Transition from an undifferentiated

Transition from an undifferentiated to a differentiated state
in spermatogonia is regulated by activation of RA signaling and
involves the attainment of KIT receptor expression. Upon RA
stimulation, the undifferentiated spermatogonial population in
the SSC cell line transits into the differentiated state, and the
expression levels of several genes are increased [36,37]. To verify
whether the Tfrc gene was really RA responsive, we treated the
steady mouse SSC line established in our lab [23] with ATRA or
DMSO (vehicle control) with 24 h stimulation. The results
showed that Stra8, Scp3, and Tfrc were significantly up regulated,
while Camk1 and Pdcd4 were downregulated after RA induction.
Therefore, similar to Stra8, Tfrc is also a RA-responsive gene in
germ cells.
Transferrin receptor or Tfrc, also known as CD71, is required
for erythropoiesis and neurological development [38,39]. Skinner
and Griswold reported that rat Sertoli cells in vitro secreted
transferrin, although the importance of transferrin in spermatogenesis
remained to be fully elucidated [40]. Vannelli et al.
found that transferrin was mainly located in Sertoli cells in
human seminiferous tubules, while Tfrc was found only in
spermatocytes and early spermatids [41]. In the present study,
because of the poor quality of antibodies used in immunolocalization,
wewere unable to obtain cellular localization of TFRC in
seminiferous tubules. Together with previous reports, our
findings suggest that TFRC might play an important role during
meiosis initiation in male mice. However, further studies are
needed to elucidate its function.
Of the purchased antibodies, only PDCD4 could be used for
the immunolocalization test. We found that Pdcd4 was highly
expressed in the spermatogonia of both PND 8.5 and 10.5 testes.
More seminiferous tubules were found to have PDCD4 positive
spermatogonia at PND 10.5 compared with PND 8.5. And for
PDCD4 positive seminiferous tubules, we found that the ratio of
PDCD4 positive cells was also higher at PND 10.5. Although Pdcd4
was upregulated after RA stimulation in somatic cells [32], itwas
downregulated in SSCs. The results of our study revealed that
Pdcd4 might not be the direct target of RA in the initiation of
meiosis. Pdcd4 is a tumor suppressor that binds to the eukaryotic
translation initiation factor 4A1 and inhibits its function by
preventing RNA binding [42,43]. In 2012, Cash and Andrews [44]
reported the mutant phenotype of loss-of-function pdcd4,
Bam-dependent differentiation of female germline stem cells
may be delayed, leading to an accumulation of pre-cystoblasts in
Drosophila melanogaster. It is possible that Pdcd4 is necessary for
mouse spermatogonial differentiation, which involves the entry
of spermatogonia into meiotic prophase.

5. Conclusions
We carried out comparative proteomic analysis of mouse
testes during the first wave of spermatogenesis, and characterized
the proteomic profile involving meiotic initiation. Our
results indicate that RA might be important for the meiotic
initiation of germ cells in the postnatal testes. The findings of
our study can be a rich resource for further elucidation of the
mechanism of male meiosis initiation.
