For the sequencing of the 16S rRNA gene, genomic DNA was obtained using a Solgent genomic DNA extraction kit and the 16S rRNA gene was amplified according to the methods of Weisburg et al. (1991). The 16S rRNA gene sequencing was performed by Solgent; sequences of related taxa were obtained from the EzTaxon-e server (http:// eztaxon-e.ezbiocloud.net; Kim et al., 2012) and GenBank database. Multiple alignments were performed using the program CLUSTAL X (Thompson et al., 1997), followed by gap editions in the BioEdit program (Hall, 1999). The Kimura two-parameter model (Kimura, 1983) was used to calculate evolutionary distances. The neighbour-joining (Saitou & Nei, 1987) and the maximum-likelihood methods were usedto reconstruct phylogenetic trees, as implemented in MEGA 5.2 (Kumar et al., 2008). The bootstrap values were calculated based on 1000 replications (Felsenstein, 1985).
สำหรับการจัดลำดับของยีน 16S rRNA ของดีเอ็นเอที่ได้รับโดยใช้ชุดสกัดดีเอ็นเอ Solgent จีโนมและยีน 16S rRNA ถูกขยายตามวิธีการของ Weisburg et al, (1991) ลำดับยีน 16S rRNA ได้ดำเนินการโดย Solgent; ลำดับของแท็กซ่าที่เกี่ยวข้องที่ได้รับจากเซิร์ฟเวอร์ EzTaxon-E (http: //. eztaxon-e.ezbiocloud.net; คิม et al, 2012) และฐานข้อมูลของ GenBank การจัดแนวหลายได้ดำเนินการโดยใช้โปรแกรม Clustal X ( ธ อมป์สัน et al., 1997) ตามด้วยรุ่นช่องว่างในโปรแกรม BioEdit (ที่ฮอลล์, 1999) คิมูระสองพารามิเตอร์แบบ (คิมูระ, 1983) ถูกใช้ในการคำนวณระยะทางวิวัฒนาการ เพื่อนบ้านเข้าสู่ (Saitou & Nei, 1987) และวิธีการที่น่าจะเป็นสูงสุดถูก usedto สร้างต้นไม้ขณะที่การดำเนินการใน MEGA 5.2 (Kumar et al., 2008) ค่าบูตถูกคำนวณจาก 1,000 ซ้ำ (Felsenstein, 1985)
การแปล กรุณารอสักครู่..

สำหรับลำดับของ 16S rRNA ยีน ดีเอ็นเอ ได้ใช้ solgent การสกัดดีเอ็นเอและยีน 16S rRNA ชุดขยายตามวิธีการของ weisburg et al . ( 1991 ) การลำดับเบส 16S rRNA ยีนโดยใช้ solgent ลำดับของที่เกี่ยวข้องและที่ได้รับจาก eztaxon-e เซิร์ฟเวอร์ ( http : / / eztaxon-e.ezbiocloud.net ; Kim et al . , 2012 ) และฐานข้อมูลขนาด . หลาย การได้ใช้โปรแกรม clustal X ( Thompson et al . , 1997 ) , ตามด้วยช่องว่างต่างๆในโปรแกรม bioedit ( Hall , 1999 ) พวกคิมูระสองพารามิเตอร์โมเดล ( คิมูระ , 1983 ) ถูกใช้ในการคำนวณเชิงวิวัฒนาการระยะทาง เพื่อนบ้านที่เข้าร่วม ( ไซโตะ & เนย , 1987 ) และวิธีความเป็นไปได้สูงสุดและสร้าง phylogenetic ต้นไม้ เช่น ใช้ในเมกา 5.2 ( Kumar et al . , 2008 ) เท่ากับค่าคำนวณตามซ้ำ 1 , 000 ครั้ง ( felsenstein , 1985 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
