วยสารสำคัญเหมือนกันถูกรวมให้เศษส่วน five, HF1 เพื่อ HF5 เศษ HF2 ถูก purified โดยเจลของ FCC และ 10% EtOAc−hexanes ใช้เป็น eluent สอง subfractions, HF2.1 และ HF2.2 ให้ Purification เพิ่มเติมของ subfractions เหล่านี้สองทาง chromatography preparative บางชั้น(จำกัดมหาชน) พัฒนา ด้วย 1% acetone−hexanes afforded 8 (7.4 มิลลิกรัม 0.0004%) และ 6 (15.4 มิลลิกรัม 0.0008%), ตามลำดับ HF3 เศษถูก purified โดยเจล FCC และ eluted กับระบบ isocratic คิด 50% hexanes CH2Cl2− ให้สาม subfractions, HF3.1−HF3.3 Subfractions HF3.1 และ HF3.2 เพิ่มเติมได้ purified ด้วย PLC โดยใช้ 10% และ 50% CH2Cl2−hexanes EtOAc−hexanes เป็น eluting หรือสารทำละลายให้ 3 (3.5 มิลลิกรัม 0.0002%) และ 13 (10.7 มิลลิกรัม 0.00005%), ตามลำดับ Purification subfraction HF3.3 โดยเจล FCC (50% CH2Cl2−hexanes) ให้สาม subfractions, HF3.3.1−HF3.3.3 เพิ่มเติม purification HF3.3.1 กับ PLC (100% CH2Cl2) fforded 15 (13.6 มิลลิกรัม 0.0007%) Purifications HF3.3.2 และ HF3.3.3 ได้ดำเนินการกับ PLC โดยใช้ hexanes EtOAc− 10% เป็นตัวทำละลาย eluting 9 (33.7 มิลลิกรัม 0.0017%) และ 10 (13.8 มิลลิกรัม 0.0007%), ตามลำดับ เศษส่วน HF4 เป็น purified โดยเจลคอลัมน์ chromatography และ eluted ด้วยการไล่ระดับสี 20% EtOAc−hexanes ให้ subfractions 3, HF4.1−HF4.3 Subfraction HF4.1 เป็น purified โดย Sephadex LH 20 คอลัมน์ chromatography และ eluted 100% ทานอไป afford 1 (13.2 มิลลิกรัม 0.0007%) Subfraction HF4.2 คือ ใช้ PLC purified และ acetone−hexanes 30% ถูกใช้เป็นตัวทำละลายในการพัฒนาให้ 5 (5.3 มิลลิกรัม 0.0003%) Subfraction HF4.3 เป็น purified โดย Sephadex LH 20 คอลัมน์ chromatography (100% ทานอ) ตาม ด้วย PLC (100% CH2Cl2) ให้ผลผลิต (9.5 มิลลิกรัม 0.0005%) 4 สารสกัดจาก EtOAc ดิบต้องเจล FCC และ eluted ด้วยระบบไล่ระดับของ hexanes, EtOAc และทานอเพื่อ afford five subfractions, EF1−EF5 ต้องเจล FCC และ eluted ด้วยการไล่ระดับสี 20% subfraction EF2 EtOAc−hexanes ให้ subfractions 3, EF2.1−EF2.3 Subfraction EF2.2 เป็น purified โดย PLC (acetone−hexanes 10%) ที่ให้ผลผลิต 13 (10.7 มิลลิกรัม 0.0005%) Purification เพิ่มเติมของ EF2.3 ซิลิก้าเจล FCC และ elution กับไล่ 50% CH2Cl2−hexanes ให้ 11 (9.8 มิลลิกรัม 0.0005%) และ 16 (9.6 มิลลิกรัม 0.0005%) เศษ EF3 ถูก purified โดยเจล FCC (20% EtOAc− hexanes เป็น eluent) ให้ subfractions EF3.1 และ EF3.2 Purification เพิ่มเติมของ EF3.1 กับ PLC (100% CH2Cl2) ผล 7 (18.3 มิลลิกรัม 0.0009%) Purification ของ EF3.2 โดยระยะกลับคอลัมน์ chromatography และ elution ด้วย 20% H2O−MeOH afforded 2 (7.3 มิลลิกรัม 0.0004%) เศษส่วน EF4 เป็น purified โดยเจล