Supplementary data to this article can be found online at
http://dx.doi.org/10.1016/j.jprot.2015.02.015.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เปลี่ยนจากการ undifferentiated รัฐต่าง ๆใน spermatogonia กำหนดเปิดใช้งานตามปกติ RA และเกี่ยวข้องโดยชุดตัวรับนิพจน์ เมื่อ RAกระตุ้น ประชากร spermatogonial undifferentiated ในรายการเซลล์ SSC transits ในรัฐต่าง ๆ และนิพจน์ระดับของยีนต่าง ๆ เพิ่มขึ้น [36,37] การตรวจสอบว่ายีน Tfrc ถูกจริง ๆ ตอบสนอง RA เราถือว่าการคงบรรทัด SSC เมาส์ที่ก่อตั้งขึ้นในแล็บของเรา [23] มี ATRA หรือDMSO (รถควบคุม) กับกระตุ้น 24 ชม ผลลัพธ์พบว่า Stra8, Scp3 และ Tfrc ก็มากขึ้นควบคุมในขณะที่ Camk1 และ Pdcd4 downregulated หลังจากเหนี่ยวนำ RAดังนั้น เช่นเดียวกับ Stra8, Tfrc ก็ยีน RA ตอบสนองในจมูกมีเซลล์ตัวรับ transferrin หรือ Tfrc เรียกอีกอย่างว่า CD71erythropoiesis และพัฒนาระบบประสาท [38,39] สกินเนอร์และ Griswold รายงานว่า การเพาะเลี้ยงเซลล์ Sertoli ราษฎร์ secretedtransferrin แม้ว่าความสำคัญของ transferrin ในการสร้างสเปิร์มยังคงจะ เต็ม elucidated [40] Vannelli et alพบ transferrin ที่ส่วนใหญ่ตั้งอยู่ในเซลล์ Sertoliมนุษย์ seminiferous tubules ขณะ Tfrc พบเฉพาะในspermatocytes และต้น spermatids [41] ในการศึกษาปัจจุบันเนื่องจากคุณภาพที่ไม่ดีของใช้ใน immunolocalization แอนตี้ไม่สามารถรับโทรศัพท์มือถือแปลของ TFRC ใน wewereseminiferous tubules พร้อมกับรายงานก่อนหน้านี้ เราผลการวิจัยแนะนำว่า TFRC อาจมีบทบาทสำคัญในระหว่างการเริ่มต้นไมโอซิสในหนูเพศชาย อย่างไรก็ตาม เพิ่มเติมศึกษาได้ต้อง elucidate ของฟังก์ชันของแอนตี้ซื้อ PDCD4 เท่านั้นสามารถใช้การทดสอบ immunolocalization เราพบว่า Pdcd4 มีสูงแสดงใน spermatogonia ภงด. 8.5 และลิ้ม 10.5พบมาก seminiferous tubules จะบวก PDCD4spermatogonia ที่เปรียบเทียบกับภงด. 8.5 10.5 ภงด และสำหรับPDCD4 บวก seminiferous tubules เราพบว่าอัตราส่วนของPDCD4 บวกเซลล์ยังสูงที่ 10.5 ภงด แม้ว่า Pdcd4มี upregulated หลังจากกระตุ้น RA ในมาติกเซลล์ [32], มันเป็นdownregulated ใน SSCs เปิดเผยผลการศึกษาของเราที่Pdcd4 อาจเป็นเป้าหมายโดยตรงของ RA ในการเริ่มต้นของไมโอซิส Pdcd4 เป็นตัวป้องกันไฟเกินมีเนื้องอกที่ binds ไปใน eukaryoticเริ่มต้นแปลปัจจัย 4A1 และยับยั้งหน้าที่โดยป้องกันการผูกอาร์เอ็นเอ [42,43] ใน 2012 เงินสดและแอนดรูวส์ [44]รายงาน phenotype การกลายพันธุ์ของสูญเสียฟังก์ชัน