The cytosolic trehalase enzyme, NT,

The cytosolic trehalase enzyme, NT, has been purified and characterized extensively from S. cerevisiae. In non-denaturing gels this enzyme protein exhibited a molecular mass of 160 kDa, while in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) it showed a mass of 80 kDa4. This hydrolase enzyme is specific for trehalose. The Km of NT has been reported to be 5.7mM. The gene responsible for trehalase activity in S. cerevisiae is NTH1. This gene is with an open reading frame of 2079 base pairs (bp), encoding a protein of 693 amino acids, corresponding to a molecular mass of 79569 Da.

NT activity is regulated by protein phosphorylation-dephosphorylation. Phosphorylation with cAMP-dependent protein kinase activates NT. Dephosphorylation of the purified phosphorylated enzyme by alkaline phosphatase caused an almost complete inactivation of the enzyme activity; but a recovery of the enzyme activity could be observed by rephosphorylation while incubating with ATP and protein kinase. The activity of NT in crude extracts is enhanced by polycations, while the activity of purified phosphorylated NT is inhibited by them. The activation of crude extracts was found to be due to the removal of polyphosphates, both of which inhibit NT activity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เอนไซม์ cytosolic trehalase, NT ได้รับบริสุทธิ์ และลักษณะอย่างกว้างขวางจาก S. cerevisiae ในเจ denaturing ไม่ใช่ โปรตีนเอนไซม์นี้จัดแสดงมวลโมเลกุล 160 kDa ในขณะที่ในโซเดียม dodecyl ซัลเฟตตรวจสอบวิเคราะห์เจอิ (SDS-หน้า) มันแสดงให้เห็นว่ามวลของ 80 kDa4 เอนไซม์ hydrolase นี้จะเฉพาะเจาะจงสำหรับ trehalose กม. NT ได้รับรายงานเป็น 5.7 มม. ยีนที่รับผิดชอบกิจกรรม trehalase ใน S. cerevisiae เป็น NTH1 ยีนนี้จะมีกรอบเปิดอ่าน 2079 ฐานคู่ (bp), การเข้ารหัสโปรตีนกรดอะมิโนที่ 693 ที่สอดคล้องกับมวลโมเลกุลของดา 79569กิจกรรม NT ถูกควบคุม โดยโปรตีน phosphorylation-dephosphorylation Phosphorylation ด้วยค่ายขึ้นกับโปรตีนไคเนสรีป็น NT. Dephosphorylation ของเอนไซม์ phosphorylated ที่บริสุทธิ์ โดยด่าง phosphatase เกิดฤทธิ์เอนไซม์ ความสมบูรณ์ แต่การฟื้นตัวของกิจกรรมเอนไซม์อาจจะสังเกตได้ โดย rephosphorylation ในขณะที่ incubating กับ ATP และโปรตีนไคเนสรี Polycations เพิ่มกิจกรรมของ NT ในสารสกัดหยาบในขณะที่กิจกรรมของ NT phosphorylated บริสุทธิ์ถูกห้าม โดยพวกเขา พบการทำงานของสารสกัดจากน้ำมันดิบเกิดจากการกำจัด polyphosphates ซึ่งยับยั้งกิจกรรม NT

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เอนไซม์ trehalase cytosolic, NT, ได้รับการทำให้บริสุทธิ์และลักษณะอย่างกว้างขวางจาก S. cerevisiae ในเจลที่ไม่ใช่ denaturing โปรตีนเอนไซม์นี้แสดงมวลโมเลกุล 160 กิโลดาลตันในขณะที่ในโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) มันแสดงให้เห็นมวลของ 80 kDa4 เอนไซม์ hydrolase นี้เป็นที่เฉพาะเจาะจงสำหรับทรีฮาโล กมของ NT ได้รับรายงานว่าเป็นที่ 5.7mM ยีนความรับผิดชอบสำหรับกิจกรรม trehalase ใน S. cerevisiae เป็น NTH1 ยีนนี้จะมีกรอบการอ่านเปิด 2079 ฐานคู่ (BP) การเข้ารหัสโปรตีนกรดอะมิโน 693 ให้สอดคล้องกับมวลโมเลกุลของดา 79,569.

กิจกรรม NT จะถูกควบคุมโดยโปรตีน phosphorylation-dephosphorylation phosphorylation กับค่ายขึ้นอยู่กับโปรตีนไคเนสป็ NT dephosphorylation ของเอนไซม์ phosphorylated บริสุทธิ์โดยอัลคาไลน์ฟอสฟาก่อให้เกิดการใช้งานเกือบเสร็จสมบูรณ์ของเอนไซม์; แต่การฟื้นตัวของกิจกรรมของเอนไซม์จะถูกตรวจสอบโดย rephosphorylation ขณะฟักกับเอทีพีและโปรตีนไคเนส กิจกรรมของ NT ในสารสกัดหยาบจะเพิ่มขึ้นโดย polycations ในขณะที่กิจกรรมของผู้บริสุทธิ์ phosphorylated NT ถูกยับยั้งโดยพวกเขา การเปิดใช้งานของสารสกัดพบว่าเนื่องจากการกำจัดของโพลีทั้งสองซึ่งยับยั้งกิจกรรม NT

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ cytosolic ทรีฮาเลสเอนไซม์ , NT , ได้รับการทำให้บริสุทธิ์และลักษณะอย่างกว้างขวางจาก S . cerevisiae . ในโนนี่เจลเอนไซม์โปรตีนนี้มีมวลโมเลกุลประมาณ 160 กิโลดาลตันในขณะที่โซเดียมโดเดซิลซัลเฟตโพลีอะคริลาไมด์เจลอิเลคโตรโฟรีซีส ( SDS-PAGE ) พบว่ามีมวล 80 kda4 . นี้เป็นเฉพาะสำหรับการเอนไซม์ไฮโดรเลส . กิโลเมตรของ NT ได้ 5.7mm . ยีนที่รับผิดชอบกิจกรรมทรีฮาเลสใน S . cerevisiae คือ nth1 . ยีนนี้มี open reading frame 2079 คู่เบส ( เบส ) , โปรตีนของกรดอะมิโนในการเข้ารหัสที่เกี่ยวข้องกับมวลโมเลกุลของ 79569 ดา .สำหรับกิจกรรมที่ถูกควบคุมโดยโปรตีนฟอสโฟริเลชันดีฟอ ฟริเลชัน . โปรตีนไคเนสฟอสโฟริเลชันกับค่ายพึ่งเปิด NT ดีฟอ ฟริเลชันของฟอสฟอรีเลเตตเอนไซม์บริสุทธิ์โดยระโยงระยาง ซึ่งทำให้เกือบทั้งหมดของกิจกรรมของเอนไซม์ แต่การฟื้นตัวของกิจกรรมของเอนไซม์สามารถสังเกตได้โดย rephosphorylation ในขณะที่การแช่กับเอทีพี และโปรตีนไคเนส . กิจกรรมของ NT ในสกัดเพิ่มขึ้นโดย polycations ในขณะที่กิจกรรมของโปรตีนฟอสฟอรีเลเตต NT คือยับยั้งโดยพวกเขา การใช้สารสกัด พบว่าเกิดจากการ polyphosphates ทั้งสองซึ่งยับยั้ง NT กิจกรรม