In most eukaryotic cells, microtubu

In most eukaryotic cells, microtubules and filamentous actin (F-actin) provide tracks on which intracellular
organelles move using molecular motors. Here we report that cytoplasmic movement of both
mitochondria and lysosomes is slowed by F-actin meshwork formation in pancreatic duct epithelial
cells (PDEC). Mitochondria and lysosomes were labeled with fluorescent Mitotracker Red CMXRos and
Lysotracker Red DND-99, respectively, and their movements were monitored using epi-fluorescence and
confocal microscopy. Mitochondria and lysosomes moving actively at rest stopped rapidly within several
seconds after an intracellular Ca2+ rise induced by activation of P2Y2 purinergic receptors. The ‘freezing’ of
the organelles was inhibited by blocking the Ca2+ rise or by pretreatment with latrunculin B, an inhibitor
of F-actin formation. Indeed, this freezing effect on the organelles was accompanied by the formation of
F-actin in the whole cytoplasm as stained with Alexa 488-phalloidin in fixed PDEC. For real-time monitoring
of F-actin formation in live cells, we expressed sGFP-fimbrin actin binding domain2 (fABD2) in PDEC.
Rapid recruitment of the fluorescent probe near the nucleus and lysosomes suggested dense F-actin formation
around intracellular structures. The development of F-actin paralleled that of organelle freezing.
We conclude that rapid Ca2+-dependent F-actin formation physically restrains intracellular organelles
and reduces their mobility non-selectively in PDEC.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในเซลล์สุด eukaryotic, microtubules และแอกติน filamentous (F-แอกติน) ให้แทร็คที่ intracellularorganelles ย้ายใช้มอเตอร์ระดับโมเลกุล ที่นี่เรารายงานความเคลื่อนไหวว่า cytoplasmic ทั้งmitochondria และ lysosomes จะชะลอตัว โดยกำเนิด meshwork แอกติน F ใน epithelial ท่อตับอ่อนเซลล์ (PDEC) Mitochondria และ lysosomes ถูกติดป้ายเรืองแสง Mitotracker สีแดง CMXRos และLysotracker แดง DND-99 ตาม ลำดับ และความเคลื่อนไหวของพวกเขาถูกตรวจสอบโดยใช้ epi fluorescence และconfocal microscopy การ Mitochondria และ lysosomes ย้ายที่เหลือหยุดอย่างรวดเร็วภายในหลายอย่างวินาทีหลังจาก intracellular Ca2 + เพิ่มขึ้นเกิดจากการเปิดใช้งาน P2Y2 purinergic receptors 'แช่แข็ง' ของorganelles ถูกห้าม โดยการบล็อคเพิ่มขึ้น Ca2 + หรือ pretreatment ด้วย latrunculin B ผลการของแอกติน F ก่อ แน่นอน ผลนี้ตรึง organelles ถูกพร้อม ด้วยการก่อตัวของF-แอกตินในไซโทพลาซึมทั้งเป็นทิ้งคราบกับ Alexa 488 phalloidin ใน PDEC ถาวร สำหรับการตรวจสอบแบบเรียลไทม์ของแอกติน F ก่อตัวในเซลล์สด เราแสดง domain2 ผูกแอกติน sGFP fimbrin (fABD2) ใน PDECการสรรหาบุคลากรของโพรบเรืองแสงใกล้นิวเคลียสและ lysosomes แนะนำหนาแน่นแอกติน F ก่อตัวอย่างรวดเร็วรอบโครง intracellular การพัฒนาของแอกติน F แห่งดวงของออร์แกเนลล์ที่แช่แข็งเราสรุปอย่างรวดเร็วว่า Ca2 + -ขึ้นอยู่กับแอกติน F ก่อร่างกายยับยั้ง intracellular organellesลดการเคลื่อนไหวไม่ใช่เลือกใน PDEC