pdcd4สร้างความแตกต่างขึ้นอยู่กับการอำนวยการมูลนิธิหญิง germline สเต็มเซลล์อาจจะล่าช้า นำไปสู่การสะสมของ cystoblasts ก่อนในแมลงวันทอง เป็นไปได้ว่า Pdcd4 จำเป็นสำหรับเมาส์ spermatogonial สร้างความแตกต่าง ซึ่งเกี่ยวข้องกับรายการของ spermatogonia ใน meiotic prophase 5. บทสรุปเราดำเนินการวิเคราะห์เปรียบเทียบ proteomic ของเมาส์ลิ้มลองช่วงคลื่นแรกของการสร้างสเปิร์ม และลักษณะโพรไฟล์ proteomic ที่เกี่ยวข้องกับการเริ่มต้น meiotic ของเราผลลัพธ์บ่งชี้ว่า RA อาจสำคัญสำหรับแบบ meioticเริ่มต้นของเซลล์จมูกลิ้ม postnatal ผลการวิจัยของเราสามารถรวยทรัพยากรสำหรับ elucidation เพิ่มเติมของการกลไกของการเริ่มต้นชายไมโอซิสข้อมูลเสริมบทความนี้สามารถพบออนไลน์ที่http://dx.doi.org/10.1016/j.jprot.2015.02.015

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เปลี่ยนจากความแตกต่างไปยังรัฐที่มีความแตกต่าง
ใน spermatogonia ถูกควบคุมโดยการเปิดใช้งานการส่งสัญญาณ RA และ
เกี่ยวข้องกับความสำเร็จของชุดการแสดงออกของตัวรับ เมื่อ RA
กระตุ้นประชากร spermatogonial ความแตกต่างใน
เซลล์ SSC transits เข้าสู่สถานะที่แตกต่างกันและ
ระดับการแสดงออกของยีนหลายจะเพิ่มขึ้น [36,37] เมื่อต้องการตรวจสอบ
ว่ายีน TFRC เป็น RA ตอบสนองจริงๆที่เราได้รับการรักษา
เส้น SSC เมาส์มั่นคงขึ้นในห้องปฏิบัติการของเรา [23] ด้วย ATRA หรือ
DMSO (การควบคุมรถ) กับการกระตุ้น 24 ชั่วโมง ผล
การศึกษาพบว่า Stra8, Scp3 และ TFRC อย่างมีนัยสำคัญขึ้นควบคุม
ในขณะที่ Camk1 และ Pdcd4 ถูก downregulated หลังจากเหนี่ยวนำ RA.
ดังนั้นคล้ายกับ Stra8, TFRC นี้ยังมียีน RA-ตอบสนองใน
เซลล์สืบพันธุ์.
รับ Transferrin หรือ TFRC ยังเป็นที่รู้จัก เป็น CD71 เป็นสิ่งจำเป็น
สำหรับการสร้างเม็ดเลือดแดงและการพัฒนาระบบประสาท [38,39] สกินเนอร์
และ Griswold รายงานว่าหนู Sertoli เซลล์ในหลอดทดลองหลั่ง
transferrin แม้ว่าความสำคัญของการสร้างอสุจิใน transferrin
ยังคงได้รับการอธิบายอย่างเต็มที่ [40] Vannelli et al.
พบว่า transferrin ถูกส่วนใหญ่ตั้งอยู่ในเซลล์ Sertoli ใน
หลอดสร้างอสุจิของมนุษย์ในขณะที่ TFRC พบเฉพาะใน
spermatocytes และ spermatids ต้น [41] ในการศึกษาครั้งนี้
เป็นเพราะคุณภาพของแอนติบอดีที่ใช้ในการ immunolocalization,
wewere ไม่สามารถที่จะได้รับการแปลของเซลล์ TFRC ใน
หลอดสร้างอสุจิ ประกอบกับรายงานก่อนหน้านี้ของเรา
ผลการวิจัยชี้ให้เห็นว่า TFRC อาจมีบทบาทสำคัญใน
การริเริ่มเซลล์ชนิดหนึ่งในหนูเพศชาย อย่างไรก็ตามการศึกษาต่อไปจะ
จำเป็นในการอธิบายการทำงานของ.