FCC และ eluted 30% EtOAc−hexanes 2 subfractions, EF4.1 และ EF4.2 ให้ Subfraction EF4.2 ถูกต้องการเจ filtration กว่า Sephadex LH-20 (ทานอล afford 2 subfractions, EF4.2.1 และ EF4.2.2 หลังจาก purification ของ subfraction EF4.2.1 กับ PLC (20% EtOAc−hexanes), 14 (11.4 มิลลิกรัม 0.0006%) ได้รับการ Subfraction EF4.2.2 ได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

■ทดลองวนขั้นตอนการทดลองทั่วไป ซันโย Gallenkamp (สหราชอาณาจักร) อุปกรณ์จุดหลอมเหลวถูกใช้ในการกำหนดจุดหลอมละลาย Polarimeter ดิจิตอลกรมทรัพย์สินทางปัญญา-1000 JASCO ถูกใช้ในการระบุการหมุนแสง Agilent 8453 spectrophotometer ยูวีที่มองเห็น (เยอรมนี) ถูกนำมาใช้ในการบันทึกสเปกตรัมรังสียูวี IR สเปกตรัมถูกบันทึกไว้เป็นฟิล์มบางสายใช้คลื่นความถี่ PerkinElmer หนึ่ง spectrophotometer FT-IR (สหราชอาณาจักร) สเปกตรัม NMR ถูกบันทึกไว้ใน Varian พุธบวกสเปกโตรมิเตอร์ (สหราชอาณาจักร) การดำเนินงานที่ 400 MHz (1H) และ 100 MHz (13C) ยอดเขาที่เหลือเป็นตัวทำละลายที่ใช้สำหรับการเปลี่ยนแปลงทางเคมีอ้างอิง (δH 3.31, δCสำหรับเมทานอล 49.0-d4 และδH 7.26, δC 77.2 สำหรับ CDCl3) สเปกตรัมมวลที่ได้รับใน Micromass Q-TOF 2 ไฮบริดเวลา -of-quadrupole ชั้น ight (Q-TOF) สเปกโตรมิเตอร์มวลกับ Z-สเปรย์แหล่ง ES (Micromass สหราชอาณาจักร) คอลัมน์ (CC) ได้รับการดำเนินการโดยใช้ซิลิกาเจล 60 (100-200 ตาข่ายเมอร์ค) TLC ได้ดำเนินการในซิลิกาเจล 60 F254 (เมอร์ค) Precoated ลูมิเนียมแผ่น สารที่ถูกมองเห็นภายใต้แสงยูวีและโดยการฉีดพ่นด้วยสารละลายที่เป็นกรด anisaldehyde ตามด้วยความร้อน ไฟเจล ltration ได้ดำเนินการออกไป Sephadex LH-20 (Pharmacia) ที่ลอยอยู่ในเมธานอล ตัวทำละลายกลั่นถูกนำมาใช้ตลอดกระบวนการแยก วัสดุพืช รากของ Pterolobium macropterum ถูกเก็บรวบรวมจากจังหวัดขอนแก่นประเทศไทยในเดือนสิงหาคมปี 2012 เป็นโรงไฟระบุ ed โดยศาสตราจารย์ดร. ประนอม Chantaranothai คณะวิทยาศาสตร์มหาวิทยาลัยขอนแก่นซึ่งเป็นตัวอย่างบัตรกำนัล (KKU032012) เป็นเงินฝาก การสกัดและการแยก รากอากาศแห้ง (2.0 กิโลกรัม) พี macropterum มาบดและสกัดอย่างต่อเนื่องที่อุณหภูมิห้องด้วยเฮกเซน (3 × 12 L) EtOAc (3 × 5 ลิตร) และเมธานอล (3 × 5 ลิตร) หลังจากการระเหยของตัวทำละลายที่ HEXANES ดิบ (29 กรัม) EtOAc (48 กรัม) และเมธานอล (125 กรัม) สารสกัดที่ได้รับ สารสกัดเฮกเซนน้ำมันดิบถูกแยกออกโดยซิลิกาเจลคอลัมน์เถ้าชั้น (FCC) และชะด้วยระบบการไล่ระดับสีของเฮกเซน,
