3.2. FT-IR spectroscopy can discriminate responses to nutrient limitation in
a marine microalga
To demonstrate the significant metabolic plasticity that eukaryotic
microalgae, including a marine microalga, can display in response to
an environmental stress such as nutrient starvation, analysis was performed
using the marine alga D. tertiolecta. D. teriolecta cultures grown
for 20 days until late exponential phase in artificial seawater (ASP2) medium
were compared to those cultivated in fertilised seawater medium.
As would be expected, growth of the cultures was significantly increased
following fertilisation with an approximately 2.5-fold increase
in wet weight biomass (data not shown). The EMSC2-normalised FTIR
spectra showed that the metabolic fingerprint of D. tertiolecta varies
markedly when grown in the different media (Fig. 3a), while the PCA
scores plot generated from these spectra showed distinct clustering of
spectra derived from ASP2-grown cells from those grown in fertilised
medium along PC1 (Fig. 3b). The PC1 loading plot suggests that ASP2-
grown nutrient-stressed cells are clustered towards the negative side
of the PC1 axis as a result of having higher (negative on loading plot)
carbohydrate peaks (vC–O of carbohydrates at 1160, 1086, 1050 and
1036 cm−1
) and a total lipid peak (vC_O of ester functional groups
from lipids and fatty acids at 1745 cm−1
), as well as a reduction (positive
on loading plot) in protein peaks (vC_O of amides associated
with proteins; amide I at 1655 cm−1 and δ N–H of amides associated
with protein; amide II at 1545 cm−1
) (Fig. 3c). Relative quantification
of carbohydrate and lipid content by calculating carbohydrate:amide I
and lipid:amide I peak height ratio values (Fig. 3d) demonstrated that
both metabolic classes are significantly higher in the nutrient stressed
seawater grown cells than in fertiliser-grown cells.
Previously we have demonstrated that metabolic responses to N or P
limitation, notably carbohydrate and lipid induction, can be clearly determined
by FT-IR spectroscopy for two freshwater microalgae species,
C. reinhardtii and Scenedesmus subspicatus [5,6,25]. Here we show that a
marine microalga displays a similar nutrient limitation response, which
elicits a substantial change in FT-IR spectra, and thus two very distinct
spectra can be generated from the same species cultivated in just two
different conditions. This is similar to N limitation responses detected
by FT-IR spectroscopy analysis described previously for the related marine
alga Dunaliella salina [26].
3.2. สเปกโทรสโก IR ฟุตสามารถแยกแยะการตอบสนองการจำกัดสารอาหารในmicroalga การทางทะเลการสาธิตปั้นเผาผลาญสำคัญว่า eukaryoticสาหร่าย microalga ในทะเล รวมทั้งสามารถแสดงเพื่อตอบสนองดำเนินการมีความเครียดด้านสิ่งแวดล้อมเช่นสารอาหารความอดอยาก วิเคราะห์ใช้ tertiolecta alga D. ทะเล D. teriolecta วัฒนธรรมปลูกสำหรับ 20 วันจนถึงระยะปลายเนนที่กลางน้ำทะเลเทียม (ASP2)ถูกเมื่อเปรียบเทียบกับผู้เพาะปลูกในน้ำทะเล fertilised ปานกลางขณะที่คาดว่าจะใช้ เจริญเติบโตของวัฒนธรรมอย่างมีนัยสำคัญเพิ่มขึ้นปฏิสนธิต่อไป ด้วยการเพิ่มประมาณ 2.5-foldในชีวมวลน้ำหนักเปียก (ไม่แสดงข้อมูล) FTIR ที่ทราบ EMSC2สเปกตรัมพบว่า ลายนิ้วมือของ D. tertiolecta เผาผลาญแตกต่างกันไปอย่างเด่นชัดเมื่อปลูกในสื่อต่าง ๆ (รูปที่ 3a), ในขณะ PCAคะแนนพล็อตจากสเปกตรัมเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าแตกต่างกันคลัสเตอร์ของสเปกตรัมที่ได้จากเซลล์ ASP2 ปลูกจากที่ปลูกใน fertilisedปานกลางตาม PC1 (รูปที่ 3b) แนะนำการโหลด PC1 พล็อตที่ ASP2 -เซลล์ที่เน้นสารอาหารปลูกมีคลัสเตอร์ไปทางด้านลบของแกน PC1 เป็นผลมาจากมีสูงขึ้น (เป็นลบในการโหลดพล็อต)ยอดคาร์โบไฮเดรต (vC – O ของคาร์โบไฮเดรตที่ 1160, 1086, 1050 และ1036 cm−1) และสูงสุดรวมไขมัน (vC_O ของหมู่เอสเทอร์จากไขมันและกรดไขมันที่ 1745 cm−1), รวมทั้งการลดบวกในการโหลดพล็อต) ในโปรตีนยอด (vC_O ของ amides ที่เกี่ยวข้องด้วยโปรตีน amide ฉัน cm−1 1655 และδ N – H ของ amides ที่เกี่ยวข้องมีโปรตีน amide II ที่ 1545 cm−1) (รูปที่ 3c) นับญาติคาร์โบไฮเดรตและไขมันเนื้อหาโดยการคำนวณคาร์โบไฮเดรต: amide ฉันและไขมัน: amide ผม peak ค่าอัตราส่วนความสูง (รูป 3d) แสดงให้เห็นว่าทั้งสองประเภทที่เผาผลาญจะสูงในสารอาหารที่เน้นน้ำทะเลปลูกเซลล์กว่าในปุ๋ยปลูกเซลล์ก่อนหน้านี้ เราได้แสดงให้เห็นว่าเผาผลาญคำตอบ N หรือ Pจำกัด โดยเฉพาะอย่างยิ่งคาร์โบไฮเดรตและไขมันเหนี่ยวนำ สามารถถูกกำหนดอย่างชัดเจนโดยสเปกโทรสโก IR ฟุตสำหรับสองสายพันธุ์สาหร่ายน้ำจืดC. reinhardtii และ Scenedesmus subspicatus [5,6,25] ที่นี่เราแสดงที่เป็นmicroalga มารีนแสดงเป็นเหมือนกับการตอบสนองข้อจำกัดของสารอาหาร ซึ่งกันการเปลี่ยนแปลงที่พบในสเปกตรัมฟุต-IR และสองแตกต่างกันมากสเปกตรัมที่สามารถสร้างขึ้นจากสายพันธุ์เดียวที่ปลูกในเพียง 2สภาพแตกต่างกัน นี่คือคล้ายกับการตอบสนองข้อจำกัด N ที่ตรวจพบโดยการวิเคราะห์สเปกโทรสโก IR ฟุตที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้สำหรับทางทะเลที่เกี่ยวข้องซาลินา Dunaliella alga [26]
การแปล กรุณารอสักครู่..
