Enzyme crude extract preparation
POD and PPO were extracted using the method described by
Rodrigo, Rodrigo, Alvarruiz, and Frígola (1996) with some modifications.
Papaya, mango and orange fruits were washed, peeled
and cut into small pieces. A mixture of the fruit pulp (orange, mango
and papaya in a proportion of 15:20:65, w/w/w, respectively)
was homogenized in a proportion of 1:1 (w/v) with 0.05 M sodium
phosphate buffer solution (Panreac Química, Barcelona, Spain) at
pH 7.0 in a blender for 5 min at 4 C. The buffer contained 1 M NaCl
(Scharlau, Barcelona, Spain) and 5% (w/v) polyvinylpolypyrrolidone
(Sigma–Aldrich Co. LLC, St. Louis, MO, USA). The homogenate was
filtered through a layer of cheesecloth and the residue was centrifuged
at 20,199g for 30 min at 4 C with an Avanti J-25 centrifuge,
Beckman Instruments Inc. (Fullerton, California, USA.). The supernatant
constituted the enzyme extract.
เตรียมสารสกัดหยาบของเอนไซม์PPO และ POD ถูกสกัดโดยใช้วิธีการอธิบายRodrigo, Rodrigo, Alvarruiz และ Frígola (1996) กับปรับเปลี่ยนบางอย่างมะละกอ มะม่วง และส้มผลไม้ล้างทำความสะอาด ปอกเปลือกและตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ ส่วนผสมของเนื้อเยื่อผลไม้ (ส้ม มะม่วงและมะละกอในสัดส่วนของ 15:20:65, w/w/w ตามลำดับ)ถูก homogenized เป็นกลุ่มในสัดส่วน 1:1 (w/v) กับโซเดียม 0.05 Mฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซลูชั่น (Panreac Química บาร์เซโลนา สเปน) ที่pH 7.0 ในเบลนเดอร์ใน 5 นาทีที่ 4 ค บัฟเฟอร์อยู่ 1 M NaCl(Scharlau บาร์เซโลนา สเปน) และ 5% (w/v) polyvinylpolypyrrolidone(ซิก-Aldrich บริษัท LLC, St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) Homogenate ถูกกรองผ่านชั้นของ cheesecloth และสารตกค้างถูก centrifugedที่ 20,199g ใน 30 นาทีที่ 4 C ด้วยเครื่องหมุนเหวี่ยงเรียนโรส J-25Beckman เครื่อง อิงค์ (ฟู แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) Supernatantทะลักสารสกัดเอนไซม์
การแปล กรุณารอสักครู่..
Enzyme crude extract preparation
POD and PPO were extracted using the method described by
Rodrigo, Rodrigo, Alvarruiz, and Frígola (1996) with some modifications.
Papaya, mango and orange fruits were washed, peeled
and cut into small pieces. A mixture of the fruit pulp (orange, mango
and papaya in a proportion of 15:20:65, w/w/w, respectively)
was homogenized in a proportion of 1:1 (w/v) with 0.05 M sodium
phosphate buffer solution (Panreac Química, Barcelona, Spain) at
pH 7.0 in a blender for 5 min at 4 C. The buffer contained 1 M NaCl
(Scharlau, Barcelona, Spain) and 5% (w/v) polyvinylpolypyrrolidone
(Sigma–Aldrich Co. LLC, St. Louis, MO, USA). The homogenate was
filtered through a layer of cheesecloth and the residue was centrifuged
at 20,199g for 30 min at 4 C with an Avanti J-25 centrifuge,
Beckman Instruments Inc. (Fullerton, California, USA.). The supernatant
constituted the enzyme extract.
การแปล กรุณารอสักครู่..
เอนไซม์สกัดหยาบการเตรียม
ฝักและ PPO ถูกสกัดโดยใช้วิธีการที่อธิบายโดย
โรดริโก้ โรดริโก้ alvarruiz และ FR เมืองโก ( 1996 ) ด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่าง .
มะละกอ , มะม่วงและส้มผลไม้ล้าง
และหั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆปอกเปลือก ส่วนผสมของเยื่อผลไม้ ( ส้ม , มะม่วงและมะละกอ
ในสัดส่วนของ 15:20:65 w / w / w ตามลำดับ )
ถูกบดในสัดส่วน 1 : 1 ( w / v ) 005 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ โซลูชั่น (
panreac คูเมืองแก้ว , บาร์เซโลนา , สเปน )
pH 7.0 ในเครื่องปั่นสำหรับ 5 นาทีที่ 4 C มีขนาดบัฟเฟอร์
1 m ( scharlau , บาร์เซโลนา , สเปน ) และ 5% ( w / v ) polyvinylpolypyrrolidone
( Sigma ) ดิช Co . LLC , เซนต์ หลุยส์ โม , USA ) โดยแยกเป็น
กรองผ่านชั้นของผ้าและการตกค้างในระดับ
20199g สำหรับ 30 นาทีที่ 4 C กับลุกขึ้น j-25 centrifuge ,
Beckman เครื่องมือ Inc . ( ฟูลเลอร์ตัน แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) และน่าน
โดยเอนไซม์สกัดเข้มข้น
การแปล กรุณารอสักครู่..