EtOAc และเมธานอล บนพื้นฐานของลักษณะ TLC ของพวกเขาเศษส่วนที่มีสารประกอบที่สำคัญเดียวกันมารวมกันเพื่อให้ได้สายเศษส่วน HF1 เพื่อ HF5 ส่วน HF2 ถูกไฟ Puri ed โดยซิลิกาเจล FCC, และ 10% EtOAc-HEXANES ถูกใช้เป็นตัวชะที่จะให้สอง subfractions, HF2.1 และ HF2.2 ไอออนบวกเพิ่มเติม Puri สายของทั้งสอง subfractions โดยโคเตรียมชั้นบาง ๆ (มหาชน) และการพัฒนากับ% 1 อะซีโตนเฮกเซน-FF orded 8 (7.4 มิลลิกรัม 0.0004%) และ 6 (15.4 มิลลิกรัม 0.0008%) ตามลำดับ ส่วน HF3 ถูกไฟ Puri ed โดยซิลิกาเจล FCC และชะด้วยระบบ isocratic 50% HEXANES CH2Cl2- ที่จะให้สาม subfractions, HF3.1-HF3.3 Subfractions HF3.1 และ HF3.2 เป็นสาย Puri ต่อ ed โดยบมจโดยใช้ 50% CH2Cl2-เฮกเซนและ 10% EtOAc-eluting เฮกเซนเป็นตัวทำละลายที่จะให้ 3 (3.5 มิลลิกรัม 0.0002%) และ 13 (10.7 มิลลิกรัม 0.00005%) ตามลำดับ ไอออนบวกสาย Puri ของ subfraction HF3.3 ซิลิกาเจลโดยเอฟซี (50% CH2Cl2-เฮกเซน) ให้สาม subfractions, HF3.3.1-HF3.3.3 ไอออนบวกเพิ่มเติม Puri สายของ HF3.3.1 กับ PLC (100% CH2Cl2) กฉฉ orded 15 (13.6 มิลลิกรัม 0.0007%) Puri ไพเพอร์ไฟของ HF3.3.2 และ HF3.3.3 ได้ดำเนินการเกี่ยวกับการ จำกัด การใช้ 10% EtOAc- เฮกเซนเป็น eluting ตัวทำละลายที่จะให้ 9 (33.7 มิลลิกรัม 0.0017%) และ 10 (13.8 มิลลิกรัม 0.0007%) ตามลำดับ ส่วน HF4 ถูกไฟ Puri ed โดยคอลัมน์ซิลิกาเจลและชะที่มีความลาดชัน 20% EtOAc-เฮกเซนที่จะให้สาม subfractions, HF4.1-HF4.3 subfraction HF4.1 ถูกไฟ Puri ed โดยคอลัมน์ Sephadex LH-20 และชะ 100% เมธานอลไป FF อ๊อดที่ 1 (13.2 มิลลิกรัม 0.0007%) subfraction HF4.2 เป็นเอ็ดสาย Puri ใช้ PLC, และ 30% อะซีโตนเฮกเซน-ถูกใช้เป็นตัวทำละลายในการพัฒนาเพื่อให้ 5 (5.3 มิลลิกรัม 0.0003%) subfraction HF4.3 ถูกไฟ Puri ed โดยคอลัมน์ Sephadex LH-20 (เมธานอล 100%) ตามด้วย PLC (100% CH2Cl2) ให้ผลผลิต 4 (9.5 มิลลิกรัม 0.0005%) สารสกัด EtOAc น้ำมันดิบได้ภายใต้การซิลิกาเจล FCC และชะกับระบบการไล่ระดับสีของเฮกเซน, EtOAc และเมธานอลไป FF ไฟอ๊อดได้ subfractions, EF1-EF5 subfraction EF2 ได้ภายใต้การซิลิกาเจลชะ FCC และมีความลาดชัน 20% EtOAc-เฮกเซนที่จะให้สาม subfractions, EF2.1-EF2.3 subfraction EF2.2 เป็นสาย Puri ed โดย PLC (10% อะซีโตน-เฮกเซน) ที่จะให้ผลผลิต 13 (10.7 มิลลิกรัม 0.0005%) ไอออนบวกเพิ่มเติม Puri สายของ EF2.3 ซิลิกาเจลโดย FCC และชะที่มีความลาดชัน 50% CH2Cl2-HEXANES ให้ 11 (9.8 มิลลิกรัม 0.0005%) และ 16 (9.6 มิลลิกรัม 0.0005%) ส่วน EF3 ถูกไฟ Puri ed โดยซิลิกาเจลเอฟซี (20% EtOAc- เฮกเซนเป็นตัวชะ) เพื่อให้ subfractions EF3.1 และ EF3.2 ไอออนบวกเพิ่มเติม Puri สายของ EF3.1 กับ PLC (100% CH2Cl2) ผล 7 (18.3 มิลลิกรัม 0.0009%) Puri ไอออนบวกของสาย EF3.2 โดยคอลัมน์เฟสกลับชะและ 20% H2O-เมธานอลฉฉ orded 2 (7.3 มิลลิกรัม 0.0004%) ส่วน EF4 ถูกไฟ Puri ed โดยซิลิกาเจล FCC และชะกับ 30% EtOAc-เฮกเซนที่จะให้สอง subfractions, EF4.1 และ EF4.2 subfraction EF4.2 ได้ภายใต้การเจลไฟ ltration มากกว่า Sephadex LH-20 (เมธานอล) เพื่อ FF อ๊อดสอง subfractions, EF4.2.1 