Light and transmission electron mic

Light and transmission electron microscopy
Samples of P. indica-infected root segments containing nematodefeeding
sites were dissected and immediately immersed in a fixative
composed of 2% (w/v) paraformaldehyde (Sigma, St Louis, MI,
USA) and 2% (v/v) glutaraldehyde (Fluka, Buchs, Switzerland)
in 0.05 M sodium cacodylate buffer (pH 7.2; Sigma) for 2 h at
room temperature. Samples were collected at 7/4, 11/4, 13/10, and
17/10 days post infection (dpi, Fig. 1) after inoculation with P.
indica/H. schachtii, respectively. Probes were post fixed in osmium
tetroxide (Merck, Darmstadt, Germany), dehydrated in ethanol and
propylene oxide (Sigma), and infiltrated and embedded in EPON
epoxy-resin (Fluka) as described by Golinowski et al. (1996) and
Sobczak et al. (1999). Semi-thin sections (3 μm thick) were taken
on a Leica RM2165 microtome (Leica Microsystems, Wetzlar,
Germany). They were collected on glass slides and stained with
hot 1% (w/v) aqueous solution of crystal violet (Sigma) for 60 s at
65 °C and examined using a AX70 Provis light microscope equipped
with an DP50 digital camera (Olympus, Tokyo, Japan). Ultra-thin
sections (70–80 nm) were taken on a UCT ultramicrotome (Leica
Microsystems) and mounted on formvar (Fluka) -coated single-slot
copper grids. Sections were stained with uranyl acetate (Fluka) and
lead citrate (Sigma) (Golinowski et al., 1996) and examined with a
268D Morgagni transmission electron microscope (FEI, Hillsboro,
OR, USA) operating at 80 kV. The images were taken with an
Morada digital camera (Olympus SIS, Münster, Germany) at 10
Mpix resolution.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แสงและส่งชาวดัตช์ตัวอย่างของส่วนราก indica ที่ติดเชื้อ P. nematodefeeding ประกอบด้วยเว็บไซต์ dissected และในเครื่องทำให้คงทันทีประกอบด้วย paraformaldehyde 2% (w/v) (ซิกม่า เซนต์หลุยส์ MIสหรัฐอเมริกา) และ 2% (v/v) glutaraldehyde (Fluka ของฉัน สวิตเซอร์แลนด์)ใน 0.05 M โซเดียม cacodylate บัฟเฟอร์ (pH 7.2 ซิกม่า) สำหรับ 2h ที่อุณหภูมิห้อง ตัวอย่างเก็บรวบรวมเมื่อ 7/4, 11/4, 13/10 และ17/10 วันลงติดเชื้อ (dpi รูปที่ 1) หลังจากกักบริเวณกับ P.indica/H. schachtii ตามลำดับ โพรบถูกโพสต์แก้ไขในออสเมียมเทโตรไซด์ (Merck ดาร์มสตัดท์ เยอรมนี), อบแห้งในเอทานอล และนางรวิฐาพงศ์นุชิต (Sigma), และการแทรกซึม และฝังตัวใน EPONอีพ็อกซี่เรซิน (Fluka) ตามที่อธิบายไว้โดย Golinowski et al. (1996) และSobczak et al. (1999) ถ่ายกึ่งบางส่วน (หนา 3 ไมครอน)บนเครื่อง microtome ไลก้า RM2165 (Microsystems ไลก้า Wetzlarประเทศเยอรมนี) พวกเขาถูกรวบรวมไว้บนกระจกสไลด์ และย้อมด้วยร้อน 1% (w/v) ละลายของคริสตัลไวโอเลต (Sigma) 60 s ที่65 ° C และตรวจสอบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แสง AX70 Provis พร้อมด้วยการ DP50 กล้องดิจิตอล (Olympus โตเกียว ญี่ปุ่น) บางเฉียบส่วน (70 – 80 nm) ถ่ายบน ultramicrotome ม่ายสาวตัวจี๊ด (ไลก้าMicrosystems) และติดตั้งบน formvar (Fluka) -เคลือบช่องเดียวทองแดงกริด ส่วนถูกย้อม ด้วย uranyl อะซิเตท (Fluka) และนำซิเตรต (Sigma) (Golinowski et al. 1996) และมีการตรวจสอบการ268D Morgagni กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (FEI, Hillsboroหรือ สหรัฐอเมริกา) 80 kV นำภาพมาใช้กับการMorada กล้องดิจิตอล (Olympus SIS ซเตอร์ เยอรมนี) 10ความละเอียดของรอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แสงและอิเล็กตรอนส่งกล้องจุลทรรศน์