ของแอนติบอดีซื้อเพียง PDCD4 สามารถนำมาใช้สำหรับ
การทดสอบ immunolocalization เราพบว่า Pdcd4 สูงได้รับการ
แสดงใน spermatogonia ทั้ง PND 8.5 และ 10.5 อัณฑะ.
tubules เพิ่มเติมอสุจิที่พบว่ามี PDCD4 บวก
spermatogonia ที่ PND 10.5 เมื่อเทียบกับ PND 8.5 และสำหรับ
หลอดสร้างอสุจิ PDCD4 บวกเราพบว่าอัตราส่วนของ
PDCD4 เซลล์บวกก็ยังสูงกว่าที่ PND 10.5 แม้ว่า Pdcd4
ถูก upregulated หลังจากการกระตุ้น RA ในเซลล์ร่างกาย [32] เป็นการกำหนดข้อสัญญา
downregulated ใน SSCs ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่า
Pdcd4 อาจจะไม่ได้เป็นเป้าหมายโดยตรงของ RA ในการเริ่มต้นของ
เซลล์ชนิดหนึ่ง Pdcd4 เป็นต้านมะเร็งที่ผูกกับยูคาริโอ
เริ่มต้นการแปลปัจจัย 4A1 และยับยั้งการทำงานของมันโดย
การป้องกันไม่ให้มีผลผูกพันอาร์เอ็นเอ [42,43] ในปี 2012 เงินสดและแอนดรู [44]
รายงานฟีโนไทป์กลายพันธุ์ของ pdcd4 การสูญเสียของฟังก์ชั่น
ปังขึ้นอยู่กับความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิด germline หญิง
อาจมีความล่าช้าที่นำไปสู่การสะสมของ cystoblasts ก่อนใน
แมลงวันทอง เป็นไปได้ว่า Pdcd4 เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับ
ความแตกต่างของเมาส์ spermatogonial ซึ่งเกี่ยวข้องกับรายการ
ของ spermatogonia เข้าไปแวะ meiotic. 5 สรุปเราดำเนินการวิเคราะห์โปรตีนเปรียบเทียบเมาส์อัณฑะในช่วงคลื่นลูกแรกของการสร้างอสุจิและลักษณะรายละเอียดโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการเริ่มต้น meiotic ของเราแสดงให้เห็นว่าผล RA อาจจะเป็นสิ่งสำคัญสำหรับ meiotic การเริ่มต้นของเซลล์สืบพันธุ์ในอัณฑะหลังคลอด ผลการศึกษาของเราสามารถเป็นทรัพยากรที่อุดมไปด้วยสำหรับการชี้แจงต่อไปของกลไกของการเริ่มต้นเซลล์ชนิดหนึ่งชาย. ข้อมูลเพิ่มเติมไปยังบทความนี้สามารถพบได้ทั่วไปที่http://dx.doi.org/10.1016/j.jprot.2015.02.015 .

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เปลี่ยนจากที่ไม่แตกต่างกันไปจากรัฐ
ในอัณฑะที่ถูกควบคุมโดยการกระตุ้นสัญญาณรา
เกี่ยวข้องกับการแสดงออกของตัวรับที่สำเร็จ Kit เมื่อกระตุ้นรา
, ประชากรไม่แตกต่างกันใน spermatogonial
SSC ไพรที transits ในแตกต่างรัฐ และระดับการแสดงออกของยีน
หลายเพิ่มขึ้น [ 36,37 ] เพื่อตรวจสอบ
ไม่ว่าเศรษฐกิจของรา ตอบจริงๆ เราถือว่า
มั่นคงเมาส์ SSC สายก่อตั้งขึ้นใน [ 23 ] กับภัทรแล็บหรือ
DMSO ( การควบคุมยานพาหนะ ) กับสิ่งเร้า 24 H . ผลการวิจัยพบว่า stra8 scp3
, , และตัวเลขสถิติขึ้นการควบคุม
ในขณะที่ camk1 pdcd4 ) และหลังการ downregulated รา .
จึงคล้ายกับ stra8 หากยังเป็นยีนที่ตอบสนองต่อช่วงรา

ในเซลล์สืบพันธุ์ทราน เฟอร์รินตัวรับ หรือหากยังเป็นที่รู้จัก cd71 จำเป็นต้องมี
สำหรับราชวงศ์โจวและการพัฒนา ( ระบบประสาท 38,39 ] และสกินเนอร์
Griswold รายงานว่าหนูเซอโตไลเซลล์ในหลอดทดลองหลั่ง
ได้รับแม้ว่าความสำคัญของทรานสเฟอรินในการสร้างสเปิร์ม
ยังคงเป็นอย่างมาก [ 40 ] vannelli et al .