และ EF4.2.2 หลังจากไอออนบวก Puri สายของ subfraction EF4.2.1 กับ PLC (20% EtOAc-เฮกเซน), 14 (11.4 มิลลิกรัม 0.0006%) ที่ได้รับ subfraction EF4.2.2 เป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หมวดทั่วไป■ทดลองทดลองวิธี เป็นซันโย gallenkamp ( UK ) เครื่องวัดจุดหลอมเหลวถูกใช้เพื่อกำหนดจุดหลอม เป็น jasco dip-1000 ดิจิตอลรุ่นอัลฟ่าถูกใช้เพื่อระบุหมุนแสง เป็นเลนต์ 8453 UV Spectrophotometer ( −มองเห็นเยอรมนี ) คือใช้ในการบันทึกแสงยูวี .IR spectra ถูกบันทึกไว้เป็น LMS จึงบาง ใช้ Perkinelmer สเปกตรัม FT-IR เครื่องหนึ่ง ( UK ) และ NMR สเปกตรัมได้ถูกบันทึกไว้ในเครื่องสเปคโตรมิเตอร์ปรอท พลัส ( UK ) ทำงานที่ 400 MHz ( 1 ชั่วโมง ) และที่ 100 MHz ( 13C ) ยอดคงเหลือเป็นตัวทำละลายใช้สำหรับเคมีกะอ้างอิง ( δ H 3.31 , δ C และ H สำหรับ methanol-d4 49.0 δ 7.26 , δ C การผลิตสำหรับ cdcl3 )มวลสเปกตรัมที่ได้ใน q-tof micromass 2 ไฮบริดคำเวลา - fl ight ( q-tof ) แมสสเปกโทรมิเตอร์กับ z-spray ES แหล่ง ( micromass , UK ) คอลัมน์โครมาโตกราฟฟี ( CC ) คือการใช้ซิลิกาเจล 60 ( 100 − 200 mesh , Merck ) TLC คือใช้ซิลิกาเจล 60 f254 ( Merck ) แผ่นแผ่นอลูมิเนียมสารประกอบที่ถูกมองเห็นแสงยูวีและโดยการฉีดพ่นด้วยสารละลายที่เป็นกรด anisaldehyde ตามความร้อน เจล ltration จึงทำการแยกกว่า lh-20 ( มุ่งมั่น ) ที่แขวนลอยในปริมาณ . กลั่นตัวทำละลายที่ใช้ตลอดกระบวนการแยก วัสดุพืช รากของ pterolobium macropterum รวบรวมจากจังหวัดขอนแก่น ในเดือนสิงหาคม 2555โรงงาน identi จึงเอ็ดโดย ศ. ดร. ประนอม จันทรโณทัย คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยขอนแก่น ซึ่งคูปองตัวอย่าง ( kku032012 ) ฝาก การสกัดและการแยก . อากาศแห้งราก ( 2.0 กิโลกรัม ) ของหน้า macropterum มีพื้นดินและกระชั้นชิดสกัดที่อุณหภูมิห้องกับ hexanes ( 3 × 12 ลิตร ) , etoac ( 3 × 5 ลิตร ) และปริมาณ ( 3 × 5 L ) หลังจากการระเหยของตัวทำละลายการ hexanes ดิบ ( 30 กรัม ) etoac ( 48 กรัม ) และปริมาณ ( 125 กรัม ) สารสกัดที่ได้รับ การ hexanes สกัดแยกflเถ้าโดยซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโทกราฟี ( FCC ) และตัวอย่างที่มีการไล่ระดับของระบบ hexanes
etoac , และปริมาณ . บนพื้นฐานของ TLC ของเศษส่วนที่มีสารประกอบหลักเดียวกันร่วมให้จึงได้เศษส่วน hf1 เพื่อ hf5 .ส่วน hf2 คือปุริจึงเอ็ดโดยซิลิกาเจล FCC , และ 10% etoac − hexanes ถูกใช้เป็นสารละลายเพื่อให้สอง subfractions hf2.1 hf2.2 , และ . เพิ่มเติม ภูริจึงบวกของทั้งสอง subfractions โดยเตรียมแผ่นโครมาโทกราฟี ( PLC ) และพัฒนากับ 1% ) − hexanes เป็นff orded 8 ( 7.4 มิลลิกรัม 0.0004% ) และ 6 ( 15.4 ยวมิลลิกรัม ตามลำดับส่วน hf3 คือปุริจึงเอ็ดโดยซิลิกาเจล FCC และตัวอย่างด้วยระบบ Isocratic 50% ch2cl2 − hexanes ให้ subfractions hf3.1 − 3 , hf3.3 . และมี subfractions hf3.1 hf3.2 Puri เพิ่มเติมจึงเอ็ดโดย PLC ที่ใช้ 50% ch2cl2 − hexanes และ 10% etoac − hexanes เป็นตัวทำละลาย hexane ให้ 3 ( 3.5 มิลลิกรัม , 0.0002 ) และ 13 ( 10.7 มิลลิกรัม 0.00005 ตามลำดับ ที่ Puri จึงบวกของ subfraction hf3 .3 โดยซิลิกาเจล FCC ( 50% ch2cl2 − hexanes ) ให้ subfractions hf3.3.1 − 3 , hf3.3.3 . เพิ่มเติมในของภูริ จึง hf3.3.1 กับ PLC ( 100% ch2cl2 ) ff orded 15 ( 13.6 mg ฯ % ) จึงทำให้ hf3.3.2 hf3.3.3 ของ Puri และทดลองกับ PLC โดยใช้ 10% etoac − hexanes เป็นตัวทำละลาย hexane ให้ 9 ( 100 มิลลิกรัม และ % ) และ 10 ( 13.8 มิลลิกรัม ฯตามลำดับส่วน hf4 คือปุริจึงเอ็ดโดยซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโทกราฟีและตัวอย่าง ด้วยการไล่ระดับสี 20 % etoac − hexanes ให้ subfractions hf4.1 − 3 , hf4.3 . subfraction hf4.1 คือปุริจึงเอ็ดโดยคอลัมน์โครมาโทกราฟีสามารถ lh-20 และปริมาณตัวอย่าง 100% เพื่อสั่งff 1 ( 13.2 mg ฯ % ) subfraction hf4.2 คือปุริมจึงใช้ PLC และ 30 % ) − hexanes ใช้เป็นตัวทำละลาย เพื่อให้พัฒนา 5 ( 5.3 มิลลิกรัม0.0003 % ) subfraction hf4.3 คือปุริจึงเอ็ดโดย Sephadex lh-20 คอลัมน์โครมาโทกราฟี ( 100% ปริมาณจำกัด ( 100% ) รองลงมา คือ ch2cl2 ) ผลผลิตที่ 4 ( 9.5 มิลลิกรัม 0.0005% ) การ etoac สกัดภายใต้ซิลิกาเจล FCC และตัวอย่าง ด้วยการไล่ระดับสี ระบบ hexanes etoac , และปริมาณการffอ๊อดจึงได้ subfractions ef1 − , ef5 .subfraction ef2 ภายใต้ซิลิกาเจล FCC และตัวอย่าง ด้วยการไล่ระดับสี 20 % etoac − hexanes ให้ subfractions ef2.1 − 3 , ef2.3 . subfraction ef2.2 คือปุริจึงเอ็ดโดย PLC ( 10% ) − hexanes ) ผลผลิต 13 ( 10.7 มิลลิกรัม 0.0005% ) เพิ่มเติมในของภูริ จึง ef2.3 โดย FCC ซิลิกาเจลและ ( การไล่ระดับ 50% ch2cl2 − hexanes ให้ 11 ( 9.8 มก. 0.0005% ) และ 16 ( 9.6 mg 0.0005% )ส่วน ef3 คือปุริจึงเอ็ดโดยซิลิกาเจล FCC ( 20% etoac hexanes −นี้ ) เพื่อให้ subfractions ef3.1 และ ef3.2 . เพิ่มเติมในของภูริ จึง ef3.1 กับ PLC ( 100% ch2cl2 ) และ 7 ( เท่ากับ 0.015 มิลลิกรัม % ) พูริ จึง ef3.2 ด้วยคอลัมน์โครมาโทกราฟีไอออนบวกของ reversed-phase ( 20% และปริมาณเป็นff orded h2o − 2 ( 7.3 mg 0.0004% % )ส่วน ef4 คือปุริจึงเอ็ดโดยซิลิกาเจล FCC และตัวอย่าง 30 % etoac − hexanes ให้สอง subfractions ef4.1 ef4.2 , และ . subfraction ef4.2 เป็นตัวเจลจึงสามารถ ltration มากกว่า lh-20 ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) เป็นff ORD สอง subfractions ef4.2.1 ef4.2.2 , และ . หลังจากการ subfraction ปุริจึงของ ef4.2.1 กับ PLC ( 20% etoac − hexanes ) , 14 ( 11.4 0.0006 mg % ) คือได้รับ subfraction ef4.2.2 คือ