ตัวอย่างพีกลุ่มราก indica ติดเชื้อที่มี nematodefeeding
เว็บไซต์ที่ถูกชำแหละและทันทีที่แช่อยู่ในตรึง
ประกอบด้วย 2% (w / v) paraformaldehyde (ซิกเซนต์หลุยส์, MI,
USA) และ 2% (V / v) glutaraldehyde (Fluka, Buchs วิตเซอร์แลนด์)
ใน 0.05 M บัฟเฟอร์โซเดียม cacodylate (pH 7.2; ซิกม่า) เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่
อุณหภูมิห้อง เก็บตัวอย่างที่ 7/4, 11/4, 13/10 และ
17/10 วันที่โพสต์ติดเชื้อ (dpi, รูป. 1) หลังจากการฉีดวัคซีนกับพี
indica / H schachtii ตามลำดับ พร็อบโพสต์ถูกแก้ไขในออสเมียม
tetroxide (เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี), อบแห้งในเอทานอลและ
โพรพิลีนออกไซด์ (ซิกม่า) และแทรกซึมและฝังตัวอยู่ใน EPON
อีพ็อกซี่เรซิน (Fluka) ตามที่อธิบาย Golinowski et al, (1996) และ
Sobczak et al, (1999) ส่วนกึ่งบาง (3 ไมครอนหนา) ถูกนำ
บน microtome Leica RM2165 (Leica Microsystems, Wetzlar,
เยอรมนี) พวกเขาจะถูกรวบรวมไว้ในกระจกสไลด์และย้อมด้วยสี
ร้อน 1% (w / v) สารละลายสีม่วงคริสตัล (ซิกม่า) 60 s ที่
65 ° C และตรวจสอบการใช้แสงกล้องจุลทรรศน์ AX70 Provis ติดตั้ง
พร้อมกับกล้องดิจิตอล DP50 (Olympus, โตเกียว ประเทศญี่ปุ่น) บางเฉียบ
ส่วน (70-80 นาโนเมตร) ได้รับการดำเนินการใน ultramicrotome UCT (Leica
Microsystems) และติดตั้งอยู่บน formvar (Fluka) เคลือบเดียวช่อง
กริดทองแดง ส่วนที่ถูกย้อมด้วยสี uranyl acetate (Fluka) และ
นำไปสู่ซิเตรต (ซิกม่า) (Golinowski et al., 1996) และตรวจสอบกับ
268D Morgagni ส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (FEI โบโร,
OR, USA) ปฏิบัติการที่ 80 กิโลโวลต์ ภาพที่ถูกถ่ายกับ
กล้องดิจิตอล Morada (โอลิมปั SIS, มอนสเตอร์เยอรมนี) 10
ความละเอียด Mpix

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แสงและกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราดตัวอย่างของหน้าจากกลุ่มที่มี nematodefeeding ติดเชื้อรากเว็บไซต์ที่ถูกตัดทันทีและแช่ในฟิกเซทีฟประกอบด้วย 2 % ( w / v ) พาราฟอร์มาลดิไฮด์ ( Sigma , เซนต์ หลุยส์ มิสหรัฐอเมริกา ) และ 2% ( v / v ) กลูตารัลดีไฮด์ ( fluka buchs , สวิตเซอร์แลนด์ )ใน 0.05 M โซเดียมจากนั้นนำบัฟเฟอร์ pH 7.2 ; Sigma ) 2 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิของห้อง ตัวอย่างที่ 7 / 4 , 5 / 4 , 13 / 10 และ17 / 10 วันหลังการติดเชื้อ ( จุดต่อนิ้ว , รูปที่ 1 ) หลังจากการ P3 / h schachtii ตามลำดับ จึงมีประกาศแก้ไขในออสเมียมไซด์ ( เมอร์คดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) , ขาดน้ำและเอทานอลโพรพิลีนออกไซด์ ( Sigma ) และแทรกซึมและฝังตัวอยู่ในเกรดอีพอกซีเรซิน ( fluka ) ตามที่อธิบายไว้โดย golinowski et al . ( 1996 ) และซอบแช็ก et al . ( 1999 ) ส่วนบางกึ่ง ( ม. หนา 3 μ ) ถ่ายเมื่อไลก้า ( Leica Microsystems Wetzlar rm2165 เครื่องตัดชิ้นเนื้อ , ,เยอรมนี ) พวกเขาถูกเก็บบนกระจกสไลด์และย้อมสีด้วยร้อน 1% ( w / v ) สารละลายของคริสตัลสีม่วง ( Sigma ) 60 S ที่65 ° C และตรวจสอบการใช้ ax70 provis แสงสว่างกล้องจุลทรรศน์พร้อมกับ DP50 กล้องดิจิตอล ( Olympus , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) บางพิเศษส่วน ( 70 – 80 nm ) ถ่ายบน uct ultramicrotome ( ไลก้า10 ) และติดตั้งบน formvar ( fluka ) - เคลือบเดียวสล็อตกริดทองแดง บางส่วนถูกย้อมด้วยยูเรนิลอะซิเตต ( fluka ) และนำซิเตรต ( ซิกม่า ) ( golinowski et al . , 1996 ) และตรวจสอบกับ268d มากานิกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ( Fei , Hillsboro ,หรือ สหรัฐอเมริกา ) ได้ 80 กิโล . ภาพที่ถ่ายด้วยโมราดา กล้องดิจิตอล ( Olympus พี่ M ü nster , เยอรมนี ) 10mpix ความละเอียด