พบว่าส่วนใหญ่ได้รับอยู่ในเซลล์ใน
เซอโตไลมนุษย์หลอด ในขณะที่ ศูนย์วิจัยกสิกรไทย พบเฉพาะในวัยเด็กและเส้นใย
primary [ 41 ] ในการศึกษา
เพราะคุณภาพของแอนติบอดีที่ใช้ใน immunolocalization
, พวกเราไม่สามารถที่จะได้รับการแปลโดยในมือถือของ
หลอด . ด้วยกันกับรายงานก่อนหน้านี้พบว่าศูนย์ของเรา

อาจมีบทบาทสำคัญในไมโอซิสริเริ่มในหนูเพศผู้ อย่างไรก็ตาม มีการศึกษาเพิ่มเติม

ต้องอธิบายหน้าที่ของมัน ของที่ซื้อ pdcd4 แอนติบอดีเท่านั้นสามารถใช้
immunolocalization ทดสอบ เราพบว่า pdcd4 สูง
แสดงในอัณฑะของทั้ง PND 8.5 และ 10.5 อัณฑะ .
) ส่วนอัณฑะมากขึ้น พบว่ามี pdcd4 อัณฑะบวก
ที่ PND 10.5 เทียบกับ PND 8.5 . และสำหรับ
pdcd4 บวกหลอด เราจะพบว่า อัตราส่วนของ
เซลล์บวก pdcd4 ยังสูงกว่าที่ PND 10.5 แม้ว่า pdcd4
คือ upregulated หลังจากรากระตุ้นเทียนอบ [ 32 ] ,
downregulated ทั้งในสิงคโปร์ . ผลการศึกษาของเราพบว่า
pdcd4 อาจจะไม่ตรงเป้าหมายของราในการเริ่มต้นของ
เหม่ง . pdcd4 เป็นเนื้องอกเครื่องห้ามที่ผูกกับ eukaryotic
แปลการเริ่มต้นปัจจัย 4a1 และยับยั้งการทำงานของมันโดย
ป้องกัน RNA ผูกพัน [ 42,43 ] ใน 2012 , เงินสดและแอนดรู [ 44 ]
รายงานการกลายพันธุ์ของการสูญเสียการทำงานของ pdcd4
แบม , ขึ้นอยู่กับความแตกต่างของหญิงเยอร์มไลน์สเต็มเซลล์
อาจล่าช้า ทำให้เกิดการสะสมของ cystoblasts ก่อนใน
แมลงวันทอง . เป็นไปได้ว่า pdcd4 ที่จําเป็นสําหรับ
เมาส์ spermatogonial ความแตกต่างที่เกี่ยวข้องกับรายการของอัณฑะในเซลล์โปรเฟส


5 สรุป
เราดำเนินการวิเคราะห์เปรียบเทียบโปรตีนอัณฑะเมาส์
ระหว่างคลื่นลูกแรกของการสร้างสเปิร์ม และลักษณะโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับ
โปรไฟล์เซลล์เริ่มต้น ผลของเรา
แสดงว่าราอาจจะสำคัญสำหรับเซลล์
การริเริ่มของ เซลล์สืบพันธุ์ในอัณฑะหลังคลอด . ผล
การศึกษาของเราสามารถเป็นทรัพยากรที่อุดมไปด้วยสำหรับคำชี้แจงเพิ่มเติมของกลไกของการชายเหม่ง
.
ข้อมูลเพิ่มเติมบทความนี้สามารถพบออนไลน์ที่
http://dx.doi.org/10.1016/j.jprot.2015.02.015 .