Determination of myofibrillar prote

Determination of myofibrillar protein content
Myofibrillar proteins were prepared and analyzed as described
previously (Xia and others 2009) with minor modifications.
Briefly, 5.0 g of each sample was minced and homogenized (10000
rpm) in 10-volumes of ice-cold buffer (pH 7.0, 20 mmol/L
Tris-maleate containing 0.05 mol/L KCl) using a blender (T18
ULTRA–TURRAX, IKA, Staufen, Germany) for 60 s at 0 to
4 °C. The resulting homogenate was centrifuged (CR22N, Hitachi,
Tokyo, Japan) at 10000 × g for 15 min (0 to 4 °C), and
the supernatant was discarded. The sediment was then collected,
resuspended in the same buffer, and extracted again. After 2 repeated
cycles of homogenization and centrifugation, the resulting
sediment was added to 10-volumes of the same ice-cold buffer.
The mixture was then homogenized and centrifuged at 6000 ×
g for 15 min at 4 °C. The resulting supernatant was regarded as
the myofibrillar protein solution, the concentration of which was
determined after proper dilution using the method described by
Lowry and others (1951); bovine serum albumin was used as the
standard. All analyses were performed in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การกำหนดปริมาณโปรตีน myofibrillarโปรตีน myofibrillar เตรียม และวิเคราะห์ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (เซี่ยและอื่น ๆ 2009) มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยสั้น ๆ 5.0 g ของแต่ละอย่างถูกสับ และ homogenized (10000รอบต่อนาที) ในปริมาณ 10 ฉ่ำบัฟเฟอร์ (pH 7.0, 20 mmol/LTris-maleate 0.05 mol/L KCl ที่ประกอบด้วย) โดยใช้เครื่องปั่น (T18ULTRA–TURRAX, IKA, Staufen เยอรมนี) 60 s ที่ 0 ถึง4 องศาเซลเซียส Homogenate ผลได้ผลิตภัณฑ์ (CR22N ฮิตาชิโตเกียว ประเทศญี่ปุ่น) ที่ 10000 × g 15 นาที (0-4 ° C), และsupernatant ถูกละทิ้ง จากนั้นรวบรวมตะกอนresuspended ในบัฟเฟอร์เดียว และสกัดอีก หลังจากที่ 2 ซ้ำรอบ homogenization และหมุนเหวี่ยง ผลถูกตะกอนปริมาณ 10 ของบัฟเฟอร์ฉ่ำเหมือนกันส่วนผสมแล้ว homogenized และจากที่ 6000 ×g 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส Supernatant ผลถือว่าเป็นโซลูชัน myofibrillar โปรตีน ความเข้มข้นที่ได้กำหนดหลังจากการเจือจางที่เหมาะสมโดยใช้วิธีการอธิบายโดยLowry และอื่น ๆ (1951); ใช้วัว serum albumin เป็นตัวมาตรฐาน ดำเนินการวิเคราะห์ทั้งหมดลข้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การหาปริมาณโปรตีนกล้ามเนื้อ
โปรตีนหนึ่งเนื้อได้จัดทำและวิเคราะห์ตามที่อธิบายไว้
ก่อนหน้านี้ (เซี่ยและคนอื่น ๆ 2009) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย.
สั้น ๆ , 5.0 กรัมของแต่ละตัวอย่างถูกสับและปั่น (10000
รอบต่อนาที) ใน 10 เล่มของบัฟเฟอร์เย็น (pH 7.0 20 มิลลิโมล / ลิตร
Tris-maleate มี 0.05 mol / L โพแทสเซียมคลอไรด์) โดยใช้เครื่องปั่น (T18
พิเศษ TURRAX, IKA, Staufen, เยอรมนี) 60 s ที่ 0 ที่จะ
4 องศาเซลเซียส homogenate ส่งผลให้ได้รับการหมุนเหวี่ยง (CR22N Hitachi,
กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) ที่ 10000 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาที (0-4 ° C) และ
สารละลายที่ถูกทิ้ง ตะกอนที่ถูกเก็บรวบรวมแล้ว
resuspended ในบัฟเฟอร์เดียวกันและสกัดอีกครั้ง หลังจากนั้น 2 ซ้ำแล้วซ้ำอีก
รอบของการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันและหมุนเหวี่ยงที่เกิด
ตะกอนถูกบันทึกอยู่ใน 10 เล่มของบัฟเฟอร์เย็นเดียวกัน.
ส่วนผสมที่ถูกแล้วหดหายและหมุนเหวี่ยงที่ 6000 ×
กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส ใสส่งผลให้ได้รับการยกย่องว่าเป็น
ทางออกที่โปรตีนกล้ามเนื้อเข้มข้นที่ถูก
กำหนดหลังจากการลดสัดส่วนที่เหมาะสมโดยใช้วิธีการอธิบายโดย
โลว์รีย์และคนอื่น ๆ (1951); เซรั่มอัลบูมิวัวถูกใช้เป็น
มาตรฐาน การวิเคราะห์ทั้งหมดถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การหาปริมาณโปรตีนลดลงเตรียมและวิเคราะห์โปรตีนลดลง ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( Xia และผู้อื่น 2009 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยสั้น , 5.0 กรัมแต่ละตัวอย่างถูกบด , สับและรอบต่อนาที ) ใน 10 ของปริมาณน้ำแข็งที่เย็น ( บัฟเฟอร์ pH 7.0 , 20 มิลลิโมล / ลิตรบริษัทมาลีเที่มี 0.05 โมลต่อลิตร ) ใช้เครื่องปั่น ( t18 .Ultra – turrax , อิกะ Staufen , เยอรมนี ) , 60 วินาทีที่ 0 ถึง4 องศา ซึ่งแยกเป็นระดับ ( cr22n ฮิตาชิโตเกียว , ญี่ปุ่น ) ที่ 10 , 000 × G 15 นาที ( 4 ° C ) , และและน่านถูกทิ้ง ตะกอนที่ได้รวบรวมresuspended ในบัฟเฟอร์เดียวกันและสกัดอีกครั้ง หลังจาก 2 ซ้ำรอบของการปั่นและผลตะกอนที่ถูกเพิ่มเข้าไปใน 10 เล่มเดียวกันเย็นบัฟเฟอร์ผสมส่วนผสมแล้วบดไฟฟ้า 6000 ×กรัมสำหรับ 15 นาทีที่ 4 องศา ซึ่งถือว่าสูงคือโดยโซลูชั่นด้านโปรตีน ความเข้มข้นของซึ่งเป็นพิจารณาหลังจากเจือจางที่เหมาะสมโดยใช้วิธีการที่อธิบายโดยโลว์รี่ และอื่น ๆ ( 1951 ) ; อัลบูมินถูกใช้เป็นมาตรฐาน ทั้งหมดที่วิเคราะห์ได้ทั้งสามใบ