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในเซลล์ eukaryotic ที่สุด microtubules และโปรตีนใย (F-โปรตีน) จัดให้มีแทร็คที่เซลล์
organelles move ใช้มอเตอร์โมเลกุล ที่นี่เรารายงานว่าการเคลื่อนไหวของทั้งสองนิวเคลียส
mitochondria และ lysosomes จะชะลอตัวโดย
F-โปรตีนก่อตาข่ายในเยื่อบุผิวท่อตับอ่อนเซลล์(PDEC) Mitochondria และ lysosomes มีป้ายที่มีการเรืองแสงสีแดง Mitotracker CMXRos และ
Lysotracker แดง DND-99 ตามลำดับและการเคลื่อนไหวของพวกเขาถูกตรวจสอบโดยใช้
EPI-เรืองแสงและกล้องจุลทรรศน์confocal Mitochondria และ lysosomes
ย้ายอย่างแข็งขันในส่วนที่เหลือหยุดอย่างรวดเร็วภายในไม่กี่วินาทีหลังจากCa2 + เซลล์ที่เพิ่มขึ้นเกิดจากการกระตุ้นการทำงานของผู้รับ purinergic P2Y2 การแช่แข็งของ
organelles ถูกยับยั้งโดยการปิดกั้น Ca2 + เพิ่มขึ้นหรือโดยการปรับสภาพด้วย B latrunculin,
ยับยั้งการก่อตัวF-โปรตีน แท้จริงนี้มีผลบังคับใช้ในการแช่แข็งอวัยวะที่มาพร้อมกับการก่อตัวของ
F-โปรตีนในเซลล์ทั้งหมดเป็นย้อมด้วยสี Alexa 488-phalloidin ใน PDEC คงที่ สำหรับการตรวจสอบเวลาจริงของการก่อ F-โปรตีนในเซลล์สดที่เราแสดงความโปรตีน sGFP-fimbrin ผูกพัน domain2 (fABD2) ใน PDEC. รับสมัครอย่างรวดเร็วของหัววัดเรืองแสงที่อยู่ใกล้นิวเคลียสและ lysosomes แนะนำหนาแน่นก่อ F-โปรตีนรอบโครงสร้างภายในเซลล์ การพัฒนา F-โปรตีนขนานของการแช่แข็ง organelle. เราสรุปได้ว่ารวดเร็ว Ca2 + -dependent ก่อ F-โปรตีนยับยั้งร่างกายอวัยวะภายในเซลล์และลดการเคลื่อนไหวของพวกเขาที่ไม่ได้เลือกในPDEC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในเซลล์ยูคาริโอติกมากที่สุด และเส้นใยเส้นใย actin ( f-actin ) ให้ติดตามที่เซลล์ของโมเลกุล
ย้ายโดยใช้มอเตอร์ ที่นี่เราพบรายงานว่า การเคลื่อนไหวของทั้งสอง
) ไลโซโซมจะชะลอตัว โดย f-actin meshwork และก่อตัวในท่อตับอ่อนเซลล์บุผิว (
pdec ) และมีป้ายเรืองแสง lysosomes ) มี mitotracker และ
cmxros สีแดงlysotracker สีแดง dnd-99 ตามลำดับ และการเคลื่อนไหวของพวกเขาถูกตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง EPI และด้วย
. และย้ายที่พัก ) ไลโซโซมอย่างหยุดอย่างรวดเร็วภายในเวลาหลายวินาทีหลังจากที่
โดยการกระตุ้นเซลล์ที่มีแคลเซียมเพิ่มขึ้น p2y2 purinergic receptor ' หนาว '
ที่ที่ของถูกยับยั้งโดยการบล็อกแคลเซียมเพิ่มขึ้น หรือการ latrunculin B ,
f-actin ยับยั้งการก่อตัวของ . แน่นอน , นี้จะมีผลต่ออวัยวะพร้อมกับการก่อตัวของ
f-actin ในไซโตพลาสซึมทั้งหมดเป็นเปื้อนกับ Alexa 488 phalloidin ถาวร pdec . สำหรับการตรวจสอบเวลาจริงของการ f-actin
ในเซลล์มีชีวิตเราแสดง sgfp fimbrin actin ผูก domain2 ( fabd2 ) ใน pdec .
สรรหาอย่างรวดเร็วของโพรบเรืองแสงใกล้นิวเคลียส และไลโซโซมพบหนาแน่น f-actin ก่อตัว
รอบโครงสร้างภายในเซลล์ . การพัฒนา f-actin ขนานที่แช่แข็งออร์แกเนลล์ .
สรุปว่าอย่างรวดเร็วการ f-actin ขึ้นอยู่กับแคลเซียมร่างกายยับยั้งเซลล์ออร์แกเนลล์
และลดการเคลื่อนย้ายไม่เลือกใน pdec .